遗传学实验大纲1207Word文档下载推荐.docx
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(1).掌握各实验的原理及方法。
(2).通过果蝇杂交实验,分析生物性状表现,从而认识和加深理解遗传学的三大遗传规律,区分正交与反交的差异。
(3).学习研究数量性状遗传的主要方法和遗传率的估算方法,了解数量性状和数量性状遗传的特点,正确理解数量性状与质量性状的区别与联系。
(4).鉴别各种染色体结构变异在减数分裂中细胞学特征,掌握分子遗传学的基本理论。
(5).掌握分子遗传学基本实验操作技术,了解分子遗传学在实际应用中的基本操作流程。
三、考核形式及要求
实验课一方面要重视实验课堂表现,包括实验课出勤率,对实验目的和原理的理解和把握程度,同组同学合作情况,实验动手能力和操作技巧,实验现象的观察能力和分析能力,自行设计实验的能力,实验方法和实验结果的正确性,实验器材设备的正确使用,维护实验课堂秩序以及实验室卫生清扫等诸多方面综合考查学生的综合素质,另一方面要求学生认真完成实验报告。
1.实验报告:
(1).内容包括:
实验序次、实验名称、实验日期、实验目的、实验原理、实验材料、试剂及器具、实验方法或步骤及注意事项、实验结果、讨论等内容。
(2).要求:
独立完成,目的明确,原理清楚,操作规范正确,结果真实可信,绘图直观准确。
2.实验课要求学生严肃认真,规范细心,手脑并用,勤于动手,善于思考,做到以下几点:
(1).课前预习:
明确目的,掌握原理,复习相关的理论课内容,了解操作方法和程序,了解可能观察到的现象及结果。
(2).课堂操作:
规范操作,认真观察,团结协作,安静卫生。
按实验操作要求规范操作,爱护仪器设备,不要随意借用或交换仪器器具,实验台上仪器器具摆放整齐,如有损坏报告老师并填写记录。
要求课堂上完成绘图和实验数据记录。
(3).课后清扫:
实验完毕要清理实验室卫生,清洗器具,实验仪器和实验材料放回原处并填写仪器使用记录。
要求独立完成实验报告。
实验报告能真实反映实验操作方法、过程及所观察到的现象和实验验结果,并讨论实验方法和结果的正确性以及实验课得失。
3.考核方式:
随堂实验技能成绩与实验报告相结合、实验操作考试与笔试相结合。
4.考核成绩确定:
由实验平时成绩和期末考试成绩两部分组成,分别占实验总成绩的40%和60%;
其中平时成绩包括出勤率、课堂表现、实验操作技能、实验结果和实验报告成绩;
期末考试分实验操作考试与笔试,各占期末考试成绩的50%。
四、实验教材及参考书目
教材:
《遗传学综合实验》李雅轩、赵昕主编,科学出版社,2006.5
Complexgeneticexperiment
《分子生物学实验指导》魏群主编,高等教育出版社出版社,1999
Molecularbiologyexperimentguidance
参考书目:
1.《遗传学实验》河北师范大学、新乡师范学院、北京师范学院、山东师范学院合编,高等教育出版社1985.8
2.《遗传学实验》刘祖洞、江绍慧编,人民教育版社,1980.3
3.《遗传学实验》刘祖洞、江绍慧编,高等教育出版社,1989.4
4.《细胞生物学实验》杨汉民主编,高等教育出版社,1997.4
5.《分子克隆实验指南》J.萨姆布鲁克著,科学出版社,1999
6.《分子生物学实验技术》郝福英主编,北京大学出版社出版社,1999
7.《遗传学实验教程》郭善利,刘林德主编,科学出版社,2004.9
五、实验课内容
序号
项目名称
类别
学时
性质
01
细胞减数分裂观察
必开
3
验证性
02
果蝇唾腺染色体的观察
03
植物染色体畸变的观察
6
设计性
04
果蝇形态、生活史及果蝇培养观察
05
果蝇饲养和杂交综合实验
综合性
06
三点测验和数理统计在遗传学中的应用
07
Hardy-Weinberg遗传定律检验
08
质粒DNA的提取及琼脂糖电泳检测
09
大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
10
PCR基因扩增及PAGE电泳检测技术
11
RAPD扩增和检测分析
12
果蝇的毒理遗传学实验
选开
15
13
果蝇数量性状遗传分析
14
人体X染色质小体的观察
PCR-RFLP
第一部分细胞遗传学实验
实验一
实验编号:
实验名称:
实验学时:
3学时
实验类别:
必做
实验性质:
验证性
实验目的:
1.掌握减数分裂制片技术;
2.掌握动植物细胞减数分裂过程中染色体变化规律,加深对细胞减数分裂的理解。
实验内容:
1.采集玉米大喇叭口期雄花序,固定后,经解剖、染色和压片,显微镜下观察;
2.采集蝗虫并剖取精巢,固定后,经解剖、染色和压片,显微镜下观察。
主要仪器:
光学显微镜
实验二
必做
1.掌握剖离果蝇幼虫的唾腺和制备唾腺染色体玻片标本的方法;
2.观察唾腺染色体的形态,识别不同的染色体臂,注意其巨大染色体特征。
1.幼虫的培养;
2.唾腺的剖取,处理;
3.染色、压片及观察。
主要仪器:
光学显微镜,恒温培养箱。
实验三
6学时
1.使学生了解人工诱导多倍体的原理、方法及其在植物育种上的意义;
2.掌握人工化学方法诱发多倍体的方法,以及利用feulgen染色方法鉴定植物染色体数目的变化技术;
3.学会通过检查染色体畸变情况评价环境污染的细胞遗传学简易方法。
1.学生自行设计处理方案,用秋水仙素诱发植物产生多倍体;
2.通过取材、固定、解离、孚尔根染色法制片、镜检观察;
3.找出根尖细胞中期分裂相,确定诱发成功的细胞,观察加倍根尖细胞的染色体数目。
4.学生自行设计处理方案,用化学药剂或特定污染物处理洋葱或蚕豆根尖细胞,观察细胞有丝分裂时染色体畸变(微核、粘连、聚结、断裂等)。
电热恒温水浴槽,恒温培养箱,光学显微镜,显微数码照相机。
第二部分果蝇杂交综合实验
实验四
1.了解果蝇生活史各个阶段的形态特征;
2.区别雌、雄蝇和几种常见突变型的主要性状;
3.掌握实验果蝇的饲养管理、以及实验室处理方法和技术。
1.生活史的观察:
卵---幼虫---蛹---成虫;
2.成蝇的外部形态和常见的突变类型,区分雌雄果蝇;
3.性状观察方法;
4.培养基的制备。
光学显微镜,电磁炉,恒温培养箱,恒温干燥箱,高温烘箱,超净工作台。
实验五
1.熟悉果蝇材料的动物学特征识别、果蝇食性和生活习性、遗传性状识别;
2.学习和掌握果蝇的饲养、管理技术和有性杂交实验技术;
3.掌握杂交结果的统计分析和检验等方法;
4.检验孟德尔遗传定律,明确伴性遗传和非性连锁基因的遗传方式之异同。
本实验综合了果蝇实验室饲养管理和三个有性杂交实验。
1.原种亲本果蝇品系纯化后,收集处女蝇,分别设计正反交杂交组合;
2.定时观察,成蝇羽化后记录正、反交子一代果蝇性状数目;
3.子一代互交,定时观察,记录子二代正、反交结果;
4.验证孟德尔遗传定律;
分析伴性遗传的主要特点;
撰写实验报告。
实验六
1.掌握三点测交实验技术和基因定位的方法
2.掌握实验数据的记录、整理及数理统计分析和χ2检验方法;
3.验证遗传学第三定律;
4.对染色体上的三个了连锁基因进行定位分析,绘制连锁遗传图。
本实验综合了三点测验和数理统计分析方法在遗传学中的应用等知识点。
1.野生型/黑檀体、三隐型果蝇亲本纯化并收集处女蝇;
2.设计杂交组合进行三点测验,记录测交子代结果;
3.整理实验数据,进行统计学分析和检验,验证遗传学第三定律;
4.计算连锁基因间的交换值和进行基因定位,绘制连锁遗传图。
第三部分群体遗传学、数量遗传学、人类遗传学实验
实验七
1.学习用Hardy-Weinberg定律检验人群中若干性状是否处于遗传平衡状态;
2.加深对Mendel遗传定律的普遍性的理解,加深对遗传平衡定律及群体保持遗传平衡的条件的理解。
强化对现有品种资源的保护意识。
1.检测人群中味盲基因或嗅觉相关基因的频率分布,并检验其遗传平衡;
2.调查人群中若干表型性状相关基因的频率分布,检验其遗传平衡;
3.检测或调查人群中ABO血型相关基因的频率分布,并检验其遗传平衡。
高压灭菌器、电子天平、光学显微镜。
第四部分分子遗传学实验
实验八
1.掌握碱裂解法提取质粒DNA;
2.学会分子生物学实验常用仪器、器具的使用和试剂的配制、保存等;
3.掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作方法和注意事项。
1.分子遗传学实验基本操作和注意事项;
2.碱裂解法提取质粒DNA;
3.电泳基本知识介绍
4.琼脂糖凝胶的制备及电泳条带的判读
恒温培养箱、恒温摇床、高速台式离心机、高压灭菌锅、超净工作台、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外透射仪。
实验九
选做
综合性实验
1.掌握大肠杆菌感受态细胞的制备的方法和技术;
2.掌握外源DNA转化的方法和抗性筛选方法
1.感受态细胞的制备基础知识及方法简介。
2.CaCl2法制备DH5a或JM109感受态细胞。
3.重组DNA热激法转化DH5α感受态细胞
超净工作台、恒温摇床、生化培养箱
实验十
PCR基因扩增及PAGE电泳检测技术
1.学习PCR反应的基本原理、掌握PCR基本实验操作和注意事项;
2.掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的方法。
1.PCR原理和常见PCR方法及其应用介绍;
2.学习引物的设计;
3.利用PCR技术扩增一已知的基因片段;
4.聚丙烯酰胺凝胶制备及电泳检测;
5.通过电泳确定PCR产物的浓度与分子质量。
PCR扩增仪、恒温培养箱、台式离心机、高压灭菌锅、超净工作台、垂直板凝胶电泳系统、紫外透射反射仪。
实验十一
应用随机引物扩增特定模式生物的基因组DNA,并作电泳后谱带分析。
1.模式生物基因组DNA的制备;
2.随机扩增PCR;
3.凝胶谱带的判读与分析。
玻璃匀浆器、脱色摇床、PCR扩增仪、恒温培养箱、冷冻离心机、台式离心机、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外透射仪、高压灭菌锅
第五部分选作实验/课外开放实验
实验十二
15学时
选做
1.掌握果蝇实验室饲养管理技术;
2.学习毒理遗传学实验的要领和基本方法以及实验数据的采集和分析方法。
1.学生查阅资料,选择测试试剂,设计实验方案;
2.果蝇原种扩繁,预试验确定最大耐受剂量和半致死剂量;
3.正试验,记录各测试指标的实验数据,用生物统计学方法分析。
电磁炉,恒温培养箱,高温干燥箱,电子分析天平,超净工作台,光学显微镜。
实验十三
1.学习掌握果蝇实验动物的杂交和回交方法;
2.掌握数量性状的遗传分析方法,并就果蝇常见的体长、体重、发生量等性状作遗传率等遗传参数的估计。
1.果蝇原种扩繁,选集处女蝇;
2.果蝇杂交和回交实验;
3.测量、统计三项指标的实验数据,并进行统计学分析,估算遗传率。
电磁炉,恒温培养箱,高温干燥箱,电子分析天平,超净工作台,光学显微镜,显微测微尺。
实验十四
初步掌握观察与鉴别X—染色质的简易方法,识别其形态特征及所在部位,计算X—染色质小体的频率。
1.口腔颊部粘膜细胞的观察;
2.毛发根部细胞的观察;
3.X—染色质的辨认。
实验十五
学习掌握模式生物各类群基因组DNA特定片段的扩增和限制性片段长度多态性分析方法,为遗传资源分子水平的调查奠定基础。
1.模式生物基因组DNA的制备和PCR扩增。
2.特定DNA片段的酶切、电泳和RFLP分析。
超净工作台、恒温摇床、生化培养箱、低温离心机、台式离心机、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外透射仪、高压灭菌器。
制定:
遗传学教研室
执笔人:
贾永红
审定人: