高中生物实验知识点总结Word格式文档下载.docx
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斐林试剂（甲液：
0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：
0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。
（3）步骤：
取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）
2、脂肪的检测
含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
（2）步骤：
制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央↓
染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）↓
制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）↓
镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）
3、蛋白质的检测
（1）试剂：
双缩脲试剂（A液：
0.1g/mL的NaOH溶液，B液：
0.01g/mL的CuSO4溶液）
（2）步骤：
试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色）考点提示：
（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;
淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
（2）还原性糖植物组织取材条件?
含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：
苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
（3）研磨中为何要加石英砂?
不加石英砂对实验有何影响?
加石英砂是为了使研磨更充分。
不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。
（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法?
混合的目的?
为何要现混现用?
混合后使用;
产生氢氧化铜;
氢氧化铜不稳定。
（5）还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：
浅蓝色棕色砖红色（6）花生种子切片为何要薄?
只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。
（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么?
切片的厚薄不均匀。
（8）脂肪鉴定中乙醇作用?
洗去浮色。
（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?
先加A液的目的。
怎样通过对比看颜色变化?
不能混合;
先加A液的目的是使溶液呈碱性;
先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三观察叶绿体和细胞质流动
1、材料：
新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
2、原理：
叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
知识概要：
取材制片低倍观察高倍观察考点提示：
（1）为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶?
因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。
（2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉?
表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。
（3）怎样加快黑藻细胞质的流动速度?
最适温度是多少?
进行光照、提高水温、切伤部分叶片;
25℃左右。
（4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显?
叶脉附近的细胞。
（5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的?
仍为顺时针。
（6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动?
否，活细胞的细胞质都是流动的。
（7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节?
视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。
（8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化?
叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。
实验四观察有丝分裂
1、材料：
洋葱根尖（葱，蒜）
2、2、步骤：
（一）洋葱根尖的培养
（二）装片的制作
制作流程：
解离→漂洗→染色→制片
1.解离:
药液:
质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精（1:
1混合液）.时间:
3~5min.目的:
使组织中的细胞相互分离开来.
2.漂洗:
用清水漂洗约10min.目的:
洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3.染色:
用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）染色3~5min目的:
使染色体着色,利于观察.
4.制片:
将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:
使细胞分散开来,有利于观察.（三）观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：
细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。
2、换高倍镜下观察：
分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。
（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。
其中，处于分裂间期的细胞数目最多。
考点提示：
（1）培养根尖时，为何要经常换水?
增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。
（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱?
应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。
（3）为何每条根只能用根尖?
取根尖的最佳时间是何时?
为何?
因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂;
上午10时到下午2时;
因为此时细胞分裂活跃。
（4）解离和压片的目的分别是什么?
压片时为何要再加一块载玻片?
解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来;
再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。
（5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么?
压片时用力过大。
（6）解离过程中盐酸的作用是什么?
丙酮可代替吗?
分解和溶解细胞间质;
不能，而硝酸可代替。
（7）为何要漂洗?
洗去盐酸便于染色。
（8）细胞中染色最深的结构是什么?
染色最深的结构是染色质或染色体。
（9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么?
染液浓度过大或染色时间过长。
（10）为何要找分生区?
分生区的特点是什么?
能用高倍物镜找分生区吗?
因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂;
分生区的特点是：
细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态;
不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。
（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多?
间期;
因为在细胞周期中，间期时间最长。
（12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗?
不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。
（13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?
不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。
（14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么?
没有找到分生区细胞;
没有找到处于分裂期的细胞;
染液过稀;
染色时间过短。
实验五比较酶和Fe3+的催化效率
考点提示：
（1）为何要选新鲜的肝脏?
因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。
（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的?
应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。
（3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗?
因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富;
其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。
（4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好?
研磨液效果好;
因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。
（5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管?
不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。
实验六色素的提取和分离
1、原理：
叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素2、步骤：
（1）提取色素研磨
（2）制备滤纸条
（3）画滤液细线：
均匀，直，细，重复若干次（干了之后）（4）分离色素：
不能让滤液细线触及层析液
（5）观察和记录:
结果滤纸条上从上到下依次为:
橙黄色（胡萝卜素）、黄色（叶黄素）、蓝绿色（叶绿素a）、黄绿色（叶绿素b）.考点提示：
（1）对叶片的要求?
为何要去掉叶柄和粗的时脉?
绿色、最好是深绿色。
因为叶柄和叶脉中所含色素很少。
（2）二氧化硅的作用?
不加二氧化硅对实验有何影响?
为了使研磨充分。
不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。
（3）丙酮的作用?
它可用什么来替代?
用水能替代吗?
溶解色素。
它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。
（4）碳酸钙的作用?
不加碳酸钙对实验有何影响?
保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。
不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。
（5）研磨为何要迅速?
要充分?
过滤时为何用布不用滤纸?
研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发;
只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。
色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。
（6）滤纸条为何要剪去两角?
防止两侧层析液扩散过快。
（7）为何不能用钢笔或圆珠笔画线?
因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。
（8）滤液细线为何要直?
为何要重画几次?
防止色素带的重叠;
增加色素量，使色素带的颜色更深一些。
（9）滤液细线为何不能触到层析液?
防止色素溶解到层析液中。
（10）滤纸条上色素为何会分离?
由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。
（11）色素带最宽的是什么色素?
它在层析液中的溶解度比什么色素大一些?
最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。
（12）滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素?
胡萝卜素和叶黄素。
（13）色素带最窄的是第几条色素带?
第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。
实验七观察质壁分离和复原
1、条件：
细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡
2、材料：
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
3、步骤：
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察（液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离）→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察（质壁分离复原）
4、结论:
细胞外溶液浓度>
细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离细胞外溶液浓度<
细胞内溶液浓度，细胞吸水质壁分离复原
知识概要：
制片观察加液观察加水观察
（1）洋葱为何要选紫色的?
若紫色过淡怎么办?
紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化;
缩小光圈，使视野变暗些。
（2）洋葱表皮应撕还是削?
表皮应撕不能削，因为削的表
实验八检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一实验原理：
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
1、可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。
葡萄糖+Cu（OH）2葡萄糖酸+Cu2O↓（砖红色）+H2O，即Cu（OH）2被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。
淀粉遇碘变蓝色。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。
（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。
）
二实验材料
1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。
（因为组织的颜色较浅，易于观察。
2、做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。
3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
三、实验注意事项
1、可溶性糖的鉴定
a.应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu（OH）2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
b.切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu（OH）2生成。
2、蛋白质的鉴定
a.A液和B液也要分开配制，储存。
鉴定时先加A液后加B液;
先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu（OH）2沉淀，而失效。
b、CuSO4溶液不能多加;
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
c.蛋清要先稀释;
如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。
实验九：
观察DNA、RNA在细胞中的分布
1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。
利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
2.盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。
实验十：
用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体
一实验原理：
1.叶绿体的辨认依据：
叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。
2.线粒体辨认依据：
线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
3.健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色
二实验材料：
观察叶绿体时选用：
藓类的叶、黑藻的叶。
取这些材料的原因是：
叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。
若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。
因为表皮细胞不含叶绿体。
三讨论
1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的?
不是。
呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。
2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系?
叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。
如叶绿体在不同光照条件下改变方向。
又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。
实验十一观察植物细胞的吸水和失水
1.质壁分离的原理：
当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。
2.质壁分离复原的原理：
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
二实验材料和方法：
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。
因为液泡呈紫色，易于观察。
也可用水绵代替。
0.3g/ml的蔗糖溶液。
用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。
质壁分离的方法（引流法）：
制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片。
然后，从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。
这样重复几次即可。
质壁分离复原的方法：
改用清水实验。
1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象?
答：
表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离?
不会。
因为红细胞不具细胞壁。
实验十二观察质壁分离和复原
表皮应撕不能削，因为削的表皮往往太厚。
（3）植物细胞为何会出现质壁分离?
动物细胞会吗?
当细胞失去水分时，其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性;
动物细胞不会发生质壁分离，因为动物细胞没有细胞壁。
（4）质壁分离时，液泡大小和颜色的变化?
复原时呢?
细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深;
当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。
（5）若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么?
细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长）
（6）高倍镜使用前，装片如何移动?
若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。
若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，因为显微镜视野中看到的是倒像。
（7）换高倍物镜后，怎样使物像清晰?
视野明暗度会怎样变化?
如何调亮?
换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;
视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。
（8）所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系?
目镜越长，放大倍数越小;
物镜越长，放大倍数越大。
（9）物像清晰后，物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系?
物镜与载玻片之间的距离越小，放大倍数越大。
（10）总放大倍数的计算方法?
放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数?
总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;
放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。
（11）放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系?
放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。
（12）更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上;
更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。
（13）怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度?
①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。
某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。
实验十三比较过氧化氢在不同条件下的分解
一实验原理
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。
经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。
二实验注意事项
1.不让H2O2接触皮肤，H2O2有一定的腐蚀性
2.不可用同一支滴管，由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性
3.肝脏研磨液必须是新鲜的，因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低
4.肝脏研磨要充分，研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积。
实验八影响酶活性的条件（必修一P83）
1.淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注：
市售a-淀粉酶的最适温度约600C
实验九探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91）
1.酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。
方程式（略）
2.CO2可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。
3.橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色。
注意事项：
增加水中氧气的方法：
用橡皮球或气泵通入空气，并用NaOH溶液除去空气中的CO2
实验十四叶绿体色素的提取和分离
一实验原理与方法
1.色素的提取原理：
叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中。
提取方法：
用丙酮、乙醇等能提取色素。
2.色素分离的原理：
层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。
叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
分离方法：
纸层析法。
用毛细吸管在滤纸条的下端沿铅笔线划一条滤液细线，待滤液干后再划一两次，然后将滤纸条插入层析液中（滤液细线不能接触层析液）。
分离结果：
滤纸条上从上
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