植物生理学研究法含试验方法数据共26页文档.docx
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植物生理学研究法含试验方法数据共26页文档
《植物生理学研究法》
单靠“死”记还不行,还得“活”用,姑且称之为“先死后活”吧。
让学生把一周看到或听到的新鲜事记下来,摒弃那些假话套话空话,写出自己的真情实感,篇幅可长可短,并要求运用积累的成语、名言警句等,定期检查点评,选择优秀篇目在班里朗读或展出。
这样,即巩固了所学的材料,又锻炼了学生的写作能力,同时还培养了学生的观察能力、思维能力等等,达到“一石多鸟”的效果。
（设计实验方案、实验报告、课程论文）
要练说，得练听。
听是说的前提，听得准确，才有条件正确模仿，才能不断地掌握高一级水平的语言。
我在教学中，注意听说结合，训练幼儿听的能力，课堂上，我特别重视教师的语言，我对幼儿说话，注意声音清楚，高低起伏，抑扬有致，富有吸引力，这样能引起幼儿的注意。
当我发现有的幼儿不专心听别人发言时，就随时表扬那些静听的幼儿，或是让他重复别人说过的内容，抓住教育时机，要求他们专心听，用心记。
平时我还通过各种趣味活动，培养幼儿边听边记，边听边想，边听边说的能力，如听词对词，听词句说意思，听句子辩正误，听故事讲述故事，听谜语猜谜底，听智力故事，动脑筋，出主意，听儿歌上句，接儿歌下句等，这样幼儿学得生动活泼，轻松愉快，既训练了听的能力，强化了记忆，又发展了思维，为说打下了基础。
专业年级
唐宋或更早之前，针对“经学”“律学”“算学”和“书学”各科目，其相应传授者称为“博士”，这与当今“博士”含义已经相去甚远。
而对那些特别讲授“武事”或讲解“经籍”者，又称“讲师”。
“教授”和“助教”均原为学官称谓。
前者始于宋，乃“宗学”“律学”“医学”“武学”等科目的讲授者；而后者则于西晋武帝时代即已设立了，主要协助国子、博士培养生徒。
“助教”在古代不仅要作入流的学问，其教书育人的职责也十分明晰。
唐代国子学、太学等所设之“助教”一席，也是当朝打眼的学官。
至明清两代，只设国子监（国子学）一科的“助教”，其身价不谓显赫，也称得上朝廷要员。
至此，无论是“博士”“讲师”，还是“教授”“助教”，其今日教师应具有的基本概念都具有了。
姓名
学号
任课教师
开课时间
生命科学学院《植物生理与分子生物学实验室》
《植物生理学研究法》
（课程实习）
盐胁迫下钙对春小麦的生理效应
一、实验设计方案2
二、实验预习报告4
实验一小麦抗逆性的鉴定（电导仪法）4
实验二小麦SOD活性测定（NBT法）5
实验三小麦POD活性测定（愈创木酚法）7
实验四小麦组织中可溶性蛋白含量的测定（Folin--酚试剂法）8
实验五小麦叶绿素含量测定（分光光度法）9
实验六小麦脯氨酸含量测定（茚三酮试剂显色法）11
实验七小麦丙二醛含量测定（TBA法）12
实验八小麦水势测定（水势仪法）13
实验九小麦生物量测定14
三、测定数据记录及计算15
四、课程论文24
得分：
一、《植物生理学研究法》实验设计方案（10分）
论文题目
盐胁迫下钙对春小麦的生理效应
小组成员
选
题
依
据
及
实
验
设
计
选题依据：
盐胁迫是限制作物生长发育和产量的主要环境因素之一。
据统计，我国约有2.7×107hm2不同程度的盐碱地。
并且由于人口增长、工业发展、不合理农业灌溉和施肥等原因,次生盐碱化土壤面积还在继续扩大,直接造成了可用耕地面积的急剧下降,严重威胁着我国的粮食安全。
在人口不断增多、耕地面积不断减少的现实压力下,如何利用大面积的盐碱地发展粮食生产,是迫切需要解决的重大课题。
小麦是我国主要的粮食作物之一,在保障国家粮食安全方面发挥着巨大的作用。
而小麦的抗盐能力相对较弱,特别是在幼苗期、拔节-孕穗期容易引起盐害。
严重限制了小麦产量的进一步提高。
探讨小麦抗盐机理与调控技术对于提高小麦综合生产能力、保障我国粮食安全和促进生态环境保护均有重要意义。
盐碱环境是作物生长和产量提高的重要限制因子，主要影响作物的正常生长发育，并且对作物的光合作用有着严重的抑制作用，高盐碱环境也影响作物水分的吸收和细胞膜的通透性。
钙是植物必需的一种矿质营养元素，它对维持细胞壁、细胞膜以及膜结合蛋白的稳定性，调节无机离子运输，以及作为细胞内生理生化反应的第二信使偶联外信号，调控多种酶活性等都具有重要的作用。
近年来的研究表明，钙能提高植物织或细胞的多种抗性，如抗冷性抗旱性抗热性抗盐性和抗多种矿质元素毒害胁迫等。
本文研究了外源钙对盐胁迫下小麦幼苗各相关生理性状的影响，探讨钙与小麦耐盐性机制之间的关系，以期为耐盐小麦品种的选育以及相关课题的研究提供理论依据和技术支持。
实验设计：
种子用0.1%的HgCl2消毒10min，自来水充分冲洗，然后用蒸馏水浸种24h，播种于盛有石英砂的长方形盘子中，用完全营养液培养。
在温室的自然光照下生长，每4d换1次完全营养液。
选取生长一致的三叶一心期的幼苗，转移到1L塑料烧杯（外裹遮光黑布）中，每杯植苗4株。
每4d换一次完全营养液，待主茎第6叶全展后开始处理分别用：
低盐胁迫（150mmol/LNaCl）、低盐胁迫+4mmol/LCa2+、低盐胁迫+10mmol/LCa2+、高盐胁迫（300mmol/LNaCl）、高盐胁迫+4mmol/LCa2+、高盐胁迫+10mmol/LCa2+,以无NaCl胁迫的小麦为对照。
4d换一次营养液，待主茎第6叶全展后开始处理。
测量不同条件下处理小麦的抗逆性、SOD活性、POD活性、组织中可溶性蛋白含量、叶绿素含量、脯氨酸含量、丙二醛含量、生物量（鲜重、叶长、根长、干重）。
每个指标的测定进行3个重复。
参考文献：
[1]李彩虹,张维军,王毅等.盐胁迫条件下钙对春小麦的生理效应[J].宁夏农林科技,2019,（6）.
[2]朱晓军,杨劲松,梁永超等.盐胁迫下钙对水稻幼苗光合作用及相关生理特性的影响[J].中国农业科学,2019,（10）.
[3]陈武,陈珈.盐胁迫对玉米根尖质膜上受钙激活的蛋白激酶的影响[J].植物生理学报,2019,（4）.
[4]蔡妙珍，罗安程，林咸永，等.Ca2+对过量Fe2+胁迫下水稻保护酶活性及膜脂过氧化的影响.作物学报，2019，29（3）：
447-451.
[5]李明，王根轩.干旱胁迫对甘草幼苗保护酶活性及脂质过氧化作用的影响［J］.生态学报，2019，22（4）：
503-507．
需
要
测
定
的生理
指
标
及方法
实验一小麦抗逆性的鉴定（电导仪法）
实验二小麦SOD活性测定（NBT法）
实验三小麦POD活性测定（愈创木酚法）
实验四小麦组织中可溶性蛋白含量的测定（Folin--酚试剂法）
实验五小麦叶绿素含量测定（分光光度法）
实验六小麦脯氨酸含量测定（茚三酮试剂显色法）
实验七小麦丙二醛含量测定（TBA法）
实验八小麦水势测定（露点水势仪法）
实验九小麦生物量（鲜重、叶长、根长、干重）测定
指导老师对实验设计方案的意见：
指导老师签名：
年月日
二、生理指标预习报告
实验一小麦抗逆性的鉴定（电导仪法）
（一）原理：
逆境（高温或低温）伤害原生质体结构，质膜透性增加，细胞内含物（无机盐）不同程度外渗，使得外液电导度增大（伤害越重，外渗物越多，电导度的增加越大），故可用电导仪法测定外液的电导度增加值而得知膜的伤害程度。
（二）植物材料：
小麦叶片（正常处理、高盐胁迫、低盐胁迫）
（三）仪器设备：
真空抽滤设备、电导仪、恒温水浴锅、试管架、普通具塞、10ml移液管、打孔器、镊子、滤纸等。
（四）试剂配制：
无离子水
（五）实验步骤及注意事项：
1、清洗用具：
实验所用的玻璃器皿用洗衣粉洗→自来水冲洗干净→无离子水润洗→倒置在试管架上备用
2、材料准备：
从各种处理的叶片中选择大小，厚度相对一致发的叶片→分别用自来水冲洗除去表面的污物→再用无离子水清洗→滤纸轻轻吸干表面的水分
3、将正常及不同温度处理叶小片分别放入普通试管中→每个处理做两个重复管，每管放入15片小叶片中
4、叶片抽气，水分交换、测定电导度
空白
正常叶片
高盐胁迫
高盐胁迫+钙
低盐胁迫
低盐胁迫+钙
叶片小块
0
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
无离子水（ml）
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
真空抽气时间
抽气10分钟
水分交换时间
水分交换10分钟
测定初电导值
杀死细胞
沸水浴10分钟
测定终电导值
相对电导率
伤害率
注意事项：
1、所用的各种处理叶片叶龄要一致
2、整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净，也不要用手接触叶片
3、抽气要使叶片下沉才能与水分进行充分交换
4、CO2在水中的溶解度较高，测定电导时要防止CO2气源和呼出的CO2进入试管，以免影响结果的准确性
（六）结果计算公式：
1、相对电导度=初电导值—空白电导值/终电导值—空白电导值
逆境叶片的相对电导度—正常叶片的相对电导度
2、伤害率（%）=
1—正常叶片的相对电导度
（七）参考文献：
1.西北农业大学植物生理生化教研室编．植物生理学实验指导．西安：
陕西科学技术出版社。
1987
实验二小麦SOD活性测定（NBT法）
（一）原理：
SOD是普遍存在于动、植物体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶。
本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。
在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2-，可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。
而SOD可清除O2-，从而抑制了甲腙的形成。
于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。
一个酶活力单位定义为将NBT的还原抑制到对照一半（50％）时所用的酶量。
（二）植物材料：
小麦叶片（正常处理、高盐胁迫、低盐胁迫）
（三）仪器设备：
、高速台式离心机、分光光度计、微量进样器、荧光灯（反应试管处照度为4000Lx）、试管
（四）试剂配制：
1、提取介质：
50mmol/L（pH7.8） 磷酸缓冲液（内含1%不可溶聚乙烯咯烷酮）
2、反应介质：
50mmol/L（内含77.1umol/硝基四唑蓝，，13.37mmol/L
蛋氨酸
3、80.2 umol/L核黄素溶液：
用含有0.1mmol/LEDTA（pH7.8） 磷酸缓冲液配4
4、SOD反应混合液：
3.9ml反应介质+0.1ml80.2umol/L核黄素溶液
（五）实验步骤及注意事项：
1、酶液的提取
将小麦叶片剪细→混合均匀→称0.5g于预冷的研钵中，加入2ml预冷的提取介质及少量的石英砂→研磨成匀浆→再加入4ml缓冲液，研磨均匀后将均浆液倒入聚乙烯离心管→低温（0—4度），4000g离心15min→上清液即为酶液，将上清液倒入离心管，用于SOD活性测定。
2、SOD活性测定
试剂
测定管
对照管
对照管
（参比管
正常
高盐胁迫
高盐胁迫
低盐胁迫
低盐胁迫
酶提取液
100ul
100ul
100ul
100ul
100ul
100ul
100ul
100ul
100ul
100ul
—
—
提取介质
—
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—
—
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100
升级会员 