《DNA重组技术的基本工具》试题库Word文档下载推荐.docx
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3.据调查，随着化学农药的产量和品种逐年增加，害虫的抗药性也不断增加，造成的危害很严重，如近年来棉铃虫在我国大面积爆发成灾，造成经济损失每年达100亿元以上。
针对这种情况，我国科学工作者经研究发现，一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而此毒蛋白对人畜无害。
通过科学技术攻关，我国科学工作者已成功地将该毒蛋白基因导入棉花植株内并实现了表达。
由于棉铃虫吃了新品种“转基因抗虫棉”植株后就会死亡，所以该棉花新品种在近年推广后，已收到了很好的经济效益。
请根据以上所给材料完成下列问题：
1）.害虫抗药性的增强是_________的结果。
2）.“转基因抗虫棉”新品种的培育应用了_________新技术。
3）.在培育“转基因抗虫棉”新品种的过程中，所用的基因的“剪刀”是_________，基因的“针线”是_________，基因的“运载工具”是_________。
4）.“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程是_________。
4.番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。
应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种。
这种转基因番茄已于1993年在美国上市。
请完成问题：
（7分）
1）.促进果实成熟的重要激素是_________。
2）.在培养转基因番茄的操作中，所用的基因的“手术刀”是_________，基因的“缝合针”是_________，基因的运载体_________”。
3）.与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是_________、_________、_________。
5.基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的，这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程。
1）.艾弗里做过的不同类型肺炎双球菌的转化实验，不仅证明了生物的遗传物质是_________，还证明了_________，使得基因工程技术的出现成为可能。
2）._________的发现为DNA的切割、连接以及_________的获得创造了条件。
3）._________，以及_________表明了基因工程的问世。
6.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”（7分）
1）.载体的条件：
①能够在细胞中_________；
②有多个_________，便于外源基因的插入；
③具有_________，供重组DNA的鉴定和选择；
④在宿主细胞内友好借居，不影响宿主细胞的生命活动。
2）.载体的种类：
①质粒是一种裸露的、结构简单、独立于_________之外、能够_________的双链环状DNA分子。
含有一个至多个_________，供外源基因插入其中，并带有特殊的遗传_________，是基因工程最常用的运载体。
②λ噬菌体的衍生物。
③动植物病毒。
7.DNA连接酶——“分子缝合针”（1分）
1）.作用：
将切下的DNA片段“缝合”，恢复被限制酶切开的_________，拼接成新的DNA分子。
2）.种类
（0分）
8.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（7分）
1）.主要来源：
主要存在于_________中。
2）.作用：
能够识别双链DNA分子的某种_________序列，切开的是每条链特定部位的两个核苷酸之间的_________。
3）.结果：
形成DNA末端。
限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式，即_________和_________。
前者是限制酶切割中轴线的_________产生的，后者是沿_________切割而形成的。
9.限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是−G↓GATCC−，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是−G↓GATC−。
在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
用上述两种酶分别切割质粒和含有目的基因的DNA。
1）.请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性末端。
2）.请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
3）.在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后所形成的黏性末端能否连接起来？
为什么？
10.在药品生产中，有些药品如干扰素、白细胞介素、凝血因子等，以前主要是从生物体的组织、细胞或血液中提取的，由于受原料来源限制，价格十分昂贵，而且产量低，临床供应明显不足。
自20世纪70年代遗传工程发展起来以后，人们逐步地在人体内发现了相应的目的基因，使之与质粒形成重组DNA，并以重组DNA引入大肠杆菌，最后利用这些工程菌，可以高效率地生产出上述各种高质量、低成本的药品，请分析完成下列问题：
1）.在基因工程中，质粒是一种最常用的_________，它广泛地存在于细菌细胞中，是一种很小的环状_________分子。
2）.在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具是_________和_________。
3）.将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成包括_________和_________两个阶段。
11.番茄在运输过程中，由于过早成熟而易腐烂。
应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟的激素的合成能力，可使番茄的贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1993年在美国上市。
请完成下列问题：
（10分）
1）.促进果实成熟的重要激素是_________，它能够发生的化学反应类型有_________、_________和_________。
2）.在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是_________，基因的“针线”是_________，基因的“运输工具”是_________。
3）.与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是_________、_________和__________。
二、单选类（共0分）
1.下图所示为限制酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（）
A.CTTAAG，切点在C和T之间
B.CTTAAG，切点在G和A之间
C.GAATTC，切点在G和A之间
D.GAATTC，切点在C和T之间
2.下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是（）
A.①②
B.①③
C.①④
D.②③
3.水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）
A.促使目的基因导入宿主细胞中
B.促使目的基因在宿主细胞中复制
C.使目的基因容易被检测出来
D.使目的基因容易成功表达
4.质粒是基因工程中最常见的运载体，不属于它的特点的是（）
A.有多个限制酶切点
B.具有标记基因
C.不能自我复制
D.其存在一般不影响宿主细胞的生存
5.质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（）
①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”
A.①③⑤⑦
B.②④⑥
C.①③⑥⑦
D.②③⑥⑦
6.DNA连接酶的重要功能是（）
A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键
B.黏性末端的碱基之间形成氢键
C.两条DNA末端之间的缝隙连接起来
D.A、B、C都不正确
7.下列关于基因工程的叙述，正确的是（）
A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因
B.细菌质粒是基因工程中常用的运载体
C.通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA
D.为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体
8.由于质粒与目的基因具有相同的黏性末端，结合过程中不可能出现下列哪种情况（）
A.形成环状的外源DNA
B.可能形成环状的载体DNA
C.可能出现重组DNA
D.只出现重组DNA
9.基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是（）
A.工具酶、目的基因、运载体、受体细胞
B.重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶
C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞
D.目的基因、限制性内切酶、运载体、体细胞
10.可作为“分子运输车”的是（）
①天然质粒②人工改造的质粒③λ噬菌体的衍生物④动植物病毒
A.①②③④
B.①②③
C.②③④
D.①②④
11.属于“分子缝合针”的是（）
①E·
coliDNA连接酶②T4DNA连接酶③DNA聚合酶④解旋酶⑤RNA聚合酶
A.①②③
B.①②
C.①②⑤
D.②④
12.DNA连接酶的作用是（）
A.使DNA形成双螺旋结构
B.将双螺旋解开
C.使DNA双链缺口的两个磷酸二酯键相连接
D.将氢键连接起来
13.下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是（）
A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性内切酶的活性受温度影响
C.限制性内切酶能识别和切割RNA
D.限制性内切酶可从原核生物中提取
14.科学家们经过多年的努力，创立了一种新生技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（）
A.定向提取生物体的DNA分子
B.定向地对DNA分子进行人工“剪切”
C.在生物体外对DNA分子进行改造
D.定向地改造生物的遗传性状
15.在基因工程中用到的限制性核酸内切酶主要从原核生物中获得，一种限制酶只能识别双链DNA分子上某种特定核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子，这与酶的什么性质相吻合（）
A.高效性
B.具有多样性
C.专一性
D.催化活性受外界条件影响
16.在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段中，需使用（）
A.同种限制酶
B.两种限制酶
C.同种连接酶
D.两种连接酶
17.镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变，检测这种碱基序列的改变必须使用的酶是（）
A.解旋酶
B.DNA连接酶
C.限制性核酸内切酶
D.RNA聚合酶
18.以下说法正确的是（）
A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B.质粒是基因工程中唯一的“分子运输车”
C.“分子运输车”必须具备的条件之一是具有多个酶切位点，以便与外源基因连接
D.所有的DNA连接酶都能够连接黏性末端和平末端
19.用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述不正确的是（）
A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
20.下列有关基因工程技术的正确叙述是（）
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
21.人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是（）
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的相对分子质量
D.便于与外源基因连接
22.下列说法中，正确的是（）
A.DNA连接酶最初是从人体细胞中发现的
B.限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列
C.质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的运载体
D.利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”
23.大肠杆菌的质粒常被用来做基因工程中的载体，这与它的哪项优点有关（）
A.具有黏性末端
B.分子呈环状，便于限制酶切割
C.对宿主细胞的生存没有决定性作用
D.分子小，能自主复制，有标记基因
24.作为基因工程中的“分子运输车”——载体，应具备的条件是（）
①必须有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上
②载体必须具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制
③必须带有标记基因，以便进行重组后的筛选
④必须是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去
⑤大小应合适，太大则不易操作
B.①②③⑤
C.①②④⑤
D.①②③④⑤
25.DNA连接酶的作用是（）
A.识别DNA分子上的特定碱基序列
B.将DNA分子长链切开
C.将碱基进行配对
D.将来源不同的两个DNA片段进行连接
26.下列有关限制性核酸内切酶的说法，正确的是（）
A.限制酶主要从真核生物中分离出来
B.限制酶的识别序列只能由6个核苷酸组成
C.限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并使链间的氢键断裂
D.限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式
27.关于限制性内切酶识别序列和切开部位的特点，叙述错误的是（）
A.所识别的序列都可以找到一条中轴线
B.中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列
C.只识别和切断特定的核苷酸序列
D.在任何部位都能将DNA切开
28.下列对基因工程的理解，正确的是（）
①它是一种按照人们的意愿，定向改造生物遗传特性的工程②对基因进行人为改造③是体外进行的人为的基因重组
④在实验室内，利用相关的酶和原料合成DNA⑤主要技术为体外DNA重组技术和转基因技术⑥在DNA分子水平进行操作
⑦一旦成功，便可遗传
A.①②③④⑤⑥
B.①③④⑤⑥⑦
C.①②③⑤⑥⑦
D.①③⑤⑥⑦
29.关于质粒和染色体的叙述，正确的是（）
A.两者有相同的化学本质
B.两者是同一物质的不同形态
C.质粒不存在于真核细胞中，染色体普遍存在于真核细胞中
D.两者的化学成分中均含有脱氧核糖
30.下列有关质粒的叙述，正确的是（）
A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器
B.质粒是细菌细胞中能自主复制的小型环状DNA分子
C.质粒只有在侵入宿主细胞后才能复制
D.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的
31.下列关于限制酶的说法，正确的是（）
A.限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布
B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
32.下列有关基因工程的叙述，不正确的是（）
A.基因工程又叫做重组DNA技术
B.对生物的基因进行改造或重新组合，定向改造生物的遗传性状
C.在医药卫生、农牧业和环境保护等方面有广泛的应用
D.可对任何物种进行改造，控制生物的进化
三、填空类（共0分）
1.基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外_________和_________等技术，赋予生物以新的_________，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
由于基因工程是在_________水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。
2.根据下面实验原理和材料用具，设计实验选择运载体——质粒，探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌素类别。
实验原理：
作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。
故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可能用作运载体。
材料用具：
青霉素、四环素的10万个单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。
方法步骤：
第一步：
取三个含细菌培养基的培养皿并标号1、2、3，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注入1毫升蒸馏水、青霉素液和四环素液，并使之分布在整个培养基表面。
第二步：
将接种环在酒精灯火焰上方灼烧灭菌，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。
第三步：
将接种后的三个培养皿放入37℃的恒温箱中培养24小时。
预期结果分析：
（1）设置1号的目的是_________，出现的现象是_________。
（2）如果1、2、3号培养皿的细菌都正常生长，说明_________；
如果1、2号培养皿的细菌能正常生长，3号培养皿的细菌不能正常生长，则说明_________；
如果1、3号培养皿的细菌能正常生长，2号培养皿的细菌不能正常生长，则说明_________；
如果只有1号培养皿的细菌能正常生长，2、3号培养皿的细菌都不能正常生长，则说明_________。
参考答案:
1.本题答案如下
1）
（1）G和A之间
（2）2（3）黏性（4）碱基序列互补配对
2）只能识别某种特定的核苷酸序列
3）限制酶不能识别切割位点
2.本题答案如下
1）
（1）A、T、C、G
（2）反转录
2）
（1）限制性内切酶
（2）DNA连接酶（3）
3.本题答案如下
1）自然选择
2）基因工程（DNA重组）
3）
（1）限制酶
（2）DNA连接酶（3）运载体
4）抗虫基因转录mRNA翻译毒蛋白
4.本题答案如下
1）乙烯
2）
（1）限制性核酸内切酶
（2）DNA连接酶（3）分子运输车
3）
（1）目的性强
（2）培育周期短（3）克服了远缘杂交不亲和的障碍
5.本题答案如下
1）
（1）DNA
（2）NA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体
2）
（1）工具酶
（2）目的基因
3）
（1）DNA分子体外的重新构建
（2）重组DNA表达实验的成功
6.本题答案如下
1）
（1）自我复制
（2）酶切位点（3）标记基因
2）
（1）细菌染色体
（2）自我复制（3）限制酶切割位点（4）标记基因
7.本题答案如下
1）磷酸二酯键
2）黏性末端平末端
8.本题答案如下
1）原核生物
2）
（1）特定核苷酸
（2）磷酸二酯键
3）
（1）黏性末端
（2）平末端（3）两侧（4）中轴线
9.本题答案如下
1）
2）
3）可以连接。
因为由两种限制性内切酶切割后所形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）。
10.本题答案如下
1）
（1）基因的载体
（2）DNA
2）
（1）限制性内切酶
（2）DNA连接酶
3）
（1）转录
（2）翻译
11.本题答案如下
1）
（1）乙烯
（2）加成（3）氧化（4）聚合
2）
（1）限制酶
（2）DNA连接酶（3）运载体
3）
（1）目的性强
（2）育种周期短（3）克服远缘杂交的障碍
1.C
2.B
3.C
4.C
5.C
6.D
7.B
8.D
9.A
10.C
11.B
12.C
13.C
14.D
15.C
16.A
17.C
18.C
19.B
20.C
21.B
22.D
23.D
24.D
25.D
26.D
27.D
28.D
29.D
30.B
31.B
32.D
1.
（1）DNA重组
（2）转基因（3）遗传特性（4）DNA分子
2.
（1）
（1）对照
（2）细菌能正常生长（3）
（2）此细菌的质粒上既有抗青霉素基因也有抗四环素基因（4）此细菌的质粒上有抗青霉素基因但无抗四环素基因（5）此细菌的质粒上有抗四环素基因但无抗青霉素基因（6）此细菌的质粒上既无抗青霉素基因也无抗四环素基因
解析:
1.无解析
1）无解析
2）无解析
3）无解析
2.无解析
3.无解析
4）无解析
4.无解析
5.无解析
6.无解析
7.无解析
8.无解析
9.无解析
10.无解析
11.无解析
1.由题图不难看出该限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间。
切出的两个完全相同的黏性末端是AATT和AATT，两个黏性末端的关系是碱基互补配对。
2.由同一种限制酶切割，就会形成两个黏性末端，这两个黏性末端能够发生碱基互补配对，这也是限制酶的一个特点。
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