完整word版HPLC校验方案.docx
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完整word版HPLC校验方案
西安益尔渭之阳制药有限公司
高效液相色谱仪校验报告
（Xi'nYierWeizhiyangPharmaceuticalCO.丄TDHPLCCalibrationProtocol）
报口准备：
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Preparedby:
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报告复核：
时间:
Reviewedby:
Date:
报告许可：
时间:
Approvedby:
Date:
二零零五年三月
高效液相色谱仪校验报告
DetailHPLCCalibrationprotocol
1.适用范围
该方案仅针对于本公司新购，使用中以及大修后的具有紫外-可见波长检测器的高效液相色谱仪（HPLC）的检定。
2.检定结果处理和检定周期
按此要求检定合格的仪器为合格仪器，反之，为不合格。
仪器的检定周期为1年。
3.校验依据
中华人民共和国国家计量检定规程JJG705-2002《液相色谱仪》
4.液相色谱检定的主要技术指标
检定项目
标准
外观
参见校验报告
泵
流量设定误差
<5%
流量稳定性误差
<3%
梯度准确度误差
<3%
柱温箱
温度设定误差
<2C
控温稳定性误差
1C
检测器
基线漂移（AU/h）
5X10-3
基线噪声（AU）
5X10-4
最小检测浓度（g/ml）
1X10-7
波长示值误差
2nm
波长示值重复性
2nm
线性范围
羽03
定性、定量重复性
定性测量重复性误差
1.5%
定量测量重复性误差
2.0%
手动进样器
相对准确度
2.0%
5.校验内容
5-1检定环境
要求
结果
温度
15C~30C
相对湿度
20%~85%
5-2受检仪器组成
液相色谱
型号
制造商
手动进样器
型号
序列号
泵
型号
序列号
柱温箱
型号
序列号
检测器
型号
序列号
5-3检定设备
仪器
有效期
备注
秒表
设备编号：
确认机构：
证书编号：
分析天平
电子天平设备编号：
确认机构：
证书编号：
数字温度计
设备编号：
确认机构：
证书编号：
5-4标准物质
名称
编号
有效期
萘-甲醇溶液
紫外分光光度计溶液标准物质
5校验要求及结果
5-5-1外观的检定
仪器型号
日期
检定员
复核员
检杳项目
检查结果
仪器上是否有清晰的名称
仪器上是否有清晰的型号
仪器的旋钮，按键，开关是否正常
仪器输液的接头是否紧密，牢固
仪器在规定的压力范围有无泄漏
结论
5-5-2输液系统的检定
5-5-2-1泵流量设定值误差和流量稳定性误差的检定
以100%甲醇为流动相，流量为1ml/min该流速，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗校验过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地记录规定体积的相应收集时间。
计算泵流量设定值误差Ss和流量稳定性误差的检定Sr。
结果按下式计算：
Ss=（Fm-Fs）/FsX100%
Sr=（Fmax-Fmin）/F平均X100%
Fm=V/t
式中：
Ss――流量设定值误差（%）
Fs流量设定值（ml/min）
V――收集流动相的体积（ml）
t收集流动相的时间（min）
Sr——流量稳定性误差（%）
Fmax同一组测量中流量最大值（ml/min）
Fmin同一组测量中流量最小值（ml/min
F平均同一组测量值的算术平均值（ml/min）
泵流量设定值误差和流量稳定性误差测量要求及标准
流量设疋值（ml/min）
0.5
1.0
3.0
测量次数
3
3
3
收集流动相时间（min）
8
6
4
允许误差
Ss
5%
3%
2%
Sr
3%
2%
2%
泵流量设定值误差及流量稳定性误差的检定记录
仪器型号
日期
检定员
复核员
泵流量设定值误差及流量稳定性误差接受标准：
泵流量设定值的误差Ss:
<（2%5%）
流量稳定性误差Sr：
<（2%3%）
流动相
甲醇
流动相密度
0.791g/cm3
Fs
Fs=0.5ml/min
Fs=1.0ml/min
F3=3.0ml/min
t
W容量瓶
W容量瓶+W流动相
V（ml）
Fm
Fmean
Ss
Sr
结论
5-5-2-2梯度准确度的检定
设置溶剂梯度程序。
A溶液为水，B溶液为含0.1%丙酮的水溶液。
A从100%变为0。
先以A溶液走基线，（流动相不通过色谱柱），基线平稳后执行梯度程序，画出梯度变化曲线，并读出在每个测量点的信号值。
重复测量两次，求平均值。
从B溶液的含量及相对应的信号值Lmi和Lm计算梯度准确度Gci。
Gci最大值为仪器梯度准确度误差。
计算公式如下：
Gci=（Lmi-_m）/LmX100%
式中：
GCi=第i段梯度准确度；Lmi=第i段输出信号或记录仪的读数；
Lm=各段输出信号或记录仪读数总均值•
梯度准确度的检定记录
仪器型号
日期
检定员
复核员
梯度准确度误差接受标准：
梯度准确度误差Gci:
<3%
流动相A
水|流动相B0.1%丙酮水溶液F=3.0ml/min
B溶液的变化范围
0%
20%
40%
60%
80%
100%
Time
记录仪读数
1
r2
Lm
Lm（maen）
Gci（%）
结论
5-5-3柱温箱温度控制系统的检定
5-5-3-1柱温箱温度设定值误差Ts与控温稳定性误差Tc
选择最低使用温度（20C）和最高使用温度（60C）进行检定，待指示温度稳定后，每隔10分钟记录一次，共计7次，求出算术平均值。
设定值与平均值之差为Ts,
7次测量值中最大值与最小值之差为控温稳定性误差Tc。
柱温箱温度控制系统的检定记录
仪器型号
日期
检定员
复核员
柱温箱温度控制系统的接受标准：
柱温箱温度设定值误差T:
<2C控温稳定性误差Tc:
1C
Ts1（C）
20
Tm1
No
1
2
3
4
5
6
7
平均
读数
T2
Tc1
TS2
[C）
60
Tm2
No
1
2
3
4
5
6
7
平均
读数
T2
TC2
结论
5-5-4检测器
5-5-4-1基线漂移和基线噪声检定
使用如下色谱条件：
色谱柱：
Ci8,检测波长为254nm，流动相为100%
甲醇，流速为1.0ml/min。
待基线稳定后，记录基线30分钟，计算基
线漂移和噪声
基线噪声及基线漂移检定记录
仪器型号
日期
检定员
复核员
基线噪声及基线漂移接受标准：
基线噪声：
5X10-4（AU）
基线漂移：
5X10-3（AU/h）
色谱柱
流动相
流速
检测波长
基线噪声（AU）
基线漂移测定值
结论
5-5-4-2最小检测浓度
在测定仪器的基线噪声的条件下，注射20ul浓度为1X10-7g/ml的萘-甲醇溶液，记录样品峰高。
在其样品峰高大于或等于两倍基线噪声峰高时，计算最小检测浓度公式如下：
Cl=2•Hn•C/H
式中：
Cl最小检测浓度（g/ml）
Hn——噪声峰高（记录仪格数或实测高度mm）C——样品浓度（g/ml
H——样品峰高（记录仪格数或实测高度mm）
最小检定浓度检定记录
仪器型号
日期
检定员
复核员
最小检测浓度接受标准：
最小检测浓度：
4X10-8g/ml（萘的甲醇溶液）
样品浓度
噪声值
峰高
最小检测浓度
结论
5-5-4-3波长示值误差
用水将流动池冲洗干净，置零。
用0.0005mol/l硫酸溶液冲洗流动池，并将其注满。
设定流速为0.5ml/min,检测器波长为200nm。
测定其从200nm到400nm条件下的紫外吸收值。
（在规定的标准波长（235nm,
257nm,313nm,350nm）周围正负5nm范围内每1nm测试1次，测试范围应含括200nm,及400nm两点）记录相应的紫外吸收值或峰高。
用0.006%重铬酸钾标准溶液清洗流动池，并将其注满。
设定检测器波长为200nm,进样20ul/min。
测定其从200nm到400nm条件下的紫外吸收值。
记录相应的紫外吸收值或峰高。
重复3次。
扣除空白后的极点吸收值对应的波长与标准波长间的差为波长示值误差。
3次测量中
最大值与最小值之差为波长重复性误差
波长示值误差及波长重复性误差的检定记录
仪器型号
日期
检定员
复核员
波长误差接受标准：
示值误差：
2nm
重复性误差：
1nm
标准波长
235nm
257nm
313nm
350nm
测定值
1
2
3「
平均值
示值误差
重复性误差「
结论
5-5-4-4线性范围的鉴定
将仪器连接好，检测波长选在254nm,待仪器稳定后,用注射器直接向检测池中注射2%异丙醇/水溶液冲洗检测池.之后,依照上法,分别注入丙酮/2%异丙醇系列水溶液（丙酮含量为0.1%,0.2%,0.3%,……,1.0%）冲洗检测池，并记录各溶液对应的稳定读数，每个溶液重复测定3次，取算术平均值.以5个丙酮含量（0.1%--0.5%供5个点）和对应的读数做标准曲线，在曲线上找出丙酮含量大于0.5%各点的读数,与对应含量的测量值做比较，测量值低于读数5%时认为曲线弯曲,此点的浓度作为检测上限Ch.按下式算出Cl,由Ch/Cl算出检测器的线性范围.
CL=2NdcX20/HV
其中：
Cl-一-最小检测浓度,g/ml
Nd基线噪声峰一峰高，mm
C------标准溶液的浓度,g/ml
H——标准溶液的色谱峰高,mm
V——进样体积,ul
仪器型号
日期
复核员
检定员线性范围接受标准：
>103
线性范围
丙酮%
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1.0
读数
升级会员 