激光共聚焦显微镜FV中文说明书完整版文档格式.docx
《激光共聚焦显微镜FV中文说明书完整版文档格式.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《激光共聚焦显微镜FV中文说明书完整版文档格式.docx（35页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
打开FV10-ASW应用软件.
Administrator
*系统软件的启动需要等待一定时间.
显微镜镜下观察
微分干涉差观察
1.使用手控面板选择物镜.
（参照Memo.）
2.插入起偏镜.
3.插入微分干涉滑块.
4.点击FV10-ASW软件中的图标.
Note1:
使用TD滑块控制卤素灯的光强；
Note2:
检查滤色片转盘的位置是否为“”，如果不是，用手柄按下DICT图标
5.标本聚焦
荧光观察
1.使用手控面板选择物镜.
2.点击FV10-ASW软件中的图标.
3.使用手控面板选择荧光滤色片.（参照Memo.）
4.标本聚焦.
扫描模式扫描速
获取单张图像（XY平面）（荧光图像）
例：
绿色荧光染色（FITC）
1.点击FV10-ASW软件中的按钮
关闭汞灯快门.
同时,点击按钮
关闭卤素灯快门.
2.点击染料选择按钮.在染料列表中,双击用于观察的荧光染料.
*取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双击已指定的荧光染料，并重复步骤2.
3.点击Apply按钮.
（关闭染料选择面板可以用Close按钮.）
7.选择AutoHV,并选择扫描速度.
*随着扫描速度变慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就会消除.
（也可以使用Kalmanaccumulation方式.
更多的信息，参照附录2.）
8.点击XY按钮取得一幅图像.
9.点击SeriesDone按钮,“2DView-
LiveImage（x）”2D界面就出现.
10.保存该幅图像:
右击图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像.
（保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.）
1.
点击FV10-ASW软件中的按钮
关闭汞灯快门.
同时,点击按钮
（保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.）
绿色荧光（Alexa488）＋红色荧光（Alexa546）二重染色序列扫描（这里介绍线序列扫描.）
1.点击FV10-ASW软件中的按钮
8.选择AutoHV,并选择扫描速度.
9.点击XY按钮取得一幅图像.
10点击SeriesDone按钮,“2DView-
11.保存该幅图像:
（XY平面-单标+微分干涉差）
4.选择TD1.
（XY平面-单标+微分干涉差）
8.选择AutoHV,并选择扫描速度.
10.点击SeriesDone按钮,“2DView-
（XYZ扫描-双标）
1.采用13和14页步骤1到7.
确定Z轴的上限和下限如下.
2.输入StepSize大小（点击OP按钮可以使用推荐的值）,并选择
.
3.点击XYRepeat按钮开始扫描.
4.点击按钮上移焦点位置.
5.当图像显示到达上限时,点击Set按钮确定.
6.点击按钮下移焦点位置.
7.当图像显示到达下限时,点击Set按钮确定.
8.点击Stop按钮停止扫描.
（XYZ扫描-双标）
9.选择AutoHV,并选择扫描速度.
10.选择Depth按钮.
11.点击XYZ按钮取得图像.
12.点击SeriesDone按钮,“2DView-
13.保存该幅图像:
*可以通过调用扫描状态来实现该设置.更多的信息,参照附录5.
4.点击按钮
出现光谱设置窗口.
5.设置CHS1光谱带宽为10nm,以此为例.
（参照附录4关于改变光谱带宽的方法.）
6.点击XYRepeat按钮开始扫描.
7.在观察图像的同时,移动光谱带到图像
最亮的位置状态.
注:
移动光谱带位置要保持光谱带宽为10nm不变.
8.调节图像.
（参照附录1.）
9.点击Stop按钮停止扫描.
10选择AutoHV,并选择扫描速度.
（也可以使用Kalmanaccumulation方式.更多的信息，参照附录2.）
11设定要扫描的波长范围,光谱带宽和步距.
Start=开始波长
End=结束波长
Resolution=光谱带宽
StepSize=步距
12选择Lambda按钮.
13点击XYL按钮取得图像.
14点击SeriesDone按钮,“2DViewLiveImage（x）”2D界面就出现.
15.保存该幅图像:
右击图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像..
（保存为“oib”和"
oif"
类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.）
1.双击资源管理器中要选择打开的文件.
1.点击按钮
并选择
2.要保存此图像,右击此图像,选择Save
Display并命名.
（比例尺的使用）
1.点击按钮
2.点击图像的同时,拖放此比例尺到一个特定的位置.
3.点击手柄的左端或右端,移动鼠标.改变比例尺的大小
4.选择比例尺并右击选择属性的设置.
5.设置具体的比例尺属性.
改变文本,颜色,字体等.
（3D图像的重建）
以一定的角度观察3D图像
2.创建3D图像.
3.拖动鼠标以一定的角度观察图像.
→要保存此图像,进行下一页第6步的操作.
观察3D图像的某个横截面
4.点击按钮
并选定
5.拖动鼠标观察某个垂直横断面.→要保存此图像,进行下一页第6步的操作.
（3D图像的重建
保存上一页中第3、5选项的图像
6.点击按钮
7.会创建一个2D图像（带文件名）.
8.保存该幅图像:
（保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图
动画的播放
4.点击并控制按钮实现图像围绕着X-轴旋转.
再次点击停止旋转.
点击并控制按钮实现图像围绕着Y-轴旋转.
点击并控制按钮
实现图像围绕着Z-轴旋转.
例:
绿色荧光（AlexaFluor488）和绿色荧光（YOYO-1）双标
打开一幅AlexaFluor488单标取样的XYL图像.
2.为AlexaFluor488选定一个封闭的区域.
3.从Processing下拉菜单中选择
SpectralDeconvolution图标.
4.双击ROI1区域.
5.点击SaveProfile图标.
6.输入保存的名字并且点击OK按钮将
AlexaFluor488的光谱记载到数据库中.
7.对于YOYO1单标,重复1-6步.
8.打开一幅AlexaFluor488和YOYO1双标的XYL图像.
9.从Processing下拉菜单中选择
10.双击数据库中记载的AlexaFluor488和YOYO1图标.
11.检查处理类型设置为“Normal”并且点击Execute按钮.
12获得图像.
XY或者XYZ图像的每个通道存为
TIFF格式的文件
XY或者XYZ通道合并的图像存为
带有比例尺的图像存为BMP格式的文件
动态图像存为AVI格式的文件
1.右击图像管理器中显示的图像图标,选择另存为保存该幅图像..
2.设置Saveas类型为TIFF并保存.
*存为BMP和JPEG格式也可以.
3.检查要合并的通道并保存.
**********************************************************************************
1.右击该幅图像.2.选择SaveDisplay并以新的文件名保存该幅图像.
1.右击该图像.
2.选择SaveasAVI并以新的文件名保存该图像.
保存到CD-R
1.插入一张CD-R光盘.
2.点击OK.
3.选择文件并拖放到CD-R的窗口.
4.点击"
WritethesefilestoCD."
5.点击Next.
6.开始刻录.
7.点击Finish按钮结束.
关闭系统
1.选择File/Exit,退出FV10-ASW软件.
2.退出WindowsXP.
（1）选择Start/ShutDown.
（2）在ShutDown窗口中,选择ShutDown并点击OK按钮.
3.关闭激光器.
（关闭钥匙开关.）
3-1.多线氩离子（458nm,488nm,
514nm）OFF
3-2.氦氖绿（543nm）OFF
3-3.氦氖红（633nm）OFF
4.关闭汞灯电源.
附录1共聚焦的原理和调节原理
附录2
获取图像如何降低背景噪音
升级会员 