浙江省高考大纲中的生物实验Word文档下载推荐.docx
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用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:
浅蓝色→棕色→砖红色沉淀
淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。
2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)对组织切片染色效果是有好处的。
脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色),胆脂素呈淡红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)
三、实验材料:
1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。
(因为组织的颜色较浅,易于观察。
)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
2、做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
4、淀粉的鉴定:
马铃薯匀浆。
四、实验用具:
双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜
五、实验试剂:
1.斐林试剂(包括甲液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:
质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)
2.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
3.双缩脲试剂(包括A液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:
质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)
4.体积分数为50%的酒精溶液
5.碘液
6.蒸馏水
六、方法步骤:
一、可溶性糖的鉴定
操作方法
注意问题
解释
1.制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨组织液必须临时制备。
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无CuOH生成。
4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:
浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间。
二、脂肪的鉴定
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片;
浸泡时间过长,组织较软,切片不易成形。
切片要尽可能薄些,便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。
染色时间不宜过长。
用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。
同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
三、蛋白质的鉴定
制备组织样液。
(浸泡、去皮研磨、过滤。
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。
加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;
再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制,储存。
鉴定时先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
附:
淀粉的检测和观察
用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察
七、考点提示:
1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些?
答:
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;
淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
2、还原性糖植物组织取材条件?
含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:
苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
3、研磨中为何要加石英砂?
不加石英砂对实验有何影响?
加石英砂是为了使研磨更充分。
不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。
4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法?
混合的目的?
为何要现混现用?
混合后使用;
产生氢氧化铜;
氢氧化铜不稳定。
5、还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为?
浅蓝色棕色砖红色。
6、花生种子切片为何要薄?
只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。
7、转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?
切片的厚薄不均匀。
8、脂肪鉴定中乙醇作用?
洗去浮色。
9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?
先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化?
不能混合;
先加A液的目的是使溶液呈碱性;
先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三、用显微镜观察多种多样的细胞
一.实验目的:
1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点
2)运用制作临时装片的方法
二.实验原理:
利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:
可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。
三.方法步骤:
第一步:
转动反光镜使视野明亮
第二步:
在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央
第三步:
用转换器转过高倍物镜
问
(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?
为什么?
提示:
低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;
高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。
问
(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?
如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。
因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。
问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?
不行。
用高倍镜观察,只需微调即可。
转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。
第四步:
观察并用细胞准焦螺旋调焦。
四:
讨论:
1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?
答:
(1)首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。
(2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。
2.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点,并描述它们之间的差异,分析产生差异的可能的原因:
这些细胞在结构上的共同点是:
有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。
各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:
这些细胞的位置和功能不同,其结构与功能相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。
3.大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别?
从模式图中可以看出,大肠杆菌没有明显的细胞核,没有核膜,细胞外有鞭毛,等等。
实验四:
通过模拟实验探究膜的透性
1.说明生物膜具有选择透过性2.尝试模拟实验的方法
某些半透膜(如动物的膀胱膜、肠衣等),可以让某些物质透过,而另一些物质不能透过。
或者(玻璃纸)水分子可以透过,而蔗糖分子因为比较大,不能透过。
可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开,然后通过观察溶液液面高低的变化,来观察半透膜的选择透过特性,进而类比分析得出生物膜的透性。
1.取一个长颈漏斗,在漏斗口处封上一层玻璃纸。
2.在漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少许红墨水,使其略呈红色。
3.将漏斗浸入盛有蒸馏水的烧杯中,在漏斗的液面处做标记
4.静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化,并将观察到的结果设计表格进行记录。
四.讨论:
1.漏斗管内的液面为什么会升高?
由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量,使得管内液面升高。
2.如果用一层纱布代替玻璃纸,漏斗管内的液面还会升高吗?
用纱布替代玻璃纸时,因纱布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不会升高。
3.如果烧杯中不是清水,而是同样浓度的蔗糖溶液,结果会怎样?
半透膜两侧溶液的浓度相等时,单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出的水分子数量,液面也不会升高。
实验五:
用高倍显微镜观察叶绿体
一、实验原理:
叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。
二、实验材料:
新鲜的藓类的叶
三、实验用具:
显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子
四、方法步骤:
低倍镜下找到叶片细胞→低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察。
五、考点提示:
1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因:
藓类属于低等植物,叶片是绿色的单层细胞,不需加工即可进行观察。
2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因:
保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中,否则,细胞失水收缩,将影响细胞器形态的观察。
实验六观察质壁分离和复原
1、条件:
细胞内外溶液浓度差,活细胞,大液泡
2、材料:
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3、步骤:
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4、结论:
细胞外溶液浓度>细胞内溶液浓度,细胞失水质壁分离
细胞外溶液浓度<细胞内溶液浓度,细胞吸水质壁分离复原
知识概要:
制片观察加液观察加水观察
考点提示:
(1)洋葱为何要选紫色的?
若紫色过淡怎么办?
紫色的洋葱有紫色的大液泡,便于观察液泡的大小变化;
缩小光圈,使视野变暗些。
(2)洋葱表皮应撕还是削?
为何?
表皮应撕不能削,因为削的表皮往往太厚。
(3)植物细胞为何会出现质壁分离?
动物细胞会吗?
当细胞失去水分时,其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性;
动物细胞不会发生质壁分离,因为动物细胞没有细胞壁。
(4)质壁分离时,液泡大小和颜色的变化?
复原时呢?
细胞发生质壁分离时,液泡变小,紫色加深;
当细胞质壁分离复原时,液泡变大,紫色变浅。
(5)若发生质壁分离后的细胞,不能发生质壁分离复原,其原因是什么?
细胞已经死亡(可能是外界溶液浓度过大,细胞失水过多或质壁分离时间过长)
(6)高倍镜使用前,装片如何移动?
若要把视野中上方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向上移动。
若要把视野中左方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向左方移动,因为显微镜视野中看到的是倒像。
(7)换高倍物镜后,怎样使物像清晰?
视野明暗度会怎样变化?
如何调亮?
换高倍物镜后,应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;
视野会变暗,可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。
(8)所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系?
目镜越长,放大倍数越小;
物镜越长,放大倍数越大。
(9)物像清晰后,物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系?
物镜与载玻片之间的距离越小,放大倍数越大。
(10)总放大倍数的计算方法?
放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数?
总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;
放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。
(11)放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系?
放大倍数越大,视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。
(12)更换目镜,若异物消失,则异物在目镜上;
更换物镜,若异物消失,则异物在物镜上;
移动载玻片,若异物移动,则异物在载玻片上。
(13)怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度?
①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。
某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。
实验七探究酶的专一性
一、教学目标
比较唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用。
二、实验原理
含有自由醛基或酮基的单糖和双糖叫还原性糖。
在碱性溶液中,还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原,糖本身被氧化成酸性化合物。
此性质常用于检验糖的还原性,并且常称为测定还原糖含量的各种方法的依据。
还原糖与碱性硫酸铜可生成砖红色沉淀物。
本尼迪特试剂内含有硫酸铜,因此淀粉水解生成的麦芽糖和蔗糖水解生成的葡萄糖、果糖等还原糖在煮沸的条件下,与本尼迪特试剂会有砖红色沉淀物产生,淀粉和蔗糖(非还原糖)无此反应。
本尼迪特试剂可以用来鉴定淀粉和蔗糖溶液中是否有麦芽糖、葡萄糖及果糖,进而推测淀粉和蔗糖是否被水解。
三、实验材料与用具
(一)实验材料
稀释200倍的新鲜唾液,质量分数为2%的蔗糖溶液,溶于质量分数为0.3%氯化钠溶液中的淀粉溶液(其中淀粉含量为1%),蔗糖酶溶液,本尼迪特试剂
(二)实验用具
试管,试管架
四、实验步骤
1.取2个试管,分别编为1号、2号。
2.向1号试管中加入本尼迪特试剂2mL,再加入1%的淀粉溶液3mL;
2号试管中加入本尼迪特试剂2mL,再加入2%蔗糖溶液3mL。
3.将两个试管内的溶液充分混匀后,放在沸水浴中煮2~3min。
观察并记录实验结果(淀粉、蔗糖不产生砖红色沉淀)。
4.再取4支试管,分别编为3号、4号、5号、6号。
5.3号、4号试管中各加入稀释200倍的新鲜唾液1mL;
然后在3号试管中加入质量分数为1%的淀粉溶液3mL,在4号试管中加入质量分数为2%的蔗糖溶液3mL。
充分混匀后,放在37℃恒温水浴中保温,15min后取出。
两管各加本尼迪特试剂2mL,摇匀,放在沸水浴中煮2~3min。
观察并记录实验结果。
6.5号、6号试管各加入蔗糖酶溶液1mL,然后在5号试管中加入质量分数为1%的淀粉溶液3mL,在6号试管中加入质量分数为2%的蔗糖溶液3mL。
7.观察并记录实验结果。
【注意】
新鲜唾液的稀释倍数一般为200倍。
但是,由于不同人或者同一人不同时间采集的唾液内淀粉酶的活性并不相同,有时差别很大,稀释倍数可以是50~300倍,甚至超出此范围。
因此,应事先确定稀释倍数。
另外,取唾液时一定用清水漱口,以免食物残渣进入唾液中。
要注意除去唾液里的气泡,避免稀释倍数不准确而影响实验结果,稀释好的新鲜唾液用滤纸过滤后待用。
稀释200倍的新鲜唾液可用1%的淀粉酶代替。
我们的实验结果就按照表格形式记录。
实验结果
试管
1
2
3
4
5
6
本尼迪特试剂
2mL
1%淀粉溶液
3mL
2%蔗糖溶液
新鲜唾液
1mL
蔗糖酶溶液
不产生砖红色沉淀
产生砖红色沉淀
1.你能解释步骤1~3在本实验中的作用吗?
步骤1~3是作为整个实验的对照,可检验淀粉、蔗糖与本尼迪特试剂能够发生特异性颜色反应,检验淀粉和蔗糖的纯度。
2.为什么3号、4号、5号、6号试管要在37℃恒温水浴中保温?
因为唾液淀粉酶的最适温度是37℃。
实验八探究pH值对猪肝组织中过氧化氢酶的影响
一、实验目的
对不同pH值条件下过氧化氢酶的活性进行定量分析,并尝试寻找出过氧化氢酶的最适pH值。
过氧化氢分解生成水和氧气,而过氧化氢酶则可催化过氧化氢的分解。
在不同pH值条件下,过氧化氢酶对反应的催化效率是不同的;
通过单位时间内产生的氧气量或产生相同体积的氧气所需要时间来定量分析过氧化氢酶活性的强弱。
在本实验中,通过测量单位时间内产生的氧气量来对过氧化氢酶的活性强弱进行定量分析。
三、材料与器具
1、实验材料
新鲜的质量分数为0.5%的肝脏(猪肝)研磨液、体积分数为3%的过氧化氢溶液、pH值分别为5、6、7、8的缓冲液。
2、实验器具
量筒、小烧杯、大烧杯、pH计、水槽、注射器、锥形瓶、秒表。
五、方法步骤
1、在如图1所示的水槽中加水至满为止。
2、用量筒量取5mlpH值为5的缓冲液,倒入锥形瓶中。
3、用量筒向锥形瓶中加入新鲜的质量分数为0.5%的猪肝研磨液,摇匀,并与排水法收集气体的装置相连接。
4、将100mL量筒横放在水槽中并使之灌满水;
将量筒倒立,量筒口在水下,导气管伸入量筒口内,注意不要让量筒内产生气泡。
5、用注射器向锥形瓶内注入5ml体积分数为3%的过氧化氢溶液,同时开始计时,1min时,读取量筒中氧气的体积并记录。
6、取干净的锥形瓶,以相同的方法,分别得到在pH=6、pH=7、pH=8的环境中测定单位时间(1min)内过氧化氢分解所释放的气体量,注意只是溶液的酸碱度(pH)不同,其他条件及操作均相同。
7、重复5次实验,记录各pH值环境中所测得的实验数据并取平均值进行分析。
图1实验装置示意图
实验操作流程表
步骤
加入试剂或处理方法
加5ml缓冲液
加2ml过氧化氢酶
连接排水法收集气体的装置
用注射器注入5ml的过氧化氢
观察现象,并记录结果
重复实验,数据分析
六、实验结果与结论
1.实验结果
经六次重复实验,测定在不同pH值缓冲体系中,过氧化氢酶催化分解双氧水产生氧气的体积,结果如表2所示。
表2.在不同pH缓冲体系中过氧化氢酶分解双氧水释放的氧气量
重复次数
不同pH值的缓冲体系收集氧气的体积
pH=5
pH=6
pH=7
pH=8
26.0ml
28.2ml
33.1ml
32.1ml
25.6ml
28.7ml
32.4ml
31.6ml
25.8ml
29.2ml
32.3ml
31.4ml
25.3ml
28.6ml
31.9ml
31.2ml
28.9ml
32.0ml
平均值
31.5ml
2.结论:
在不同pH值条件下,过氧化氢酶的活性存在差别;
在pH=7时,收集到的氧气量最多,说明过氧化氢酶的最适pH值接近7。
七、讨论本实验中的注意事项
1)、在加酶前一定要摇匀,以保证所加酶的浓度相同。
2)、在用注射器注入过氧化氢时一定要将针头插进胶塞内,以防气体逸出。
3)、在推注射器活塞时,各组实验中所用的时间要相同。
4)、本实验中的无关变量较多,因此要多次重复实验,并对多次实验所获得的数据求平均值。
实验九:
叶绿体中色素的提取和分离
1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、探索叶绿体中有几种色素。
1、叶绿体中的色素能溶解在丙酮(有机溶剂,酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取叶绿体中色素。
2、色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可用层析液将不同的色素分离。
新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶),无水乙醇,层析液(由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。
93号汽油也可代用),二氧化硅和碳酸钙。
干燥的定性滤纸,试管,棉塞,试管