P2实验室Word格式.docx

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*上诉指标是建立BLS-2实验室的最低要求，建设者可根据实际需要适当提高相应指标，如洁净度、压差等。

二．建筑、结构和装修要求

现在BLS-2实验室大多数是在原有建筑物内进行改建，不同于新建的BLS-2实验室（国标中，要求新建BLS-2实验室宜离开公共场所一段距离），在与相邻其他房间之间，存在着一个相对隔离问题。

所以在原有建筑物中改建BLS-2实验室，应重点注意以下几个问题。

1、在共用建筑物中建BLS-2实验室，应设可自动关闭的带锁的门，必要时，可设立缓冲区域，如缓冲间等。

2、如果没有机械通风系统，应有窗户进行自然通风，并应有防虫纱窗。

（一般情况下，应有机械通风系统，否则，温湿度指标难以保证）。

3、应有防昆虫、鼠等动物进入和外逃的措施。

三．空调、通风和净化

为满足BLS-2实验室温湿度要求，宜配备机械空调通风系统，有特殊要求的可增设设计要求，如增设净化要求并按净化要求进行送回（排）风系统设计等。

这方面，应重点处理好以下几个问题：

1、可以采用带循环风的空调系统。

如果涉及化学溶媒，感染性材料操作和动物实验，则应采用全排风系统。

2、生物安全柜与排风系统连接

I级排风比例100%，密闭连接。

II级A型排风比例30%，可排到房间或设置局部排风罩。

B1型排风比例70%，密闭连接。

B2型排风比例100%，密闭连接。

3、实验室内各种设备的位置应有利于气流由“清洁”空间向“污染”空间流动，最大限度减少室内回流与漏流（生物安全柜一般应置于室内气流最下游，即最远离送风口处）。

*生物安全柜的排风不能代替室内排风。

四．排水

含菌污水应经高温高压消毒或化学消毒后排放至市政污水排放公用系统。

五．电气设置

1、应设专用配电箱。

2、电源宜设置漏电检测报警装置。

3、应有可靠的接电系统，其接地电阻不宜大于1Ω。

4、实验室入口应有实验室工作状态的文字式灯光讯号显示。

5、应设紧急发光疏散指示标志。

六．消防建筑物耐火等级不低于二级。

七．应配备的工艺设备

1、生物安全柜

（1）产生微生物气溶胶或出现溅出的操作，可使用I级生物安全柜。

（2）处理感性材料，应使用II级生物安全柜；

（3）处理化学致癌剂、放射性物质和挥发性溶媒，应使用Ⅱ-B级生物安全柜。

2、高温高压灭菌消毒柜。

3、洗眼器，必要时应设置应急喷淋装置。

*超净工作台不属于生物安全柜，不能用于生物安全操作。

BLS-2实验室是用于初步的生物安全实验，国标明确了相应要求。

建立BLS-2实验室应根据国标、在保证安全的前提下确定建设目标，建立的实验室应该是安全的、经济的实验室。

P2级实验室一般规范　

一、隔离的设备

1）需设置生物安全操作装置（第一级或第二级），且要做定期检查。

2）为了处理重组体，而使用容易产生气雾的磨碎机、冷冻干燥器、超音波细胞打碎机及离心机等仪器时，需把这些仪器放置在安全操作装置中。

但若机器已经有防止气雾外泄的装置，则不在此限。

3）实验室需具备处理污染物及废弃物灭菌用之高压灭菌器。

二、实验实施要项

1）进行实验时，需关闭实验室的门窗。

2）每天实验结束之后一定要灭菌实验台及安全操作装置。

如实验中发生污染，需立即加以灭菌。

3）与实验有关之生物材料之废弃物，在丢弃前需做灭菌处理。

被污染的器具需先经高压灭菌后，再清洗使用或丢弃。

4）不得用口做吸量操作。

5）实验室内禁止饮食、吸烟及保存食物。

6）操作重组体时需戴手套以防污染，操作完毕后及离开实验室前需洗手。

7）在所有的操作中，应尽量避免产生气雾（例如，把烧热的接种用白金环及接种针插入培养基时，若发生大量气雾，就可能造成污染）。

亦应避免将吸管或针筒内之液体用力射出。

8）要从实验室搬离被污染物品时，必需将其放入坚固且不外漏的容器，并在实验室内密封之后，才可运出。

9）防除实验室的非实验用生物，如昆虫及鼠类等。

10）若有其它方法可用，应避免使用针头。

11）实验室内，要穿着实验衣，离开前要脱掉。

12）禁止对实验性质不了解的人进入实验室。

13）实验进行中，要在实验室之入口，标示「P2级实验室」，并挂上「P2级实验进行中」的标示。

而且保存重组体之冰箱及冷冻库也要做同样的标示。

14）实验室要经常清理，保持清洁，不得放置与实验无关的物品。

15）安全操作装置内的HEPA过滤器，在更换前、定期检查时及实验内容变更时，需密封安全操作装置，每立方公尺用10公克的甲醛熏蒸1小时，去除污染。

16）若在此级实验室内同时进行P1级的实验时，需明确划分实验区域，小心进行操作。

17）需遵守计划主持人所规定之其它事项。

动物设施——二级生物安全水平

二级生物安全水平的动物设施适用于专门接种了危险度2级微生物的动物，需要进行下列安

全防护：

1、必须符合一级生物安全水平动物设施的所有要求。

2、在门及其他适宜的地方张贴生物危害警告标志（见图1）。

3、设施的设计必须易于清洁和管理。

4、门必须向内开，并可以自动关闭。

5、要有适宜的温度、通风和照明。

6、如果采用机械通风，则气流的方向必须向内。

排出的空气要排到室外，不得在建筑物内

循环使用。

7、授权人员方可进入。

8、仅接纳实验用动物。

9、应制订节肢动物和啮齿类动物的控制方案。

10、如有窗户，必须是安全、抗击碎的。

如果窗户可以打开，则必须安装防节肢动物的纱网。

11、使用后，工作表面应用有效的消毒剂来清除污染（见第14章）。

12、可能产生气溶胶的工作必须使用生物安全柜（Ⅰ级或Ⅱ级）或隔离箱，隔离箱要带有专

用的供气和经HEPA过滤的排气装置。

13、动物设施的现场或附近备有高压灭菌器。

14、清理动物的垫料时必须尽量减少气溶胶和灰尘的产生。

15、所有废料和垫料在丢弃前必须先清除污染。

16、尽可能限制锐利器具的使用。

锐器应始终收集在带盖的防刺破容器中，并按感染性物质

处理。

17、进行高压灭菌、焚烧的物品应装在密闭容器中安全运输。

18、动物笼具在使用后必须清除污染。

19、动物尸体必须焚烧。

20、在设施内必须穿着防护服和其他装备，离去时脱下。

21、必须有洗手设施。

人员离开动物设施前必须洗手。

22、如发生伤害，无论程度轻重，必须进行适当的治疗，且要报告并记录。

23、禁止在设施内进食、饮水、吸烟和化妆。

24、所有人员必须接受适当的培训。

再加一些

美国疾病控制中心实验室生物安全级别标准

本标准概括了传染性微生物和实验动物工作中的四个生物安全级别所包括的主要要素。

根据给个人、环境、社会提供的保护情况，确定级别。

生物安全一级（BSL-1）

BSL-1适合于非常熟悉的病源，该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜

在危险小。

实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开。

一般按照标准的微生物操作

，在开放的实验台面上开展工作。

不要求、一般也不使用特殊的遏制设备和设施。

实验

人员在实验程序方面受过特殊训练，由受过微生物学或相关科学一般训练的科学工作者

监督实验。

以下标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL-1病源有关：

一、标准微生物操作：

1、在进行有关培养物及样品实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。

2、进行活体处理后，实验人员要洗手；

离开实验室前脱手套。

3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。

不允许在工作区存放食物和日常

生活用品。

在实验室中，戴隐型眼镜的人，也需戴口罩或面罩。

食物应存放在工作区域

以外专用橱柜或冰箱中。

4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。

5、制定锐器安全使用规范。

6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。

7、至少一天一次、活体溅出时，都应进行台面消毒。

8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消

毒，如高压灭菌。

转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实

验室，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。

9、当存在传染源时，应在实验室入口处贴生物危险标志，并显示以下信息：

实验中的病

源名称、研究者姓名及电话号码。

10、实施控制昆虫和龋齿动物的程序

二、特殊操作：

无

三、安全设备（第一道屏障）

1、和BSL-1相关的病源，其操作一般不需要生物安全柜之类的特殊遏制装置或设备。

2、建议穿实验服、大褂、制服，避免污染和衣服上的尘土。

3、若手上皮肤有伤或出皮疹，应戴手套。

4、操作过程中，估计会出现微生物或危险物溅出时，应戴保护眼具。

四、实验室设施（第二道屏障）

1、实验室应设置门以控制进入。

2、每个实验室有一个洗手池。

3、实验室设计要便于清洗，实验室内不适宜用地毯。

4、实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和耐用于工作台面及设施消毒的其

他化学物质。

5、实验室的实验台应能承受预期的重量并符合使用。

实验台、安全柜以及设备之间的空

间应便于打扫。

6、如果实验室有对着外面的窗子，应装防止苍蝇的窗纱。

生物安全二级（BSL-2）

BSL-2与BSL-1类似，适合于对人和环境有中度潜在危险的病源，与BSL-1的区别在于：

（1

）实验人员均接受过病源处理方面的特殊培训，并由有资格的科学工作者指导；

（2）进行

实验时，限制进入实验室；

（3）对于污染的锐器，要特别注意；

（4）某些可能产生传染性

气溶胶或飞溅物的过程。

应在生物安全柜中或其它物理遏制设备中进行。

以下的标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL-2病源有关：

1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。

离开实验空前脱手套。

食物应存放在工作区域以外专用

橱柜或冰箱中。

7、实验完毕、下班前、活体溅出或溢出时，都应使用对病源有效的消毒剂进行台面消毒

。

验室。

离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关地方、州、联

邦法规。

9、实施控制昆虫和龋齿动物的程序（参见附录G）（另发）

1、在开展有关传染病源工作时，实验室主任应禁止或限制人员进入实验室。

一般情况下

，易感人员或感染后会出现严重后果的人员，不允许进入实验室或动物房，例如，患有

免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的危险性增加。

实验室主任对每种情况的估计和决

定谁能进入实验室或动物房工作，负有最终责任。

2、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求（如，

经过免疫接种）的人，才能进入实验室。

3、存在外源性病源时，实验室入口处应贴有生物危险标志，并显示以下信息：

有关病源

、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名、电话号码、在实验室中必须佩带的个

人防护设施、出实验室所要求的程序。

4、实验室人员接受适当的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试（

如，乙肝免疫接种或TB皮试）。

5、根据所处理的病源，适当时，收集和储存适合于实验室人员和有风险人员使用的基本

血清样品。

根据所处理病源或设施的功能，应定期收集其他血清样品。

6、实验室主任为实验室人员特别制定的标准操作程序或生物安全手册中，应包括生物安

全程序。

对于有特殊风险的人员，要求阅读并在工作及程序上遵照执行。

7、实验室主任保证实验及其辅助人员接受适当的培训，包括和工作有关的可能存在的风

险、防止暴露的必要措施和暴露评估程序。

当程序必需改变时，有关人员必须每年更新

知识，接受附加培训。

8、对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器、毛细

管、手术刀。

a．针和注射器或其他锐器应限制在实验室内，类似灌肠、静脉切开放血、或实验动物液

体吸出等，可以用其他器具的，就不要用锐器。

可能时，用塑料器具代替玻璃器具。

b.注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次

性注射器（即注射器和针头是一体的）。

用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新

套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不

会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。

非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移

至处理区消毒，最好高压杀菌。

c．适当时，使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。

d．打碎的玻璃器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊

子。

盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在到掉前，应按照地方、州、联邦的规定进行

消毒。

9．培养物、组织，体液标本，或具有潜在传染性的废物要放入带盖的容器中，以防在收

集、处理、储存、运输或装卸过程中泄露。

10．按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其

他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。

污染的设备在送

去修理、维护前，要按照地方、州或联邦的规定消毒；

在离开设施转移前，要按照地方

、州或联邦的规定打包运输。

11．溅出或偶然事件中，明显暴露于传染源时，要立即向实验室主任报告。

进行适当的

医学评估、观察、治疗，保留书面记录。

12．和实验无关的动物不允许进入实验室。

1、任何时候都要使用正确保养的生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人

员防护设施、或物理遏制装置。

a．确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡

或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器（容器内部的压力可能与大气压不一致）、

动物鼻孔接种、从动物或胚胎卵采集感染组织。

b．涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或安

全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放实验室内离心。

2、当必须在生物安全柜外处理微生物时，需采取面部保护措施（跟镜、口罩、面罩、或

其他防溅装置），以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。

3、在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。

人员到非实验室区域

（如，咖啡屋、图书馆、门房）时，防护服必须留在实验室内。

防护服可以在实验室内处

理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。

4、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套。

戴两副手套更合适。

明显

污染的手套要处理，当有关传染源工作结束时或手套损伤时，要去掉手套。

一次性手套

不用清洗、不能重复使用，不能用于接触"

洁净"

的表面（键盘、电话等），也不应当戴着

到实验室外。

要备有带滑石粉的乳胶手套。

脱掉手套后，要洗手。

1、遏制病源的设施应该有带锁的门（见42CFR72．6）（另发）。

2、新建实验室选址要远离公共场所。

3、每个实验室有一个洗手池。

4、实验室设计要便于清洗，实验室内不适宜用地毯。

5、实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和耐用于工作台面及设施消毒的其

6、实验室的操作台应能承受预期的重量并符合使用要求。

实验台、安全柜以及设备之间

的空间应便于打扫。

实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于清洗的非织物。

7、安装生物安全柜时，要考虑到房间的通风和排风，不会导致生物安全柜超出正常参数

运行。

生物安全柜应远离门、远离能打开的窗，远离行走区，远离其他可能引起风压混

乱的设备，保证生物安全柜气流参数在有效范围内。

8、应有眼睛冲洗装置。

9、光线适宜于开展所有的工作，避免反光和闪光，以免妨碍视觉。

10、没有特别的通风要求。

添置新设备时，应考虑机械通风系统输送的气流不会造成实

验室外部空气的循环。

如果实验室有对着外面的窗子，应装防止苍蝇的窗纱。

生物安全三级（BSL-3）

BSL-3应用于临床、诊断、教学、研究、或者生产设施，在该级别中开展有关内源性和外

源性病源的工作，若因暴露而吸入该病源。

会引发严重的、可能致死的疾病。

实验人员

应在处理致病性的和可能使人致死的病源方面受过专业训练，并由对该病源工作有经验

的、有资格的科学工作者监督。

所有与传染源操作有关的步骤，都在生物安全柜或其他物理遏制装置中进行，或由穿戴

合适防护服及设施的实验人员进行。

实验室经过特殊设计和施工。

然而，应该认识到现有有些设施，不一定满足BSL-3的所有要求（即，双门进入工作区和

密封问题）。

在这种情况下，在BSL-2设施中开展常规操作（如，诊断程序中用于鉴定；

分

型、敏感性测试的病源繁殖），其安全级别也可接受，但还需做到1）将实验室内废气排出

室外；

2）实验室的通风经过平衡以向室内提供定向气流；

3）工作时，禁止进入实验室；

4

）严格遵照或使用BSL-3中推荐的标准微生物操作、特殊操作和安全设备。

只有实验室主

任可作出对BSL-3推荐的修订方法进行补充的决定。

以下的标准和特殊安全操作、设备及设施和BSL-3病源有关：

一、标准微生物操作

1、实验时，由实验室主任决定限制或禁止进入实验室。

2、接触传染源的人员在离开实验室取下手套后，要洗手。

3、实验室内严禁饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。

实验室内戴隐型眼镜的人，也要戴

眼镜和面罩。

食品要存放在工作区外专用的橱柜和冰箱中。

6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生气溶胶。

7、至少每天一次、或有活体洒出时，对工作台面进行消毒。

来自BSL-3实验室的传染性废物转移至他处释放前应消毒。

9、实施控制昆虫和龋齿动物的程序（参见附录G）（另发）。

二、特殊操作

1、实验时，关闭实验室的门。

2、实验室主任对进入实验室进行控制，限制项目有关人员及辅助人员进入。

未成年人不得进入实验室。

3、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求（如，

经过免疫接种）、遵守进出程序的人，才能进入实验室和动物房。

4、当实验室或遏制设施中有传染源和感染动物时，所有实验室和动物房入口处，应贴有

危险警告标志和常用的生物危险符号，并显示以下信息：

有关病源、实验室主任和有关

责任人的姓名和电话表、进入实验室的特别要求（如，必须免疫、戴口罩、或采取其他的

个人防护措施）。

5、实验室人员接受适当的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试（

如，乙肝免疫接种或TB皮试），并建议根据所处理的病源定期进行皮试。

6、适当时，收集和储存适合于所有实验室人员和其他有风险人员使用的基本血清样品。

根据所处理病源或实验室的功能，应定期收集其他血清样品。

7、实验室主任应制定实验室专用生物安全手册，标准操作程序中要包括生物安全预防措

施。

要告知实验人员特殊风险，实验人员要阅读，并在操作和程序中遵照执行。

8、实验人员及其辅助人员应接受适当的培训，包括和工作有关的可能存在的风险、防止

暴露的必要措施和暴露评估程序。

当程序必需改变时，有关人员必须每年更新知识，接

受附加培训。

9、实验室主任有责任确保在涉及BSL-3的微生物工作开展之前，所有人员熟练掌握标准

微生物操作及技能，熟练掌握特殊实验室设施的操作和运行，其中可能包括人致病菌或

细胞培养物处理的重要技术，或由实验室主任或其他熟悉于微生物安全操作及技能的、

称职的科研工作者提供的特殊培训课程。

10、必须经常对所有污染的锐器采取高度预防措施，包括针头和注射器、玻片、移液管

、毛细管和手术刀。

a．针和注射器或其他锐器应限制在实验室内，类似灌肠、静

脉切开放血、或实验动物液体吸出等，可以用其他器具的，就不要用锐器。

可能时，用

塑料器具代替玻璃器具。

b．注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头

是一体的）。

用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射

器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃

锐器的容器中。

非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀

菌。

11、所有与传染源有关的开放操作，都应在遏制设施内的生物安全柜或其他物理遏制设

备中进行。

不许在开放的实验台上、并在开放的设施中开展工作。

用背面为塑料质地的

纸擦拭生物安全柜内的无孔台面，便于清洁。

12、按日常程序、在有关传染源的