UF500i标准操作程序SOP综述Word文档下载推荐.docx
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UF-500i分析仪基于流式细胞计数原理分析尿样中的五个有机成份,如RBC(红细胞)、WBC(白细胞)、EC(上皮细胞)、CAST(管型)和BACT(细菌),并可定量显示。
3、性能参数
3.1.技术参数:
〈SEDIMENT-ch〉
S_FSCW(前向散射光宽度):
粒子长度
S_FLH(荧光强度(高灵敏度)):
粒子染色程度
S_FLLW(荧光宽度(低灵敏度)):
粒子染色部分宽度
S_FLL(荧光强度(低灵敏度)):
S_SSC(侧向散射光强度):
粒子内部复杂性
S_FLLW2(荧光宽度2(低灵敏度)):
粒子内重度染色位置的宽度
S_FSC(前向散射光强度):
粒子大小/高度、折射率
<
BACTERIA-ch>
B_FSCW(前向散射光宽度(高灵敏度)):
B_FSC(前向散射光强度(高灵敏度)):
粒子大小/高度
B_FLH(荧光强度(高灵敏度)):
粒子核染色程度
B_FSC2(前向散射光强度(低灵敏度)):
服务时使用(维护)
3.2.UF-500i性能/规格
环境温度
15~30℃(25℃最佳)
相对湿度
30-85%
电源
100–240VAC(50/60Hz)
耗电量
主机、进样器:
等于或低于500VA
保护类型
一级仪器(IEC60601-I)
显示范围
RBC:
0.0–99999.9/μL;
WBC:
EC:
CAST:
0.00–9999.99/μL;
BACT:
本底界限值
1.0/μL;
0.1/μL;
BACT:
1/μL
分析范围
1.0–5000.0/μL;
1.0–200.0/μL;
10.00–30.00/μL;
5.0–10000.0/μL;
再现性
10.0%以内;
30.0%以内;
40.0%以内;
准确度
±
10.0%以内;
30.0%以内;
40.0%以内;
经时稳定性
24小时后
10.0%以内(6μL模式);
±
20.0%以内(1μL模式);
携带污染
0.1%以内,或5.0/μL以内;
0.05%以内,或5.0/μL以内;
4、标本准备
尿液标本种类的选择和收集取决于临床医师的送验目的、病人的状况和试验的要求。
理想情况下,为了达到筛查、检出分析物和有意义有形成分的目的,应收集浓缩尿液。
临床常用尿被标本种类如下。
4.1.晨尿清晨起床后,在未进早餐和做其他运动之前排泄的尿掖,又称为首次晨尿。
住院病人最适宜收集此类标本,但在采集前一天应提供收集容器和书面收集说明,如外阴、生殖器清洁方法,留中段清洁尿等。
若采集后2h内不能进行分析的,要采取适当的防腐措施。
晨尿常用于筛查、直立性蛋白尿检查和细胞学研究。
4.2.随机尿随时排泄,无需患者做任何准备的尿液,称为随机尿,适用于常规及急诊筛查,但是,患者如摄入大量液体和剧烈运动后将直接影响尿液成分,从而不能准确反映患者疾病状况。
另一种方法是收集首次晨尿排泄后2-4h内的尿液标本,作为第二次晨尿,但要求患者在前晚22:
00点起到收集标本止,只能饮用200ml水,以提高细菌培养和有形成分计数的灵敏度。
4.3.计时尿收集一段时间内的尿液标本,如收集治疗后、进餐后、白天或卧床休息后的3h、12h或24h内全部尿液。
准确的计时和规范的说明是确保计时尿结果可靠的重要前提。
计时尿常用于定量测定和细胞学研究。
4.4.容器:
用洁净加盖的塑料或玻璃器皿留取新鲜尿15ml以上(注:
每个器皿醒目地方贴上病人的姓名、床号、住院号,最好有留尿时间)及时送到实验诊断室,操作人员把标本倒入100×
78mm的试管中约10ml,即为尿标本。
有条形码的贴上条形码。
4.5.尿液标本检测完后,弃入含有2000mg/L有效氯消毒溶液的废物筒中。
5、试验器材
5.1.一次性尿杯、试管、乳胶手套、试管架
6、仪器
6.1.SysmexUF-500i全自动尿液有形成分分析仪
7、试剂
7.1.UFIISHEATH(鞘液)
7.1.1.试剂品牌:
SYSSMEX;
代码:
UTS-900A;
包装规格:
20L
7.1.2.试剂主要成份:
Tris缓冲液0.14%
7.1.3.储存条件:
储藏温度为2-35℃,须存储于干净闭光环境中,请勿冰冻。
7.1.4.使用期限:
在有效期内使用,开封后有效期为60天。
7.1.5.注意事项:
在15-30℃下使用,打开后避免污染及灰尘和细菌进入;
浑浊或变色后不能使用;
避免接触皮肤,一旦接触立即用大量清水冲洗,采取必要的医疗措施。
7.2.UFIISEARCH-SED(染色液)
7.2.1.试剂品牌:
SYSMEX;
代码:
USS-800;
包装规格:
29mL
7.2.2.试剂主要成份:
7.2.2.1.Polymethine聚甲炔染料——对各有形成份的细胞膜、细胞核、细胞质进行特异性的核酸荧光染色;
7.2.2.2.乙烯乙二醇溶媒(辅助色素)——对精子进行特异性染色。
7.2.3.储存条件:
储藏温度2-35℃,须存储在干净闭光环境中,请勿冰冻。
7.2.4.使用期限:
在有效期内使用,开封后有效期为60天
7.2.5.注意事项:
7.3.UFIIPACK-SED(稀释液)
7.3.1.试剂品牌:
UPS-300;
2.1L
7.3.2.试剂主要成份:
7.3.2.1.中性等渗缓冲液;
酵母样菌染剂——对酵母样菌进行特异性染色;
7.3.2.2.溶血抑制成份——避免红细胞被破坏;
7.3.2.3.EDTA-3K——去除无定形的磷酸盐(形成螯合物)
7.3.3.储存条件:
储藏温度为2-35℃,须存储在干净闭光环境中,请勿冰冻。
7.3.4.使用期限:
7.3.5.注意事项:
在15-30℃下使用,打开后避免污染及灰尘和细菌
进入;
避免接触皮肤,一旦接触立即用大量
清水冲洗,采取必要的医疗措施。
7.4.UFIISEARCH-BAC(染色液)
7.4.1.试剂品牌:
USB-800;
25mL
7.4.2.试剂主要成份:
7.4.2.1.Polymethine聚甲炔染料——对细菌进行特异性的核酸荧光染色;
7.4.2.2.乙烯乙二醇溶媒(辅助色素)——除细菌外细胞碎片、杂质颗粒与细菌的区别。
7.4.3.储存条件:
储藏温度为2-35℃,须存储在干净闭光环境中,请勿冰冻。
7.4.4.使用期限:
7.4.5.注意事项:
7.5.UFIIPACK-BAC(稀释液)
7.5.1.试剂品牌:
UPB-300;
包装规格:
2.1mL
7.5.2.试剂主要成份:
7.5.2.1.含有阳离子表面活性剂的酸性高渗缓冲液——破坏所有细胞;
7.5.2.2.含有去除亚硝酸的药物——去除所有含有亚硝酸的残留物(防止颜色干扰);
7.5.2.3.非特异性染色抑制剂——抑制除细菌外其他杂质颗粒的
非特异性染色(防止颜色干扰)。
7.5.3.储存条件:
7.5.4.使用期限:
7.5.5.注意事项:
8、校准
8.1.每年校准2次上半年一次下半年一次(工程师负责校准)。
8.2.仪器的校准条件:
排除各种原因后质控未能通过,主要部件更换后或仪器远距离搬动,或严重故障须重新校准。
8.3.仪器进行维修和保养校准后需做质控,校准后如比对失败,工程师应验证质控品是否变质,在室内质控历史数据和室间质控数据表示良好时校准品可能变质,需更换重新的校准品,直至通过校准。
8.4.校准验证:
校准后即做质控,结果符合质控范围,校准后及时做精密度测试和线性测试。
随机取两份不同值病人尿液标本,和校准前样本值比对,结果符合比对标准。
每次校准完后,取10份样本做手工进样和自动进样两种进样方式的比对,并做记录,并由仪器商出校准报告。
8.4.1.精密度:
取两个不同值标本,每份连续测11次结果,去除第一次结果进行统计。
要求符合精密度标准。
8.4.2.线性:
分别取富含白细胞和红细胞的尿液,高、中、低值三份
用改良牛鲍氏计数池计数20次取均值作为理论值。
各稀释尿样(鞘液稀释)用UF-500i各计数20次,取均值做回归分析。
结果判断:
b要在1.00±
0.1。
8.4.3.校准后取20份标本进行手工WBC、RBC镜检比对,换算系数0.18µ
l=1HPF。
比对、精密度要求
项目
比对要求CV%
精密度要求CV%
RBC
B±
20%或±
18/μl
≤10%或±
WBC
B±
≤10%或±
EC
30%或±
20/μl
≤30%或±
CAST
40%或±
3/μl
≤40%或±
BACT
40/μl
≤20%或±
(YZB/希森美康004-2004检测依据标准)
9、操作步骤
9.1.打开外围设备电源——打开IPU电源——打开总开关——打开启动开关——执行质控分析——分析标本——手动模式或进样模式——显示输出分析结果——操作完成后执行关机程序——关闭总开关——关闭IPU电源——关闭外围电源。
9.2.仪器自检每天开机仪器会自动进行自检。
9.2.1.温度自检仪器开机后,UF1000i将自动执行自检。
当开启主机后,控制程序将载入到主机,依次执行液体机械部件初始化、温度
稳定化、自动清洗、本底检查等操作。
仪器会对反应室、鞘流加热器
及光电倍增管的温度进行监测并显示在温度稳定性对话框内,当稳定后,温度监测对话框自动关闭。
9.2.2.本底检查当仪器内部的温度稳定之后,系统将显示自动清洗本底检查对话框。
主机将执行三次自动清晰/本底分析。
本底达值到达容许值为止。
主机进入就绪状态。
9.3.样本分析
9.3.1.样本分析分为手动模式和进样器模式。
当仪器处于就绪状态或者手动抽吸就绪状态时,两种模式均可执行。
在抽吸就绪状态下可执行手动模式分析。
在手动模式下,操作人员手动混匀样本在进样分析。
9.3.2.在自动进样器模式下,样本被放置在样本架上自动搅拌与抽吸,然后进行分析。
使用样本架型进样器(选配件),一次可自动分析50个样本。
操作人员可以装载更多的样本架。
在该模式下,系统自动搅拌、抽吸并按照下列步骤处理样本:
(1)准备样本;
(2)输入分析所需的信息(样本架位置、试管位置);
(3)样本分析。
9.3.3.手动模式下,当仪器处于就绪状态时就可以执行手动模式分析。
在该模式下,均由操作人员人手工搅拌样本,并将尿样试管放置于分析位置。
按照下列步骤处理样本。
(1)采集并准备样本。
(2)输入必要的信息(样本号、样本状态及患者ID)。
9.4.每日维护:
检查气动组件真空闸室内的水量,并进行排水;
当执行关机操作时,检测器和稀释管线将被予清洗;
如果仪器处于连
续运行状态,您必须在每天分析结束后或者至少每24时或每500个样本执行一次关机操作。
仪器关机的步骤为:
运行主机关机程序→关闭主机电源→关闭IPU→关闭操作系统(关闭IPU电源)→关闭打印机电源。
操作人员每天应记录填写UF1000i维护和检查表
9.5.每月维护:
清洗样本旋转阀(SRV)
9.6.如果仪器长时间不用,则蒸发作用可能会导致仪器内的试剂成分粘附在仪器上,使其无法使用。
请定期开启IPU和主机的电源,检查其是否可以正常启动并进入就绪状态。
即使没有进行分析作业,也要确保在关闭电源前执行关机程序。
如果预期仪器将长时间闲置不用,请联系您的Sysmex服务代表。
10、质控
10.1.质控品:
UFIICONTROL有以下两种浓度类型:
UFIICONTROL-H和UFIICONTROL-L
10.2.质控品品牌:
SYSMEX;
代码:
UTL-100;
47mL
10.3.质控方法:
两种质控方法均可利用质控材料来观察每日的变化;
X-barControl和L-JControl。
10.3.1.X-barControl方法:
质控材料被连续分析两次,所得的平均数据将被作为质控数据使用。
10.3.2.L-JControl方法:
质控材料分析后所得数据即被作为质控数据使用。
L-JControl的质控界限值容易受到分析再现性的影响,因此要比X-barControl的质控界限值更广
10.4.第一次做质控和更换批号时需在IPU的质控文档里建立质控
文件,文件里包含:
质控名、文件编号、质控品批号、靶值、限制范围、
有效期等。
10.5.每次使用质控品时,反复摇动几次,直至瓶底沉淀颗粒完全消失,然后再颠倒该瓶30次,立即滴入试管,进行检测。
10.6.质控图表窗口显示与质控文件窗口中所选质控文件相对应的图表。
每个质控文档可以记录并显示300张绘图。
如果有更多绘图要显示,则超出的部分将自动被删除,删除操作将从最早的绘图开始。
10.7.质控文件窗口中选择的绘图可以输出至图表打印机,或者您也可以将绘图数据输出至主计算机或行式打印机。
11、干扰
11.1.应用误差来源分析:
11.1.1.采样误差;
11.1.2.样本超时放置;
11.1.3.标本搞错;
11.1.4.操作者装错试剂;
11.2.仪器:
11.2.1.管道污染或堵塞
11.2.2.试剂过期失效
11.2.3.激光状态不良
11.3.样本:
11.3.1.样本中有可被激光激发产生荧光作用的药物或抗生素成份;
11.3.2.被检者做过血管造影,眼底血管造影等;
11.3.3.样本中混有化学物品,如防腐剂、甲苯、酒精、福尔马林、
戊二醛等
11.4.环境:
11.4.1.电压不稳定;
11.4.2.环境灰尘颗粒过多;
11.4.3.散热条件不好;
11.5RBC参数的应用误差分析
11.5.1.假性升高:
11.5.2.假性降低:
11.5.2.1.溶血或潜血阳性样本;
11.5.2.2.尿中有影响检测的荧光物质,如药物,造影剂;
11.5.2.3.低渗尿液可以造成红细胞破坏;
12、结果报告
12.1.UF-500i报告定量检测参数(12项):
RBC、WBC、EC、CAST、BACT、P-CAST、SRC、YLC、CRYSTAL、SPERM、MUCUS、COND.研究参数信息(3项):
尿电导率分级;
UTI信息(尿路感染致病菌初筛)
UF-500i各项参数的报告方式
参数
报告方式
白细胞
XX/uL
红细胞
上皮细胞
管型
细菌
病理管型
小圆细胞
结晶
酵母菌
粘液丝
精子
电导率
XXmS/cm
13、生物参考区间
13.1.UF-100Oi全自动尿液有形成分分析仪各检验参数参考范围见下表:
UF-500i全自动尿液有形成分分析仪各检验参数参考范围
首字母缩写
参考范围
0-25/l
0-8/l
/l
Path.CAST
/uL
SRC
X’TAL
YLC
MUCUS
SPERM
Cond
mS/cm
13.2.换算系数:
0.18l=1个HPF
2.9l=1个LPF
14、临床意义
14.1.红细胞
14.1.1.正常人特别是青少年在剧烈运动、急行军、冷水浴,久站或重体力劳动后可出现暂时性镜下血尿,这种一过性血尿属于生理性变化范围。
女性患者还应注意月经污染问题,应通过动态观察加以区别。
14.1.2.泌尿系统自身疾病:
泌尿系统各部位的炎症、肿瘤、结核、结石、创伤、肾移植排异、先天畸形等均可引起不同程度的血尿,如急、慢性肾小球肾炎,肾盂肾炎,泌尿系统感染,肾结石,肾结核等等都是引起血尿的常见原因。
14.1.3.全身系统疾病:
主要见于各种原因引起的出血性疾病,如特发性血小板减少性紫癜、血友病、DIC、再生障碍性贫血和白血病
合并有血小板减少时;
某些免役系统性疾病如系统性红斑狼疮也可发生血尿。
14.1.4.泌尿系统附近器官的疾病:
如前列腺炎、精囊炎、盆腔炎等患者尿中也偶见红细胞。
14.2.白细胞:
14.2.1.泌尿系统炎症时均可见到尿中白细胞增多,尤其在细菌感染时为甚,如急、慢性肾盂肾炎,膀胱炎,尿道炎,前列腺炎,肾结核,肾移植后发生排异反应等;
14.2.2.女性阴道炎或宫颈炎、附件炎时可因分泌物进入尿中,而见白细胞增多,常拌大量扁平上皮细胞
14.3.透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中;
当有轻度或暂时性肾功能改变时,尿内可有少量透明管型;
尿液内管型的出现常提示存在肾实质性病变,可见于急性肾小球肾炎、慢性肾炎、慢性肾小球肾炎、慢性肾功能衰竭等
14.4.血尿来源的鉴别:
仪器不仅能计数尿中红细胞的总量,而且可显示每个红细胞大小分布的情况,并提示红细胞形态学信息。
14.4.1.当Fsc-P70≤70,告示“非均一红细胞”的信息,提示肾小球性血尿可能;
14.4.2.当Fsc-P70≥100且Fsc-DWSDFsc≤50,告示“均一性红细胞”的信息,提示非肾小球性血尿可能;
14.4.3.当Fsc-P70≥70且Fsc-DWSDFsc≥50,告示“混合性红细胞”的信息,提示肾小球或非肾小球性血尿均可能。
14.5.上皮细胞可少量出现于正常女性的尿中;
上皮细胞大量出现,提示泌尿系统有炎症。
14.6.尿内细菌数量增加,提示泌尿系统有感染。
伴随尿内白细胞数量的增加是诊断尿路感染的主要依据。
15、注意事项
15.1.最佳检测尿液是晨尿,不用防腐剂,及时送检,以保持尿液细胞成分维持原来的形态特征。
15.2.应准备干净、干燥采尿杯,在一般情况下,由患者自己采集中段尿。
女性患者应清洗外阴部后留取。
15.3.试剂应在失效期前使用,开封后应在试剂外包装上注明开封日期和失效期。
及时检测添加试剂。
15.4.每天开机后先做质控,质控结果在控时方可进行标本分析和结果的报告。
如质控失控应及时查找原因,质控正常后在做标本。
15.5.质控品摇匀后放置30秒后,应混匀后立即测定,避免时间过久沉淀将产生分布不均现象,导致测定误差。
15.6.UF1000i检测出尿液内病理管型、结晶阳性时,应进行显微镜观察,明确管型、结晶的类型,以便为临床诊断提供更准确的参考指标。
15.7.仪器检测出尿液中WBC、RBC、的结果与尿干化学分析中的隐血、白细胞的检测结果差距悬殊时应仔细分析散点图,同时复查干化学,必要时进行手工显微镜