5．紫外－可见分光光度计从光路分类有哪几类？
各有何特点？
（1）单光束分光光度计：
结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。
（2）双光束分光光度计：
能自动记录吸收光谱曲线，自动消除光源强度变化所引起的误差。
（3）双波长分光光度计：
能提高方法的灵敏度和选择性，能获得导数光谱。
可用于多组分混合物、混浊试样分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下的分析。
（4）二极管阵列分光光度计：
可全部波长同时检测，可获得时间、光强度和波长三维谱
6．简述紫外－可见分光光度计的主要部件、类型及基本性能。
紫外-可见分光光度计的基本结构是由五个部分组成：
即光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统。
1．光源：
常用的光源有热辐射光源和气体放电光源两类。
热辐射光源用于可见光区，如钨丝灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。
2．单色器：
单色器一般由入射狭缝、准光器（透镜或凹面反射镜使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狭缝等几部分组成。
其核心部分是色散元件，起分光的作用，主要有棱镜和光栅。
3．吸收池：
一般有石英和玻璃材料两种。
石英池适用于可见光区及紫外光区，玻璃吸收池只能用于可见光区。
4．检测器：
常用的检测器有光电池、光电管和光电倍增管等。
5．信号指示系统：
常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。
7．简述用紫外分光光度法定性鉴定未知物方法。
紫外分光光度法定性鉴定未知物的光谱依据是：
吸收光谱的形状、吸收峰的数目和位置及相应的摩尔吸光系数，而最大吸收波长及相应的是定性分析的最主要参数。
用紫外分光光度法定性鉴定未知物方法有：
对比吸收光谱的一致性；
对比吸收光谱特征数据；
对比吸光度（或吸光系数）的比值。
8．举例说明紫外分光光度法如何检查物质纯度。
（1）如果一个化合物在紫外区没有吸收峰，而其中的杂质有较强的吸收，就可方便的检该化合物中是否含有微量的杂质。
主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量
（2）如果一个化合物在紫外可见区有较强的吸收带，有时可用摩尔吸收系数来检查其纯度。
主成分强吸收，杂质无吸收/弱吸收→与纯品比E↓
杂质强吸收>>主成分吸收→与纯品比E↑，光谱变形
9．为什么最好在λmax处测定化合物的含量？
根据Beer定律，物质在一定波长处的吸光度与浓度之间有线性关系。
因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出浓度。
选被测物质吸收光谱中的吸收峰处，特别是在λmax处，可以提高测定灵敏度并减少测定误差。
被测物如有几个吸收峰，可选不易有其它物质干扰的，较高的吸收峰。
10．说明双波长消去法的原理和优点。
怎样选择λ1和λ2？
原理：
a与b两种物质的吸收光谱完全重叠，欲消除b组分的干扰直接测定a组分。
首先要选择采用两个测定波长λ1和λ2，测出在两波长处的吸光度，依据吸光度的加和性列式，然后计算混合物在两个波长λ1和λ2处的总吸光度的差值△A来求算出待测组分a的含量。
优点：
该方法测混合物时，可不经分离直接测定待测组分。
选择两个测定波长的原则
1）使干扰组分（待消除组分）在这两个波长具有相同的吸光度A1b、A2b；
2）使待测组分a这两个波长ΔAa足够大。
11．说明导数光谱的特点。
（1）导数光谱的零阶光谱极小和极大交替出现，有助于对吸收曲线峰值的精确测定。
（2）零阶光谱上的拐点，在奇数阶导数中产生极值，在偶数阶导数中通过零。
这对肩峰的鉴别和分离很有帮助。
（3）随着导数阶数增加，极值数目增加（极值＝导数阶数十1），谱带宽度变小，分辨能力增高，可分离和检测两个或者以上重叠的谱带。
（4）分子光谱中。
往往由于相邻吸收带的重叠．使吸收曲线产生峰位移动，峰形不对称。
出现肩峰等现象、可因相邻吸收带的强弱差别不同，相隔距离远近以及相重叠的部分多少而变化，这冲变化，有时在吸收光谱曲线上的表现可以是很微弱而不易辨别的。
而在导数图上则有明显的表现。
12．以有机化合物的官能团说明各种类型的吸收带，并指出各吸收带在紫外－可见吸收光谱中的大概位置和各吸收带的特征。
（1）R带：
由含杂原子的不饱和基团的n→π*跃迁产生，如C＝O；C＝N；—N＝N—，其λ200~400nm，强度较弱ε<100。
（2）K带：
由共轭双键的π→π*跃迁产生，如（—CH＝CH—）n，—CH＝C—CO—，其λ>200nm，ε>104。
（3）B带：
苯环本身振动及闭合环状共轭双键π-π*跃迁而产生的吸收带，是芳香族化合物的主要特征吸收带，其λ256nm，宽带，具有精细结构；ε~200。
（4）E带：
由苯环环形共轭系统的π→π*跃迁产生，也是芳香族化合物的特征吸收带其中E1带180nm，εmax>104（常观察不到），E2带200nm，εmax=7000。
（5）电荷转移吸收带：
有电子给予体和电子接受体的有机或无机化合物电荷转移跃迁。
其λ范围宽，ε＞104。
（6）配位体场吸收带：
配合物中心离子d-d或f-f跃迁产生。
可延伸至可见光区，ε＜102。
13．卡巴克洛的摩尔质量为236，将其配成每100ml含0.4962mg的溶液，盛于1cm吸收池中，在λmax为355nm处测得A值为0.557，试求其及ε值。
（=1123，ε=2.65⨯104）
14．称取维生素C0.05g溶于100ml的0.005mol/L硫酸溶液中，再准确量取此溶液2.00ml稀释至100ml，取此溶液于1cm吸收池中，在λmax245nm处测得A值为0.551，求试样中维生素C的百分含量。
（245nm=560） （98.39%）
15．某试液用2.0cm的吸收池测量时T=60%，若用1.0cm、3.0cm和4.0cm吸收池测定时，透光率各是多少？
（T2=77.46%，T3=46.48%，T4=36.00%）
16．有一标准Fe3+溶液，浓度为6μg/ml，其吸光度为0.304，而试样溶液在同一条件下测得吸光度为0.510，求试样溶液中Fe3+的含量（mg/L）。
（10.07μg/ml）
17．将2.481mg的某碱（BOH）的苦味酸（HA）盐溶于100ml乙醇中，在1cm的吸收池中测得其380nm处吸光度为0.598，已知苦味酸的摩尔质量为229，求该碱的摩尔质量。
（已知其摩尔吸光系数ε为2⨯104）（M=619）
18．有一化合物在醇溶液中的λmax为240nm，其ε为1.7⨯104，摩尔质量为314.47。
试问配制什么样浓度（g/100ml）测定含量最为合适。
（3.70⨯10-4~1.48⨯10-3，最佳8.03⨯10-4）
吸光度在0.2~0.7之间时为分光光度法的最适宜范围。
设l=1cm
19．金属离子M+与配合剂X-形成配合物MX，其它种类配合物的形成可以忽略，在350nm处MX有强烈吸收，溶液中其它物质的吸收可以忽略不计。
包含0.000500mol/LM+和0.200mol/LX-的溶液，在350nm和1cm比色皿中，测得吸光度为0.800；另一溶液由0.000500mol/LM+和0.0250mol/LX-组成，在同样条件下测得吸光度为0.640。
设前一种溶液中所有M+均转化为配合物，而在第二种溶液种并不如此，试计算MX的稳定常数。
（K稳=163）
20．K2CrO4的碱性溶液在372nm有最大吸收。
已知浓度为3.00⨯10-5mol/L的K2CrO4碱性溶液，于1cm吸收池中，在372nm处测得T=71.6%。
求（a）该溶液吸光度；（b）K2CrO4溶液的εmax；（c）当吸收池为3cm时该溶液的T%。
（A=0.145，εmax=4833，T=36.73%）
21．精密称取VB12对照品20mg，加水准确稀释至1000ml，将此溶液置厚度为1cm的吸收池中，在λ＝361nm处测得其吸收值为0.414，另有两个试样，一为VB12的原料药，精密称取20mg，加水准确稀释至1000ml，同样在l=1cm，λ＝361nm处测得其吸光度为0.400。
一为VB12注射液，精密吸取1.00ml，稀释至10.00ml，同样测得其吸光度为0.518。
试分别计算VB12原料药及注射液的含量。
（原料药=96.62%，注射液含量＝
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