血根碱药理及毒理作用的研究进展Word格式.docx

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血根碱（C20H15O5N）于1829年被首次发现（Chelombit’ko等，1968），是一种苯菲啶异喹啉类生物碱，主要存在于罂粟科、蓝堇科及芸香科的植物中，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、增强免疫力及杀虫等作用，在传统及当代药物中具有重要价值（Choi等，2009；

Janovska等，2009），但长期高剂量应用血根碱，将对机体造成一定程度的肝脏及心脏毒性。

1血根碱的分布和提取工艺

1.1血根碱的分布血根碱（sanguinarine），分子式为（C20H15O5N），相对分子质量为332，粉末状，主要存在于白屈菜的全草，紫堇的根、块，博落回的全草、血水草的地上部分，其结构早在1937年被Spath等发现，为四羟基奈菲啶的派生物。

1.2血根碱的提取血根碱作为博落回的主要有效成分，属异喹恶林类生物碱，其提取工艺和众多生物碱一样，20世纪以来，国内外学者对其分离提取及含量的测定也进行了大量的研究（Luo等，2004；

Sarkozi等，2006；

Cho等，2007；

Gumuscu等，2008）。

Kang等（2003）应用不同浓度的甲醇进行生物碱的提取，通过高效液相及反相高效液相进行手性及非手性异喹恶啉类生物碱的检测。

王祥云等（2003）进行了博落回总生物碱的提取，用酸水浸提，提取液通过阳离子交换树脂柱，将吸附了生物碱的阳离子树脂洗至中性，放入索氏提取器中，酸化后用混合有机溶剂提取；

此方法的可行性用小檗碱进行验证，提取所得的总生物碱用HPLC－MS进行分析。

结果与文献中常用的碱性条件下的索氏提取法相比，在酸性条件下用混合有机溶剂进行提取所得的生物碱成分较多，所以此方法不仅适用博落回中总生物碱的提取，也可用于其他药用植物总生物碱的提取（王祥云等，2003）。

Kursinszki等（2006）采用酸性甲醇为溶剂，对博落回全草中的生物碱进行超声萃取，然后采用不同浓度在不同时间下进行分离，通过对各粗提物和萃取物的提取率与生物碱的比较分析，确定博落回总碱的最佳提取和分离工艺，其最佳工艺为应用酸性甲醇通过固相萃取，经改良反向高效液相进行提取，其回收率可达80%以上（Kursinszki等，2006）。

2血根碱的药理作用

2.1血根碱对细菌及真菌的作用Nandi等（1983）研究了不同浓度的血根碱对4种生物型弧菌的最低抑菌浓度（MIC）和半数抑菌浓度（IC50）的测试，结果表明血根碱对4种菌的最低抑菌浓度均达到微克水平，且对OGAWA型霍乱弧菌的作用最好，同时对霍乱弧菌的半数抑菌浓度亦最强。

Ladanyi等（1984）证明血根碱可作为一种有效的治疗药物来抵御大部分细菌性疾病。

Wink等（1998）在对生物碱的作用靶位进行研究的同时，测定了51种生物碱对大肠杆菌、沙门氏菌及枯草杆菌的最低抑菌浓度，结果表明血根碱对其达到100%杀灭率的浓度最低，效果最好。

同时，Vollekova等（2001）进行了植物十大功劳茎皮中分离的异喹恶啉类生物碱对6种马拉色菌属的真菌最低抑菌浓度的测试，表明不同的真菌对异喹恶啉类生物碱有不同的敏感性，且最低抑制浓度达到毫克水平。

2.2血根碱的杀虫作用王高学等（2007）发现血根碱在0.6mg/L以上时能彻底杀灭鱼类指环虫，浓度为0.4～0.6mg/L时对金鱼指环虫具有一定的杀灭作用，当浓度低于0.4mg/L时没有杀虫活性。

冯岗等（2008）发现二氢血根碱对黏虫3龄幼虫具有较高毒杀作用，故推测二氢血根碱可能是小果博落回的主要杀虫活性成分之一。

巩忠福等（2002）通过体外杀虫试验观察了博落回等19种植物甲醇粗提物对兔痒螨的杀灭活性；

结果表明，含原植物50%的博落回、百部、橘皮、白鲜皮、苦楝皮、苦参及打破碗碗花等7种植物甲醇粗提物水悬液均可在4h内杀灭兔痒螨成虫；

其中博落回和百部可在2h内杀灭痒螨.其活性不低于2mg/L阿维菌素水溶液。

2.3血根碱的抗癌作用近年来，国内外学者对血根碱在抗肿瘤细胞的作用上进行了大量研究。

Ahmad等（2000）进行了血根碱对人类表皮癌细胞（A431）与正常表皮细胞（NHEKs）在凋亡指数及细胞增殖上的作用比较，结果表明，血根碱均可浓度依赖性的降低A431及NHEKs细胞的存活率，但对A431细胞更为敏感，由于其诱导了A431细胞的凋亡。

Weerasinghe等（2001）证明血根碱在较低浓度就可诱导人类白血病细胞中Bcl－2及K562的死亡，从而达到抗人类白血病的作用。

有研究结果表明，血根碱通过诱导Bcl－2家族蛋白、谷胱甘肽和线粒体的凋亡而发挥抗癌作用（Adhami等，2003；

Debiton等，2003）。

Adhami等（2004）研究结果表明，血根碱通过抑制调节细胞周期的蛋白激酶的活性使得人前列腺癌细胞的细胞增殖周期的阻断及细胞凋亡从而发挥抗前列腺癌的作用。

Malikova等（2006）进行了血根碱对人类癌细胞的生长、凋亡及细胞周期的影响，结果表明血根碱可作为很有前景的天然药用分子，在治疗前列腺癌细胞时由于其对细胞凋亡及细胞周期的介导而起作用（Malikova等，2006）。

Hussain等（2007）证明了血根碱浓度依赖性的抑制了细胞的增殖并诱导了细胞的凋亡，从而颉颃原发性肿瘤。

Matkar等（2008）证实血根碱通过造成人类结肠癌细胞的DNA损失及P53依赖的细胞的死亡而发挥抗人类结肠癌的作用。

Larsson等（2009）验证了血根碱作为一种抗癌药物可有效抵抗人类神经内分泌肿瘤细胞。

Larsson等（2010）就血根碱在体外诱导神经内分泌肿瘤细胞的凋亡进行了相关研究。

近10年来，国内外学者对血根碱在抗癌作用上的研究甚多，也正受到人们的广泛关注。

血根碱作为从天然植物中提取的有效成分，其药效独特，在抗癌方面也会发挥巨大作用。

2.4血根碱对骨骼肌、心肌及血管平滑肌的作用Hu等（2000）从生理学的角度描述了血根碱通过促进骨骼肌细胞内钙离子的释放来诱导骨骼肌的收缩。

Chien等（2001）表明血根碱可浓度依赖性的抑制血管收缩剂（肾上腺素）所致的血管收缩，并达到微克水平，其作用机理可能是通过抑制三磷酸肌醇的形成及钙离子通道有关。

Chien等（2005）从老鼠心脏中分离得到的肌条为试验对象，进行了血根碱对肌条的影响，结果表明血根碱可浓度依赖性地诱导心肌收缩，其机理主要是通过诱导细胞外钙离子的内流所致。

3血根碱的毒理作用

Sarkar（1948）首次从罂粟科油中分离得到二氢血根碱和血根碱，并研究了其毒性作用，表明100g体重的老鼠注射2mg血根碱的盐酸盐时可致其死亡率达100%；

同时血根碱可使得白化病老鼠的眼睛发生失明；

血根碱对一些酶系统也存在一定的毒性，血根碱可抑制丙酮酸盐、乳酸盐及琥珀酸盐的氧化，同时抑制一些SH酶系。

对血根碱造成的体内的毒性可通过提前15～20min注射乙二醇得到保护，对血根碱造成的体外酶系的损失无法修复，但可阻止进一步的损失（Sarkar，1948）。

Dalvi等（1985）进行了血根碱对肝脏的毒性作用试验，表明浓度为10mg/kg的血根碱不仅增加了谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活力，同时造成了微粒体氧化酶细胞色素P450及苄甲苯丙胺脱甲基酶活性的丢失，造成鼠肝脏及体重的下降，随之出现腹膜性水肿及轻微肝脏肿大。

对肝组织进行显微观察，发现肝细胞的退化及坏死，进一步证实了血根碱具有潜在的肝毒性。

Williams等（2000）证明血根碱（10mg/kg）可巨大降低肝内谷胱甘肽及P450酶系的活性，但应用3－甲胆蒽（p450酶系的诱导物）20mg可解除血根碱造成的P450酶的损伤。

Chien等（2005）就血根碱对心脏的毒性作用进行了相关研究，应用膜片卡技术，对心肌细胞进行全细胞记录，应用血根碱后记录了其对心肌细胞钙离子电流的影响，从而造成心脏的挛缩，结果表明，血根碱浓度依赖性的诱导心肌细胞外钙离子的内流从而引起心肌的挛缩。

4血根碱的临床应用

4.1在人类疾病中的应用血根碱作为一种异喹恶啉类生物碱早在20世纪就已广泛应用于临床，用于治疗人类的细菌性疾病及消炎等（Wink等，1998）。

近10年来，国内外主要集中于血根碱在抗癌方面的研究上，主要用于人类的表皮癌、前列腺癌、渗出性淋巴瘤、结肠癌、肝癌及白血病的治疗等（Ahmad等，2000；

Larsson等，2010）；

还有将血根碱作为一种免疫增强剂来提高人类的免疫力。

4.2在兽医临床中的应用随着血根碱在人类临床中的广泛应用，血根碱在兽医临床的应用也备受关注。

博落回硫酸盐注射液（其主要有效成分为生物碱），具有抗菌消炎、清热解毒的作用，对仔猪黄白痢、水肿、猪的传染性肠胃炎和副伤寒等有特效且无耐药性、无残留和无毒副作用，使用安全可靠。

已载入农业部1996版《兽药质量标准》中。

体外抑菌试验和兽医临床试验结果表明，博落回注射液对大肠杆菌最低抑菌浓度（MIC）为7.81μg/mL，治疗仔猪黄痢和白痢的总有效率达80%，并具有用量小、成本低等优点。

利用博落回提取的有效成分研制出博落回注射液，临床试验结果表明，本品对猪丹毒、仔猪下痢、肠炎、禽霍乱、禽下痢等均有良好的治疗效果（饶茂阳等，2001）。

1999年经农业部批准血根碱作为调味剂、香料添加于动物饲料中。

猪每天摄入博落回生物碱的安全剂量为不超过5mg/kg体重。

国外将血根碱和白屈菜红碱用于饲料中刺激动物食欲来增加采食量，保护肠道内的必需氨基酸被微生物的降解，从而促进动物生长（Kosina等，2004）。

5展望

1948年Sarkar从罂粟科植物中提取到血根碱的单体以来，国内外学者全面深入的研究了血根碱在人类方面的药效及毒性作用，但关于血根碱在兽医临床中的应用还未引起足够的重视，且研究甚少；

如血根碱对动物性疾病的防治作用及相关机理的研究较少。

近几年，中国一些兽药公司把血根碱作为免疫增强剂添加到饲料中，用于提高动物的免疫力。

但血根碱对畜禽性疾病的防治作用及相关机理研究甚少，且缺乏相关资料。

因此，把血根碱用于兽医临床中，来替代部分抗生素及化学合成药，并研究其对动物性疾病的防治作用及机理定将会给畜牧业的发展带来巨大的推动作用。

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