第十四章基因重组与基因工程1DOC.docx

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第十四章基因重组与基因工程

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2011-06-2910:

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济宁医学院生化教研室作者:

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[测试题]一、名词解释：

1.基因工程（geneticengineering）。

2.接合作用（conjugation）。

3.转化作用（transforation）。

4.转导作用（transduction）。

5.转座（transposition）。

6.转座子（transposons）。

7.同源重组（homologousrecombinat

[测试题]

一、名词解释：

1.基因工程（geneticengineering）。

2.接合作用（conjugation）。

3.转化作用（transforation）。

4.转导作用（transduction）。

5.转座（transposition）。

6.转座子（transposons）。

7.同源重组（homologousrecombination）。

8.基本重组（generalrecombination）。

9.DNA克隆（DNAcloning）。

10.复制子（replicon）。

11.限制性核酸内切酶（restrictionendonuclease）。

12.回文结构（palindrome）。

13.配伍末端（compatibleend）。

14.目的DNA（targetDNA）。

15.互补DNA（complementaryDNA；cDNA）。

16.克隆载体（cloningvector）。

17.表达载体（expressionvector）。

18.质粒（plasmid）。

19.α—互补（alphacomplementation）。

20.基因组DNA文库（genomicDNAlibrary）。

21.标志补救（markerrescue）。

22.转染（transfection）。

23.基因组DNA（genomicDNA）。

24.感受态细胞（competentcell）。

25.聚合酶链反应（polymerasechainreaction）。

26.cDNA文库（cDNAlibrary）。

27.保守性转座（conservativetransposition）。

28.复制性转座（duplicativetransposition）。

29.溶菌生长途径（lysispathway）。

30.溶源生长途径（lysogenicpathway）。

二、填空题：

31.自然界的常见基因转移方式有____、____、____、____。

32.不同DNA分子间发生的共价连接称为____有____、____两种方式。

33.某些基因可以从一个位置移动到另一个位置，这些可移动的DNA序列包括____和____。

34.由___和___介导的基因移位或重排称为转座。

35.反转录病毒整合酶可特异地识别．整合反转录病毒的cDNA的____，转座酶可特异识别转座子的____，发生特异性整合。

36.基因工程的载体必须具备的条件有____、____、____。

37.限制性内切核酸酶识别的核苷酸序列的个数为____、____和____，其切口有____端和____端。

38.基因工程常用的载体DNA分子有____、____．和____。

39.一个完整的DNA克隆过程应包括____、____、____、____、____。

40.目的基因获取的途径或来源有____、____、____、____。

41.基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有____、____、____。

42.基因克隆的原核表达体系的E,coli表达体系的表达载体应符合的标准有：

____、____、____、____。

43.基因克隆真核生物表达体系常见的有____、____、____表达体系。

44.根据重组体DNA的性质不同，将重组体DNA导入受体细胞的方式有____、____、____等。

45.M13噬菌体基因间隔区插入E,coli的一段调节基因及___的N端___个氨基酸残基的编码基因，其编码产物为______的α片段，突变型lac-E,coli可表达该酶的ω片段。

当宿主细胞与克隆载体同时表达两个片段时，宿主细胞可使特异的作用物变为兰色化合物，即称为____。

46.如果M13的外源基因被插入到lacZ基因内，则在含有X—gal的培养基上生长时会出现____色菌落，如果在lacZ基因内无外源基因插入，在同样的条件下呈现____色菌落。

47.典型的插入序列是由____序列和一个____编码基因构成。

48.插入序列发生的转座有____和____两种形式。

49.当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，____就可以从一个细胞（细菌）转移到另一细胞（细菌），这种类型的DNA转移称为____作用。

50.重组DNA技术中常用的工具酶有____、____、____、____。

三、选择题：

A型题

51.关于接合作用正确的是

A．与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，染色体DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）

B．细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，某些较大质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）

C．细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，噬菌体DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）

D．细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，所有类型的质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）

E．细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，所有类型的噬菌体DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）

52.下列那种方式保证了免疫球蛋白的多样性？

A．转化B．转染

C．转位D．转导

E．接合

53.微切割技术使目的基因可来源于下列那种物资？

A．真核细胞染色体DNAB．人工合成DNA．

C．CDNAD．G—文库

E．C—文库

54.基因工程的特点是：

A．在分子水平上操作，在分子水平上表达B．在分子水平上操作，在细胞水平上表达

C．在细胞水平上操作，在分子水平上表达D．在细胞水平上操作，在细胞水平上表达

E．以上均可以

55.实验室内常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：

A．DNA连接酶B．DNA聚合酶Ⅰ

C．DNA聚合酶ⅡD．DNA聚合酶Ⅲ

E．反转录酶

56．用来鉴定DNA的技术是：

A．Northern印迹B．Southern印迹

C．Western印迹D．亲和层析

E．离子交换层析

57．用来鉴定DNA的技术是：

A．Northern印迹B．Southern印迹

C．Western印迹D．亲和层析

E．离子交换层析

58．重组DNA技术中常用的工具酶下列那项不是：

A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶

C．DNA聚合酶ⅠD．RNA聚合酶

E．反转录酶

59．F-细胞与F+细胞混合培养，产生F+细胞的过程为：

A．转化B．转导

C．接合D．突变

E．转位

60．DNA致癌病毒感染宿主细胞后，使之发生癌变是因为发生了：

A．转化B．转导

C．接合D．转座

E．转位

61．关于基因工程的叙述，不正确的是：

A．根据实验目的选择目的基因B．选择一个适合的载体

C．把目的基因和载体分别用限制性核酸内切酶切开D．连接酶只连接目的基因和载体

E．把重组体转化到细胞中去的过程不是绝对的

62．限制性核酸内切酶不具有那项特点：

A．仅存在原核细胞中B．用于重组DNA技术中的为Ⅰ类酶

C．能识别双链DNA中特定的碱基顺序D．具有一定的外切酶活性

E．辨认的核苷酸序列常具有回文结构

63．限制性核酸内切酶识别DNA中核苷酸序列的个数为：

A．4、5、6B．5、6、7

C．6、7、8D．4、6、8

E．4~8

64．如果某限制性核酸内切酶识别的碱基序列为6个，则24Kb的一段随机的DNA序列可出现的切口数为：

A．4次B．5次

C．6次D．7次

E．8次

65．关于限制性核酸内切酶的叙述，下列那项是错误的：

A．限制性核酸内切酶分为三类，用于基因工程的为Ⅱ酶B．限制性核酸内切酶切割后可产生粘性末端或平端

C．识别的核苷酸序列个数可以是6个或8个D．识别的序列一般具有回文结构

E．识别的DNA为单链

66．关于基因工程的叙述，下列那项是错误的？

A．基因工程也称基因克隆B．只有质粒DNA可作为载体

C．重组体DNA转化或转染宿主细胞D．需获得目的基因

E．需对重组DNA进行纯化．筛选

67．有关质粒的叙述，下列那项是错误的？

A.小型环状双链DNA分子B．可小到2~3Kb，大到数百个Kb

C．能在宿主细胞中独立自主地进行复制D．常含有耐药基因

E．只有一种限制性核酸内切酶切口

68．有关质粒的叙述，下列那项是错误的？

A．质粒的某些遗传信息可赋予宿主细胞B．质粒较易转化

C．质粒的遗传表型可作为转化子的筛选依据D．PBR322的分子中仅有一个E．coRⅠ内切酶位点

E．PBR322含有β—半乳糖苷酶的α片段基因

69．有关噬菌体的叙述错误的是：

A.常用作克隆载体的噬菌体有λ—噬菌体和M13噬菌体B．λ噬菌体DNA改造成的载体有λgt系列和EMBL系列

C．λgt系列适用于插入型载体，用于cDNA克隆D．EMBL系列适用于置换型载体，用于基因组DNA克隆

E．M13噬菌体基因间隔区插入了E．coli的一段调节基因和LacZ的C端氨基酸编码基因

70．下列那项不是重组DNA的连接方式

A．粘性末端与粘性末端的连接B．平端与平端的连接

C．粘性末端与平端的连接D．人工接头连接

E．同聚物加尾连接

71．关于翻译，下列那项不正确？

A．重组体由目的基因与载体连接组成B．重组体能转化细胞

C．重组体的表达在细胞水平D．重组体有独立繁殖的能力

E．重组体的表达体系有真核和原核两种

72．关于基因重组的叙述，错误的是：

A．整段的DNA不能在细胞内进行交换B．整段的DNA能在细胞内进行交换

C．整段的DNA能在不同的物种间进行交换D．交换的DNA能在新的位置上进行复制．转录．翻译

E．基因重组可引起自然突变现象

73．基因重组的方式不包括：

A．转化B．转导

C．转位D．转换

E．整合

74．关于噬菌体错误的是；

A.λ噬菌体DNA进入宿主菌后可整合到宿主菌DNA中又可保持独立状态

B.B．依赖本身的酶系进行其DNA的复制

C.C．依赖宿主的酶系进行其DNA的转录

D.D．依赖宿主的酶系表达其蛋白质外壳

E.E．当λ噬菌体从宿主细胞释放出来，再感染另外的宿主时，可发生转导作用

75．有关噬菌体的叙述那项不符合：

A．感染大肠杆菌时仅把DNA注入大肠杆菌内B．有溶源和裂解两种生活方式

C．溶源和裂解两种生活方式可以相互转变D．噬菌体是由外壳蛋白和DNA组装而成

E．当从一个宿主细胞释放出来，再感染另外宿主时，一定发生转导作用

76．DNA克隆不包括下列那项步骤？

A．选择一个适合的载体B．限制性核酸内切酶在特异位点裂解质粒和目的基因

C．用连接酶连接载体DNA和目的DNA，形成重组体D．用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌

E．重组体用融合法导入细胞

77．下列那项不能作为表达载体导入真核细胞的方法？

A．磷酸钙转染B．电穿孔

C．脂质体转染D．显微注射

E．氯化钙转染

78．下列那项不能作为基因工程重组体的筛选方法

A．抗药性标志选择B．宿主菌的营养缺陷标志补救

C．原位杂交D．Southern印迹PCR技术

79．下列那项不是重组体筛选的免疫化学方法的工作原理及特点：

A.将琼脂培养板上的转化子菌落经蒸汽裂解释放抗原

B.将固定目的基因编码蛋白质的抗血清聚乙烯薄膜覆盖在裂解菌落上

C.再使用32P标记的DNA探针与薄膜反应

D.经放射自显影检出阳性反应菌落

E．免疫学方法特异性强．灵敏度高，尤其适用于选择不为宿主菌提供任何选择标志的基因

80．重组DNA技术不能应用于：

A．疾病基因的发现B．生物制药

C．DNA序列分析D．基因诊断

E．基因治疗

81．基因重组是指DNA分子的：

A．共价连接B．氢键连接

C．离子键连接D．交换

E．退火

82．下列那种药物不能用基因工程的方法生产？

A．胰岛素B．干扰素

C．白细胞介素D．性激素

E．促红细胞生成素

83．DNA重组技术不能应用于下列哪个方面？

A.产前诊断B．携带者测试

C．症候前诊断D．遗传病的易感性

E．传染病的传染性

84．一种可靠的DNA诊断学方法，下列那项是不必符合的？

A．能正确扩增靶基因B．能准确区分单个碱基的差别

C．本底或噪声低，不干扰DNA的鉴定D．便于完全自动化操作

E．方法简便，易于推广应用

85．关于转化错误的是：

A．受体细胞获得新的遗传表型B．外源DNA一定整合进受体细胞基因组

C．自然界中较大的外源DNA转化几率较低D．自然界中较大的外源DNA转化几率较高

E．越大的外源DNA与染色体整合几率越低

86．关于同源重组不正确的是：

A．同源重组不需要特异的DNA序列B．同源重组要求两分子间序列必须相同

C．RecB．C．D具有内切酶和解旋酶活性D．Holliday中间体的形成，是同源重组的重要步骤

E．需要DNA连接酶参与

87．下列那种酶是重组DNA技术中最重要的？

A．反转录酶B．碱性磷酸酶

C．末端转移酶D．DNA聚合酶Ⅰ

E．DNA连接酶

88．在分子生物学中，基因克隆主要指：

A．DNA的复制B．DNA的转录

C．DNA的剪切D．RNA的转录

E．RNA的剪接

89．在分子生物学中，重组DNA又称为：

A．酶工程B．蛋白质工程

C．细胞工程D．基因工程

E．DNA工程

90．基因工程中，不常用到的酶是；

A．限制性核酸内切酶B．DNA聚合酶

C．DNA连接酶D．逆转录酶

E．DNA解链酶

91．限制性核酸内切酶酶切后的DNA末端最常见的是：

A．平头末端B．3’突出末端

C．5’突出末端D．粘性末端

E．缺口末端

92．能识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为：

A．DNA内切酶B．限制性内切核酸酶

C．非限制性内切核酸酶D．限制性外切核酸酶

E．非限制性外切核酸酶

93．cDNA是指：

A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

C．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAD．在体内经反转录合成的与RNA互补的RNA

E．在体内经反转录合成的与RNA互补的DNA

94．基因工程中通常使用的质粒存在于：

A．细菌染色体B．酵母染色体

C．细菌染色体外D．酵母染色体外

E．以上均不是

95．质粒的分子结构是：

A．环状双链DNAB．环状单链DNA

C．环状单链RNAD．线状双链DNA

E．线状单链DNA

96．聚合酶链反应常常缩写为：

A．PRCB．PER

C．PDRD．BCR

E．PCR

97．在已知DNA序列的情况下，获取目的基因的最方便的方法是：

A．人工化学合成B．基因组文库法

C．cDNA文库法D．PCR法

E．从染色体DNA直接提取

98．E．coRⅠ切割DNA双链产生：

A．平端B．5’突出的粘性末端

C．3’突出的粘性末端D．钝性末端

E．配伍末端

99．用于PCR反应的酶是：

A．DNA连接酶B．碱性磷酸酶

C．逆转录酶D．限制性内切核酸酶

E．TaqDNA聚合酶

100．PstⅠ内切酶切割目的基因后产生：

A．5′——G↓AATTC——3′B．5′——GTT↓AAC——3′

3′——CTTAA↑G——5′3′——CAA↑TTG——5′

C．5′——CTGCA↓G——3′

D．5′——CTG↓CAG——3′

3′——G↑ACGTC——5′3′——GAC↑GTC——5′

E．5′——GAA↓TTC——3′

3′——CTT↑AAG——5′

101．将PstⅠ切割后的目的基因与同样切割的载体DNA连接是：

A．同聚物加尾连接B．人工接头连接

C．平端连接D．粘性末端连接

E．非粘性末端连接

102．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：

A．3’磷酸末端和5’羟基末端B．5’磷酸末端和3’羟基末端

C．3’磷酸末端和5’磷酸末端D．3’羟基末端和5’羟基末端

E．3’羟基末端．5’羟基末端和磷酸

103．基因工程中使目的基因与载体拼接的酶是：

A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶

C．DNA连接酶D．RNA连接酶

E．限制性核酸内切酶

104．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称为：

A．转化B．转染

C．转导D．转位

E．感染

105．最常用的筛选转化细菌是否含有质粒的方法是：

A．营养互补筛选B．抗药性筛选

C．免疫化学筛选D．原位杂交筛选

E．Southern印迹筛选

106．α互补筛选属于：

A．抗药性标志筛选B．酶联免疫筛选

C．标志补救筛选D．原位杂交筛选

E．免疫化学筛选

107．进行同聚物加尾法连接目的基因和载体DNA时，需要那种酶？

A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶

C．引物酶D．逆转录酶

E．末端转移酶

108．确切的讲，cDNA文库包含：

A．一个物种的全部基因信息B．一个物种的全部RNA信息

C．一个生物体组织或细胞的全部基因信息D．一个生物体组织或细胞的全部RNA信息

E．一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息

109．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：

A．小型环状双链DNA分子B．携带有某些耐药基因

C．在细胞分裂时恒定地传递给子代细胞D．具有自我复制能力

E．获得目的基因

110．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：

A．E．coli表达体系B．原核表达体系

C．酵母表达体系D．昆虫表达体系

E．哺乳类细胞表达体系

B型题：

（111~113）

A．噬菌体感染宿主菌后核酸进入菌体的过程B．外来DNA引起生物类型改变的过程

C．溶源菌中的噬菌体全部基因都表达D．溶源菌中的噬菌体部分调控区的基因表达

E．带有宿主DNA的噬菌体

111．溶源状态是：

112．进入裂解周期是：

113．转导噬菌体是指：

（114~116）

A．接合作用B．转化作用

C．转导作用D．转座作用

E．转移作用

114．F因子阴性细胞与F因子阳性细胞形成F因子阳性细胞的是：

115．病毒从被感染的细胞释放出来，再次感染另一细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移的是：

116．从一个染色体位点转移至另一位点的分散的重复序列称为：

（117~120）

A．插入序列转座B．转座子转座

C．位点特异的重组D．同源重组

E．溶源

117．噬菌体DNA和宿主染色体的特异靶位点整合称为：

118．噬菌体的生长方式是：

119．Tn3发生的DNA转移的是：

120．复制后的一个复制本迁移至新位，另一个仍保留在原位的是：

（121~123）

A．RecAB．E．coRⅠ

C．RuvCD．LexA

E．Ffactor

121．有蛋白水解酶活性的是：

122．能使同源重组中单链DNA对另一双链DNA的侵入的是：

123．切割Holliday中间体的内切酶是：

（124~126）

A．RepliconB．Cloning

C．InvertedrepeatsD．Palindrome

E．Transposons

124．目的基因与载体连接形成：

125．来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合称为：

126．限制性内切核酸酶识别的序列具有：

（127~129）

A．抗药性筛选B．分子杂交筛选

C．RNA反转录D．免疫学方法

E．体外翻译

127．用于鉴定质粒是否转化的一般方法是：

128．用于鉴定转化子细胞是否含有目的基因的常用方法是：

129．利用目的基因表达产物的特异性抗体来筛选含有目的基因的转化子细胞的方法是：

（130~132）

A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶

C．反转录酶D．TaqDNA聚合酶

E．碱性磷酸酶

130．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：

131．用于PCR反应的酶是：

132．将目的基因与载体进行拼接的酶是：

（133~134）

A．支原体B．衣原体

C．噬菌体D．细菌

E．酵母

133．常用于原核表达体系的是：

134．常用于真核表达体系的是：

（135~137）

A．转染B．转化

C．感染D．转导

E．转位

135．以质粒为载体，细菌为宿主的导入方式是：

136．以噬菌体为载体，细菌为宿主的导入方式是：

137．以病毒为载体，哺乳动物细胞为宿主的导入方式是：

（138~139）

A．抗药性筛选B．RNA反转录

C．免疫化学方法D．体外翻译

E．PCR

138．对重组体内基因进行直接筛选的方法是：

139．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：

（140~142）

A．RNA聚合酶B．末端转移酶

C．碱性磷酸酶D．反转录酶

E．核苷酸酶

140．能切除DNA末端磷酸基的是：

141．能在DNA3’羟基末端进行同聚物加尾的是：

142．合成cDNA用的是：

（143~145）

A．同聚物加尾连接B．人工接头连接

C．粘性末端连接D．缺口末端连接

E．平端连接

143．外源基因和载体DNA经过E．coRⅠ切割后的连接属于：

144．在外源基因和载体DNA末端加同聚物后进行连接属于：

145．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端后进行连接属于：

X型题：

146．可用于基因工程载体的DNA分子有：

A．染色体DNAB．病毒DNA

C．细菌DNAD．噬菌体DNA

E．质粒DNA

147．重组DNA技术的基本过程包括：

A．目的基因的获取B．PCR反应

C．克隆载体的构建D．目的基因与载体的连接

E．重组体分子导入受体菌

148．基因克隆又称为：

A．重组DNAB．重组RNA

C．DNA克隆D．RNA克隆

E．蛋白质复制

149．组成PCR反应体系的物质包括：

A．RNA引物B．TaqDNA聚合酶

C．RNA聚合酶D．DNA模板

E．ddNTP

150．对于重组体的筛选，属于直接选择法的是：

A．免疫化学法B．原位杂交法

C．Southern印迹D．补救标志筛选

E．抗药性标志筛选

151．对于重组体的筛选，属于非直接选择法的是：

A．免疫化学法B．原