实验室常用培养基Word格式文档下载.docx

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K2HPO41g，MgSO4·

7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。

待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素（链霉素含量为30μg/mL）.

4.马铃薯培养基（PDA）（用于霉菌或酵母菌培养）

马铃薯（去皮）200g,蔗糖（或葡萄糖）20g,水1000mL

配制方法如下:

将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH.霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖.

5.察氏培养基（蔗糖硝酸钠培养基）（用于霉菌培养）

蔗糖30g,NaNO32g,K2HPO41g,MgSO4·

7H2O0.5g,KCl0.5g,FeSO4·

7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0～7.2

6.Hayflik培养基（用于支原体培养）

牛心消化液（或浸出液）1000mL,蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂15g,pH7.8～8.0,

分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液（20万单位以上）0.5mL,以上混合后倾注平板.注意:

醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作.

7．麦氏（McCLary）培养基（醋酸钠培养基）

葡萄糖0.1g,KCl0.18g，酵母膏0.25g，醋酸钠0.82g,琼脂l.5g，蒸馏水l00mL。

溶解后分装试管，1l5℃湿热灭菌15min。

8．葡萄糖蛋白胨水培养基（用于V.P．反应和甲基红试验）

蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g，K2HPO40.2g，水100mL,pH7.2,1l5℃湿热灭菌20min。

9．蛋白胨水培养基（用于吲哚试验）

蛋白胨10g,NaCl5g,水1000mL，pH7.2～7.4,121℃湿热灭菌20min。

10．糖发酵培养基（用于细菌糖发酵试验）

蛋白胨0.2g,NaCl0.5g,K2HPO40.02g，水100mL，溴麝香草酚蓝（质量分数1%水溶液）0.3mL，糖类lg。

分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中，调pH至7.4，再加入溴麝香草酚蓝（先用少量质量分数95%乙醇溶解后，再加水配成质量分数1%水溶液），加入糖类，分装试管，装量4～5cm高，并倒放入一杜氏小管（管口向下，管内充满培养液）。

115℃湿热灭菌20min。

灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。

常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等（后两种糖的用量常加大为质量分数1.5%）。

11.RCM培养基（强化梭菌培养基）（用于厌氧菌培养）

酵母膏3g，牛肉膏l0g，蛋白胨10g，可溶性淀粉lg，葡萄糖5g,半胱氨酸盐酸盐0.5g，NaCl3g，NaAc3g,水l000mL,pH8.5，刃天青3mg/L,l2l℃湿热灭菌30min。

12.TYA培养基（用于厌氧菌培养）

葡萄糖40g，牛肉膏2g，酵母膏2g，胰蛋白胨（bacto-typetone）6g，醋酸铵3g,KH2PO40.5g，MgSO4·

7H2O0.2g，FeSO4·

7H2O0.01g，水1000mL,pH6.5,121℃湿热灭菌30min。

13．玉米醪培养基（用于厌氧菌培养）

玉米粉65g，自来水1000mL，混匀，煮10min成糊状，自然pH,121℃湿热灭菌30min。

14．中性红培养基（用于厌氧菌培养）

葡萄糖40g，胰蛋白胨6g，酵母膏2g，牛肉膏2g，醋酸铵3g，KH2PO45g，中性红0.2g,MgSO4·

7H2O0.01g,水1000ml,pH6.2,121℃湿热灭菌30min。

15．CaCO3明胶麦芽汁培养基（用于厌氧菌培养）

麦芽汁（6波美）1000mL，水1000mL，CaCO310g,明胶10g，pH6.8,121℃湿热灭菌30min。

16．BCG牛乳培养基（用于乳酸发酵）

（A）溶液：

脱脂乳粉100g，水500mL，加入质量分数1.6%溴甲酚绿（B.C.G）乙醇溶液1mL，80℃灭菌20min。

（B）溶液：

酵母膏10g，水500mL，琼脂20g,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。

以无菌操作趁热将（A）、（B）溶液混合均匀后倒平板。

17．乳酸菌培养基（用于乳酸发酵）

牛肉膏5g，酵母膏5g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，乳糖5g,NaCl5g，水1000mL,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。

18．酒精发酵培养基（用于酒精发酵）

蔗糖10g,MgSO4·

7H2O0.5g,NH4NO30.5g,质量分数20%豆芽汁2mL,KH2PO40.5g，水100mL，自然pH。

19.柯索夫培养基（用于钩端螺旋体培养）

优质蛋白胨0.4g,NaCl0.7g,KCl0.02g,NaHCO30.01g，CaCl0.02g,KH2PO40.09g,NaH2PO40.48g,蒸馏水500mL，无菌兔血清40mL。

制法：

除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调pH至7.2,121℃湿热灭菌20min，待冷却后，加入无菌兔血清，制成8%血清溶液，然后分装试管（5～10mL/管）,56℃水浴灭活lh后备用。

20．豆芽汁培养基

黄豆芽500g，加水1000mL，煮沸lh，过滤后补足水分，121℃湿热灭菌后存放备用，此即质量分数为50%的豆芽汁，

用于细菌培养：

质量分数10%豆芽汁200mL，葡萄糖（或蔗糖）50g，水800mL,pH7.2～7.4。

用于霉菌或酵母菌培养：

质量分数10%豆芽汁200mL，糖50g，水800mL，自然pH。

霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

21．LB（Luria—Bertani）培养基（细菌培养，常在分子生物学中应用）

双蒸馏水950mL，胰蛋白胨l0g,NaCll0g，酵母提取物（bacto-yeastextract）5g，用lmol/LNaOH（约lmL）调节pH值至7.0，加双蒸馏水至总体积为1L，121℃湿热灭菌30min。

含氨苄青霉素LB培养基:

待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素，至终浓度为80～100mg/L。

22．复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）（用于水体中大肠菌群测定）

蛋白胨10g，牛肉浸膏5g，酵母浸膏5g，琼脂20g，乳糖10g,K2HPO40.5g，无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红乙醇溶液20mL，蒸馏水1000mL。

制作过程：

先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中，加热溶解，再加入K2PO4，溶解后补充水至l000mL，调pH至7.2～7.4。

随后加入乳糖，混匀溶解后，于115℃湿热灭菌20min。

再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中，用少许无菌水使其溶解，在水浴中煮沸10min后，立即滴加于20mL质量分数5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色转变为淡粉红色为止。

将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中，混匀后立即倒平板，待凝固后存放冰箱备用，若颜色由淡红变为深红，则不能再用。

23．乳糖蛋白胨半固体培养基（用于水体中大肠菌群测定）

蛋白胨10g，牛肉浸膏5g，酵母膏5g，乳糖10g，琼脂5g，蒸馏水1000mL，pH7.2～7.4，分装试管（l0mL/管）,115℃湿热灭菌20min。

24．乳糖蛋白胨培养液（用于多管发酵法检测水体中大肠菌群）

蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳糖5g，NaCl5g，蒸馏水l000mL，质量分数1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。

调pH至7.2，分装试管（l0mL/管），并放入倒置杜氏小管，l15℃湿热灭菌20min。

25．三倍浓乳糖蛋白胨培养液（用于水体中大肠菌群测定）

将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中，制法同上，分装于放有倒置杜氏小管的试管中，每管5mL，1l5℃湿热灭菌20min。

26．伊红美蓝培养基（EMB培养基）（用于水体中大肠菌群测定和细菌转导）

蛋白胨l0g,乳糖10g,K2HPO42g，琼脂25g,质量分数2%/伊红Y（曙红）水溶液20mL,质量分数0.5%美蓝（亚甲蓝）水溶液l3mL，pH7.4。

先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4和琼脂混匀，加热溶解后，调pH至7.4,1l5℃湿热灭菌20min，然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液，充分混匀，防止产生气泡。

待培养基冷却到50℃左右倒平皿。

如培养基太热会产生过多的凝集水，可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。

在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖，其余成分不变。

27．加倍肉汤培养基（用于细菌转导）

牛肉膏6g，蛋白胨20g,NaCL10g，水1000mL,pH7.4～7.6。

28．半固体素琼脂（用于细菌转导）

琼脂1g，水100mL,121℃湿热灭菌30min。

29．豆饼斜面培养基（用于产蛋白酶霉菌菌株筛选）

豆饼100g加水5～6倍，煮出滤汁100mL，汁内加入KH2PO4质量分数为0.1%,MgSO4质量分数为0.05%,（NH4）2SO4质量分数为0.05%，可溶性淀粉质量分数为2%,pH6，琼脂质量分数为2%～2.5%。

30．酪素培养基（用于蛋白酶菌株筛选）分别配制A液和B液。

A液：

称取Na2HPO4·

7H2O1.07g。

干酪素4g，加适量蒸馏水，并加热溶解。

B液：

称取KH2PO40.36g，加水溶解。

A、B液混合后，加入酪素水解液0.3mL,加琼脂20g，最后用蒸馏水定容至1000mL。

酪素水解液的配制：

1g酪蛋白溶于碱性缓冲液中，加入质量分数1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL加水至100mL,30℃水解lh。

用于配制培养基时，其用量为1000mL培养基中加入100mL以上水解液。

31．细菌基本培养基（用于筛选营养缺陷型）

Na2HPO4·

7H2O1g，MgSO4·

7H2O0.2g,葡萄糖5g,NaCl5g,K2HPO4lg，水l000mL,pH7.0,1l5℃湿热灭菌30min。

32.YEPD培养基（用于酵母原生质体融合）

酵母粉10g,蛋白胨20g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL,pH6.0，115℃湿热灭菌20min。

33.YEPD高渗培养基（用于酵母原生质体融合）

在YEPD培养基中加入0.6mol/L的NaCL，质量分数3%琼脂。

34.YNB基本培养基（用于酵母原生质体融合）

质量分数0.67%酵母氮碱基（YNB,不含氨基酸，Difco）,质量分数2%葡萄糖，质量分数3%琼脂，pH6.2。

另一配方为：

葡萄糖10g（NH4）2SO41g，K2HPO40.125g，KHPO40.875g,KI0.0001g，MgSO4·

7H2O0.5g,CaCl2·

2H2O0.lg,NaCl0.1g，维量元素母液lmL,维生素母液lmL（母液均按常规配制），水1000mL,pH5.8～6.0。

35.YNB高渗基本培养基（用于原生质体融合）

在YNB基本培养基中加入0.6mol/LNaCl。

36．酚红半固体柱状培养基（用于检查氧和菌生长的关系）

蛋白胨1g，葡萄糖10g,玉米浆10g，琼脂7g,水1000mL，pH7.2。

在调好pH后，加入质量分数1.6%酚红溶液数滴，至培养基变为深红色，分装于大试管中，装量约为试管高度的1/2，1l5℃灭菌20min。

细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸，使酚红从红色变成黄色，在不同部位生长的细菌，可使培养基的相应部位颜色改变。

但注意培养时间太长，酸可扩散以致不能正确判断结果。

以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态，只需改变琼脂用量即可，前者质量分数为1.5%～2.0%，后者质量分数为0.3%～0.8%。