实验8-植物可溶性糖的测定.ppt

实验8-植物可溶性糖的测定.ppt

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实验八实验八植物可溶性植物可溶性糖的糖的测定测定实验原理n糖在糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用生成绿色络合物，颜色与蒽酮作用生成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关，在的深浅与糖含量有关，在625nm波波长下长下OD值与糖含量成正比，由于值与糖含量成正比，由于蒽蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化变化，故必须在反应后立即在同一，故必须在反应后立即在同一时间内比色。

时间内比色。

实验材料实验材料n小麦干种子n小麦萌发种子n萝卜干种子n萝卜萌发种子均为市售，萌发条件为25下黑暗萌发3天。

实验步骤n1可溶性糖的提取：

可溶性糖的提取：

分别取分别取2粒干种子和萌发种子于研粒干种子和萌发种子于研钵中，加钵中，加80%乙醇少许，磨成匀浆，倒乙醇少许，磨成匀浆，倒入大试管中，入大试管中，再用再用80%乙醇洗涤，水浴乙醇洗涤，水浴80半小时，冷却后转移至半小时，冷却后转移至10ml量筒，量筒，并用并用80%乙醇定容至乙醇定容至10ml。

过滤，所得。

过滤，所得的透明液体即为可溶性糖提取液。

的透明液体即为可溶性糖提取液。

n2显色及比色：

显色及比色：

吸取上述糖提取液吸取上述糖提取液1ml，加加入入5ml蒽酮试剂，沸水浴蒽酮试剂，沸水浴10min，冷却后于，冷却后于625nm处测处测OD值，从标线取得提取液中糖值，从标线取得提取液中糖的浓度。

的浓度。

n3绘制标准曲线：

绘制标准曲线：

取标准葡萄糖溶液将其取标准葡萄糖溶液将其稀释稀释0、20、40、60、80g/mL系列浓度，系列浓度，按上述方法分别测其按上述方法分别测其OD值，绘制标准曲线。

值，绘制标准曲线。

计算：

nV为植物样品提取液的体积nC为提取液糖的浓度nW为植物样重或为颗粒数n可溶性糖%=CV/Wn同一种子类型之间按每粒种子计算小麦种子小麦种子萝卜种子卜种子干种子干种子萌萌发种子种子干种子干种子萌萌发种子种子可溶性可溶性糖含量糖含量实验结果：

实验结果：

表1不同种子和同一种子萌发前后可溶性糖含量变化注意事项注意事项n1定量实验，且涉及标准曲线绘制，分光光度计的使用，因此溶液配制、材料选取等方面必须精确、仔细，减少误差。

n2实验组、对照组步骤应同步同步，使结论准确。

问题：

问题：

1、应用此法测得的糖具体包括哪几种糖类？

、应用此法测得的糖具体包括哪几种糖类？

2、用此法测定时，什么样的材料需要用活性碳脱色？

、用此法测定时，什么样的材料需要用活性碳脱色？

3、请设计一实验，用本实验获得的、请设计一实验，用本实验获得的同一份同一份提取液在测提取液在测定可溶性糖含量的同时，一并测定蔗糖、葡萄糖和果定可溶性糖含量的同时，一并测定蔗糖、葡萄糖和果糖？

这种测定方法比分别测定有什么优点？

糖？

这种测定方法比分别测定有什么优点？

同同一一份份乙乙醇醇抽抽提提液液蒽酮比色法蒽酮比色法测定可溶性总糖测定可溶性总糖预处理预处理间苯二酚比色法间苯二酚比色法测定蔗糖测定蔗糖不预处理不预处理间苯二酚比色法间苯二酚比色法测定果糖测定果糖葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖测定葡萄糖n利用实验间隙，观看视频材料：

利用实验间隙，观看视频材料：

用用一种一种生物材料设计生物材料设计一组一组生物实验的方法生物实验的方法