生药学实验指导Word下载.docx
《生药学实验指导Word下载.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生药学实验指导Word下载.docx（34页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
3．由于实验时刻有限，实验时应当善于安排自己的工作，注意力应当集中在要紧问题上，不要用过多时刻去钻研细小的次要问题，一时解决不了的次要问题，可留课外时刻去解决o
4．在实验过程中，应当随时注意观看到的现象，测量或称量的数据，运算结果等写在报告纸上，养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好适应。
5．实验进行过程中，必须注意听取教师的指导。
6．实验桌前应随时保持整洁，非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。
7．纸屑、废物应放人污物缸内，不得乱丢地上，污物缸内不得倒入液体。
三、实验完毕时的几点要求:
1．按照教师指定时刻完成实验报告。
2．把实验用仪器、用品等收拾洁净，放在指定位置。
发放给个人保管的可放抽屉或柜内。
3．临时借用物品应及时归还。
4．值日生负责最后清扫实验室卫生，并及时清除污物缸内的废弃物。
5．实验终止后，检查门、窗、水、电，保证无安全隐患后方可离开实验室。
实验一生药中常见化学成分的理化鉴定
（一）
一、实验目的要求：
1．了解化学检出法在药材鉴定中的应用。
2．熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。
3．把握生物碱，羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应。
二、实验要紧材料、仪器及试剂：
马钱子、黄柏（苦参）黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。
水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。
，
碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5％NaOH、HCl、乙醚、氨水。
三、实验内容：
1．显微化学反应法：
（1）将药材的切片或粉未置载玻片上，滴加适当试液，加盖玻片在显微镜下观看产生的颜色或结晶等，作为鉴别特点。
’
①取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片，加l％硫矾酸试剂l滴，镜检，观看结果。
②另取一切片，加浓硝酸l滴，镜检，观看结果。
（2）取药材粗粉加适当试剂浸出，将浸出液滴于载玻片上，滴加适当试剂，加盖玻片，镜检观看反应结果。
取黄连乙醇液1滴，加浓HN031滴，镜检，观看结果。
（3）取药材的切片或粉末滴加适当试剂，直截了当观看皇现的种种颜色作为鉴别特点。
取大黄饮片，加5％NaOHl~2滴，显现什么颜色?
再加稀HCl1~2滴，又显现什么颜色?
2．微量升华法：
是利用药材中所含的某些成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观看其形状，颜色及化学反应，作为鉴别特点。
具体方法：
取金属片，安放在有圆孔（直径约2cm）的石棉板上，金属片上放一小金属圈（高度约0.8cm），对准石棉板上的圆孔，圈内加药材粉末一薄层，圈上放一载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯慢慢加热（火焰距板约4cm）数分钟，至粉末开始变焦，并有气化物发生，去火待冷，则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上，将载玻片取下反转，在显微镜下观看结晶形状，并可加化学试液，观看其变化。
取大黄粉未，进行如上操作，观看反应结果o
3．荧光分析法：
将药材切片或粉末或提取液等，在荧光灯下观看荧光，有些药材不产生荧光，如以酸碱处理或其他化学方法处理后，可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光，以便鉴别。
2
如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液，在紫外灯下观看荧光颜色。
．‘
4．层析法：
‘
分为纸层析、柱层析、薄层层析等（略）。
5．化学定性检查：
药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生专门的颜色、沉淀反应来进行鉴别。
（1）生物碱的检出：
沉淀反应取黄连，马钱子，黄柏（苦参）粉未各2g，分别盛入锥形瓶中，各加水l5ml，浓HClO．5ml，60℃水浴上温浸30分钟，时时振摇，取滤液备用。
．
各取2ml滤液于试管中，分别加下列试液2—3滴，观看有何现象？
碘化铋钾试液
碘化汞钾试液
碘一碘化钾试液
黄连
马钱子
黄柏（苦参）
（2）羟基功醌的检出：
Bomtrǎger反应取大黄粉未0.2g，置试管中加入5％NaOH试液4ml，在小火上煮沸，取滤液加HCl呈酸性后，再加乙醚5ml，振摇，分取醚层，于醚层中加入等量氨试液，振摇，观看反应现象。
四、作业：
简要记录各反应的实验步骤和结果。
五、摸索题：
1．显微化学反应法有几种操作方法?
2．微量升华法用于生药鉴别有何特点?
3．含何类成分的生药常会产生荧光?
4．生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?
Bornträ
ger反应过程的原理是什么?
实验二生药中常见化学成分的理化鉴定
（二）
．
把握香豆精类，强心苷类、皂苷类、鞣质类、氰苷类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。
秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地黄叶、黄芩（槐米
水浴锅蒸发皿锥形瓶
盐酸羟胺甲醇液、l0％氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、盐酸、l％三氯化铁乙醇液、2％红血球悬浮液、1％盐酸奎宁试液、明胶液、铁铵矾试液、三氯化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。
1．化学定性检查
3
（1）香豆精类的检出：
异羟肟酸铁反应取秦皮粗粉0.2g，置具塞试管中，加乙醚3ml，浸渍5~10分钟，时加振摇，放置，吸取上清液（或滤过）于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液2~3滴，l0％氢氧化钾甲醇溶液2~3滴，水浴温热1~2分钟，冷后加l0％盐酸，使pH为3~4，再加l％三氯化铁乙醇溶液1~2滴，两液混合面或溶液应显什么颜色?
（2）强心苷的检出：
三氯化铁一冰醋酸反应取洋地黄叶粉末0.5g，加水5ml，水浴加热20分钟，滤液加3mlCHCl3，振摇萃取后，再加乙醚3ml，待分层，用吸管吸取取下层，将CHCl3层转于蒸发皿中蒸干，放冷，加冰醋酸lml使残渣溶解，移人试管中，加三氯化铁溶液1滴，并沿管壁慢慢注入浓H2S04l5~20滴，观看上层液及界面的颜色变化。
（3）皂苷的检出：
①泡沫反应取桔梗粉末0.2g，加水5ml，加热煮沸，过滤，滤液在试管中强烈振摇，注意是否产生大量持久性泡沫。
②溶血试验取穿山龙的l％生理盐水溶液lml和l％生理盐水lml，分别置试管中，各加2％红血球悬浮液0.3ml，摇匀后放置，注意观看哪支试管溶液变清而透亮。
（示溶血现象）
（4）鞣质的检出：
显色及沉淀反应取五倍子，儿茶粉末各0.5g，分别置于锥形瓶中，加25ml水，水浴加热，过滤备用。
各取滤液2ml，分别加下列试剂，观看反应现象。
1％盐酸奎宁试液
明胶液
铁铵矾试液、
五倍子
儿茶
（5）氰苷类的检出：
苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎，用水潮湿置试管中，试管中悬挂用NaHC03饱和溶液潮湿的苦味酸试纸一条，用软木塞塞紧，置40—50○C水浴中，观看试纸颜色变化。
（6）黄酮苷的检出：
盐酸镁粉反应取黄芩（槐米）粉末约0.2g，加乙醇5ml，水浴温热约5分钟，滤过，取滤液2ml，加镁粉少量，混匀，滴加盐酸数滴，注意有气泡产生，同时观看出现什么颜色。
1、香豆精苷，强心苷，氰苷，黄酮苷及鞣质的反应机理是什么？
2、黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色?
如不显红色是否能够否定黄酮成分的存在?
4
实验三根类生药
黄芪RabixAstragali
一、实验目的：
l、把握黄芪生药性状。
2、把握黄芪横切面组织特点和粉末显微特点。
二、实验要紧仪器及试剂：
显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液。
三、实验材料：
蒙古黄芪AstragalismembranaceusBgc．Var．mongholieus（Bgc．）Hsiao原植物标本、生物、组织横切片及粉末。
四、实验内容及步骤：
l、观看蒙古黄芪的原植物标本，注意其属于豆科植物的形状特点。
2、性状鉴定观看黄芪生药，注意其表面色泽，皮孔形状，栓皮有无剥落；
折断面是否呈纤维状，横断面形成层环是否明显?
观看皮部与木部的色泽，尝味。
3、显微鉴定
（1）镜检黄芪根的横切片，自外至内观看其组织特点?
①木栓层为数列木细胞。
②栓内层由数列薄壁细胞组成。
③韧皮部纤维群与筛管群交互排列，射线弯曲。
④形成层成环，束内形成层明显。
⑤木质部导管单个散在或2~3个相聚，直径l8~l60微米，木纤维成束，木薄壁细胞少数壁稍厚，具多数单纹孔；
木射线发达。
（2）镜检黄芪粉末，分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片，注意以下特点：
①纤维众多，成束，细长，直径9~36μｍ，壁厚，非木化，孔沟不明显。
另取黄芪生药，刮取少量纤维（粉末），透化后装片，注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。
②导管主为具缘纹孔导管，纹孔呈椭圆形，类方类或斜方形。
③木栓细胞表面观呈多角形或类方形。
④淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形，直径3~13μｍ，复粒由2~4分粒组成。
五、作业：
1、绘黄芪横切面组织简图。
2、绘黄芪粉末特点图，示纤维，导管，木栓细胞与淀粉粒。
六、摸索题：
l、黄芪什么缘故不易折断?
2、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末?
5
实验四根类生药
甘草RadixClycyrrbizae
l、把握甘草生药性状特点。
2、把握甘草根横切面组织和粉末显微特点。
显微镜、临时装片用具、白瓷板、蒸发皿、蒸馏水、水合氯醛试液、80％硫酸。
甘草clycyrrbizauralensisFisch.原植物标本、生药、饮片、组织横切片和粉末。
l、观看甘草植物腊叶标本，注意根茎和根的形状，复叶上的小叶数和花序或果实形状等。
2、性状鉴定观看甘草生药，注意其表面色泽，有无纵皱及横向皮孔？
断面色泽与特点、质地如何?
将它折断，有无粉尘飞扬?
尝味。
3、显微鉴定
（1）镜检甘草根横切片，自外向内观看其组织特点：
①木栓层数列至20~30列木栓细胞，红棕色，排列整齐。
②皮层较窄，为数列薄壁细胞，有纤维群散在。
③韧皮部韧皮纤维与韧皮薄壁细胞及筛管群相问排列，靠外方的筛管组织常被挤压而颓废成条状；
韧皮纤维壁厚，微木化，其周围薄壁细胞中多含草酸钙方晶；
韧皮射线广，多弯曲；
常有裂隙。
④形成层束内形成层明显，为数列扁平细胞，束间形成层不明显o
⑤木质部导管较大，直径约至l6μｍ，常单个或2~3个相聚；
木纤雏多成群，其周围薄壁细胞中也含草酸钙方晶；
木射线较平直，宽3~5列细胞。
⑥髓部根中心无髓。
根茎中心有髓。
髓由薄壁细胞组成，．近木质部处偶见有些细胞含红棕色物质。
⑦薄壁细胞中含众多细小的淀粉粒。
（2）镜检甘草粉末分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片，注意以下特点：
①纤维众多，成束或散离，细长，直径6~14μｍ，壁厚，木化或非木化，孔沟不明显；
晶鞘纤维易察见，草酸钙方晶类双锥形，长方形或类方形，含晶细胞的壁增厚，微木化或非木化。
②导管主为具缘纹孔导管，多破裂，纹孔椭圆形或略呈斜方形，对列或互列，有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。
③木栓细胞棕红色，壁薄，微木化，表面观呈多角形。
④淀粉粒众多，单粒椭圆形、卵形或类球形，直径3~16μｍ，脐点点状或短缝状。
复粒稀少，由2分粒组成。
此外，尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。
6
1、绘甘草横切面组织简图。
2、绘甘草粉末显微特点图，示晶纤维，具缘纹孔导管，木栓细胞和淀粉粒。
l、甘草的组织构造中，有哪些较显著的鉴别特点?
2、什么是晶鞘纤维?
实验五根类生药
百部RadixStemonae
l、把握百部生药性状特点。
2、把握直立百部根的组织特点，并了解其与蔓生百部根和对叶百部根的鉴别。
显微镜、临时装片用具、水合氯醛试液、间苯三酚、浓盐酸。
直立百部Stmonasessilifolia（Mig．）Miq．蔓生百部S·
japanica（B1．）Miq．对叶百部S．tuberosaLour．三种百部的原植物标本、生药及其组织横切片。
l、观看三种百部的植物标本，从叶序、叶柄的长短、叶脉、花的着生等方面比较其异同点。
2、性状鉴定观看百部生药形状，外表皱缩情形、色泽及质地；
注意直立百部及蔓生百部的根较小而干、空、质轻；
对叶百部根较粗大，角质而坚实。
（1）观看直立百部根的横切片，注意下列组织特点：
①根被3~4列多角形细胞，外侧细胞常破裂，壁木栓化及木化，具致密交错的细条纹。
②皮层宽广，约占半径的2／3，外皮层为一列排整齐、切向延长的细胞，内皮层明显，有时可见凯氏点。
③中柱鞘l~2列薄壁细胞组成。
④维管束辐射型，韧皮部束与木质部束相间排列，各l9~23个，韧皮部束内侧有单个或2~3个相聚的非木化纤维，木质部导管偶成2轮排列。
⑤髓薄壁细胞组成，散有单个或2~3个相聚的非木化纤维。
7
（2）镜检对叶百部根横切片注意其与直立百部根横切面特点的要紧区别；
根被约为3列细胞，壁木化，无细条纹，最内层细胞的内壁特厚；
皮层外缘散有纤维，壁微木化；
韧皮部束和木质部束36~40个，木质部束的木化纤维及木化薄壁细胞连接成环。
髓部纤维少，常单个散在o
（3）镜检蔓生百部根横切片，注意其与直立百部根横切面特点的要紧区别：
根被细胞2~6列，无角质条纹，韧皮部纤维木化；
导管较大，并深入分布于髓部，大多呈2~3轮排列。
l、绘直立百部根横切面组织简图。
2、绘直立百部根的根被细胞，示角质条纹。
试列直立百部、蔓生百部与对叶百部的生药性状检索表及组织构造检索表。
实验六根茎类生药
黄连RhizomaCoptidis
l、把握黄连的生药性状特点。
2、把握黄连根茎横切面组织特点与粉末显微待征。
3、了解其它根及根茎类中药的性状特点
显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。
黄连CoptischinensisFranch．原植物标本、生药（味连）组织切片及粉末。
1、性状鉴定观看味连性状味连根茎多簇状分枝，有时弯曲，形如倒鸡爪。
分枝类圆柱状，长3~7cm直径0.3~0.9cm。
表面黄棕色或灰黄色，粗糙，有不规则结节状隆起，上有较密的环纹，着生须根或须根残基，并有鳞叶，顶端常有残留的茎基和叶柄基，根茎中段的节间有时较细，表面光滑，习称“过桥’’，长l~4参谋。
质硬，折断面不平坦；
横断面可见皮部棕红色或暗棕色，木部鲜黄色或橙黄色，具放射状统纹理。
髓部红棕色，有时中空，气微，味极苦。
2、显微鉴定
（1）镜检黄连根茎横切面组织切片自外向内观看其要紧组织特点：
8
①木栓层为数列扁平细胞，壁薄，其外有时可见鳞叶的横切面组织，由上下表皮及多角形薄壁细胞组成。
②皮层较宽，薄壁组织中有石细胞，单个或成群散在。
常可见根迹维管束和叶迹维管束。
③维管束外韧型，韧皮部较狭窄，外侧有中柱鞘纤维束，约由l0~20个纤维组成，或伴有少数石细胞；
形成层细胞扁平，束问形成层不明显；
木质部由导管、管胞、木纤维、木薄壁细胞组成，木纤维较发达。
④髓部由薄壁细胞组成．，无石细胞。
注：
三角黄连C．deltoideaC。
Y．ChengetHsiao的根茎（雅连）髓部有石细胞。
云连C．jteetoidesC.Y．Cheng的根茎皮部、髓部均无石细胞。
⑤薄壁细胞均含淀粉粒。
（2）取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片，镜检下列特点：
①石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形，有时稍延长，长径25~75μm，孔沟及纹孔明显。
②韧皮纤维鲜黄色，纺锤形或长梭形，直径：
20~40μm，壁较厚，纹孔少。
③木纤维众多，常成束，鲜黄色，直径l5~35μm，壁具裂隙状纹孔。
④导管多为孔纹导管，也有具缘纹孔，网纹及螺纹导管。
⑤鳞叶表皮细胞类方形或长方形，壁薄曩垂厨壁微波状。
⑥淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形，直径l~l0μｍ，复粒少，由2~4分粒组成。
l、描述记载黄连根茎性状。
2、绘黄连根横切面简图。
3、绘黄连粉末显微特点图，示石细胞、韧皮纤维、木纤维、导管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。
l、如何从性状与组织上鉴别“味连”、“雅连”和“云连”?
实验七根茎类生药
大黄RhizomoRhei
l、把握大黄的生药性状特点。
2、把握大黄横切面组织特点与粉末显微特点。
显微镜、临时装片用具、蒸馏水水合氯醛试液。
9
大黄RheumPalmatumL.原植物标本、生药饮片、组织横切片及粉末。
l、性状鉴定取大黄标本，从形状、表面特点、断面特点、气味等方面描述大黄性状特点。
2、显微鉴定
（1）镜检大黄根茎横切面组织切片，自外向内观看其要紧组织特点：
①木栓层与皮层多已除去，偶残存。
②韧皮部射线l~4列细胞，内含棕色物。
③形成层环状。
④木质部导管径向稀疏排列。
⑤髓宽广，散有多数异型维管束（星点），系复合维管束，由多个外木式维管束组成，形成层类圆形，射线呈星芒状射出。
（2）取大黄粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片，镜检下列特点：
①草酸钙簇晶大而多，棱角大多短钝。
，。
②导管主为网纹导管，并有具缘纹孔及细小螺纹导管，直径约至140μm，非木化。
③淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形，脐点大多呈星状，复粒由2~7个分粒组成。
3、观看所示标本的性状特点。
l、描述大黄性状特点。
2、绘大黄根茎横切面简图。
3、绘大黄粉末显微特点图，示草酸钙簇晶、导管、淀粉粒。
实验八根茎类生药
半夏RhizomaPinelliae
l、把握半夏的生药性状特点。
2、把握半夏粉末显微特点。
显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。
半夏Pinelliaternata（Thunb．）Breit.原植物标本、生药、饮片、粉末。
10
．
1、性状鉴定取半夏块茎，从形状、表面、质地、断面、气味等方面描述半夏性状特点。
取半夏粉末先后以蒸馏水及水合氯醛试液装片，镜检下列特点：
①淀粉粒单粒类圆形、半圆形或圆多角形，直径2—20μｍ，脐点裂缝状，人字状或星状；
复粒由2—6分粒组成。
②草酸钙针晶成束存在于椭圆形粘液细胞中或随处散在，针晶长20~ll0μm。
③螺纹导管直径10~24μmo‘
3、观看所示标本的性状特点。
l、描述半夏性状特点。
2、绘半夏粉末显微特点图，示淀粉粒，草酸钙针晶束，导管。
实验九茎木类生药
关木通CaulisAristolocbiaeManshuriensis
l、把握关木通的生药性状。
2、熟悉关木通茎的组织及粉末特点。
东北马兜铃AristolochiamanshuriensisKom．生药、组织横切片及粉末。
l、性状鉴定
观看关木通生药，注意茎呈圆柱形，稍弯曲。
表面灰黄或淡棕色，节明显，稍膨大。
节间有浅纵沟及浅棕色残余的斑块状木栓。
体轻质坚，不易折断，触之稍有弹性。
横切面黄白色，皮部薄，木部占切面的绝大部分，密布导管小孔，与浅色射线排列呈蛛网状，髓部不明显，味苦。
2、显微鉴定
（1）镜检关木通茎横切片，自外向内观看下列特点：
①木栓组织多已刮去，仅残存数列扁平的木栓细胞。
②栓内层为十余列扁平薄壁细胞。
③中柱鞘众多纤维成群，切向排列于韧皮部外，常呈新月形，纤维群中有少数石细胞散在。
④维管束外韧型，约为l2个。
韧皮部狭窄，颓废筛管和韧皮薄壁细胞相间
层状排列，形成层明显成玮，木质部中导管口径大，多单个散在，切向整齐排列
11
成环，木薄壁细胞稀少。
初生射线宽而长，次生射线窄而短。
⑤髓狭小，条状，细胞多颓废。
⑥薄壁细胞含有草酸钙簇晶和淀粉粒。
（2）取关木通粉末少量，分别以蒸馏水和水合氯醛试液透化装片，镜检下列特点：
①导管庞大，多破裂，具缘纹孔排列紧密，孔径可达l3pm。
②木纤维要紧为纤维管胞，多成束，单个纤维长梭状，有明显的具缘纹孔。
③韧皮纤维长梭形，壁较厚，有斜纹孔。
④石细胞较少，类方形或类长方形，壁较厚。
此外，尚有傍管木薄壁细胞和木栓细胞，以及淀粉粒、
升级会员 