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生药学实验指导Word下载.docx

1、 3由于实验时刻有限,实验时应当善于安排自己的工作,注意力应当集中在要紧问题上,不要用过多时刻去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可留课外时刻去解决o 4在实验过程中,应当随时注意观看到的现象,测量或称量的数据,运算结果等写在报告纸上,养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好适应。 5实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。 6实验桌前应随时保持整洁,非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。 7纸屑、废物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污物缸内不得倒入液体。三、实验完毕时的几点要求: 1按照教师指定时刻完成实验报告。 2把实验用仪器、用品等收拾洁净,放在指定位置。发放给个

2、人保管的可放抽屉或柜内。 3临时借用物品应及时归还。4值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污物缸内的废弃物。5实验终止后,检查门、窗、水、电,保证无安全隐患后方可离开实验室。实验一 生药中常见化学成分的理化鉴定(一)一、实验目的要求:1了解化学检出法在药材鉴定中的应用。2熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。3把握生物碱,羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应。二、实验要紧材料、仪器及试剂: 马钱子、黄柏(苦参)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。 水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。 , 碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5NaOH、HCl、乙醚、氨水。三、实验

3、内容:1显微化学反应法:(1)将药材的切片或粉未置载玻片上,滴加适当试液,加盖玻片在显微镜下观看产生的颜色或结晶等,作为鉴别特点。 取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片,加l硫矾酸试剂l滴,镜检,观看结果。 另取一切片,加浓硝酸l滴,镜检,观看结果。(2)取药材粗粉加适当试剂浸出,将浸出液滴于载玻片上,滴加适当试剂,加盖玻片,镜检观看反应结果。取黄连乙醇液1滴,加浓HN03 1滴,镜检,观看结果。(3)取药材的切片或粉末滴加适当试剂,直截了当观看皇现的种种颜色作为鉴别特点。取大黄饮片,加5NaOH l2滴,显现什么颜色?再加稀HCl 12滴,又显现什么颜色? 2微量升华法:是利用药材中所含的某些成

4、分,在一定温度下能升华的性质,获得升华物,在显微镜下观看其形状,颜色及化学反应,作为鉴别特点。具体方法:取金属片,安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上,金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm),对准石棉板上的圆孔,圈内加药材粉末一薄层,圈上放一载玻片,在石棉板下圆孔处用酒精灯慢慢加热(火焰距板约4cm)数分钟,至粉末开始变焦,并有气化物发生,去火待冷,则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上,将载玻片取下反转,在显微镜下观看结晶形状,并可加化学试液,观看其变化。 取大黄粉未,进行如上操作,观看反应结果o 3荧光分析法: 将药材切片或粉末或提取液等,在荧光灯下观看荧光,有些药材不产生荧光,如以酸碱处

5、理或其他化学方法处理后,可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光,以便鉴别。 2如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液,在紫外灯下观看荧光颜色。 4层析法: 分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。 5化学定性检查:药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生专门的颜色、沉淀反应来进行鉴别。 (1)生物碱的检出:沉淀反应 取黄连,马钱子,黄柏(苦参)粉未各2g,分别盛入锥形瓶中,各加水l 5ml,浓HCl O5ml,60水浴上温浸30分钟,时时振摇,取滤液备用。 各取2ml滤液于试管中,分别加下列试液23滴,观看有何现象?碘化铋钾试液碘化汞钾试液碘一碘化钾试液黄连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功醌的检出:Bo

6、mtrger反应 取大黄粉未0.2g,置试管中加入5NaOH试液4ml,在小火上煮沸,取滤液加HCl呈酸性后,再加乙醚5ml,振摇,分取醚层,于醚层中加入等量氨试液,振摇,观看反应现象。四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。五、摸索题:1显微化学反应法有几种操作方法?2微量升华法用于生药鉴别有何特点?3含何类成分的生药常会产生荧光?4生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?Borntrger反应过程的原理是什么?实验二 生药中常见化学成分的理化鉴定(二) 把握香豆精类,强心苷类、皂苷类、鞣质类、氰苷类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地黄叶、黄芩(槐米水浴锅

7、 蒸发皿锥形瓶盐酸羟胺甲醇液、l0氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、盐酸、l三氯化铁乙醇液、2红血球悬浮液、1盐酸奎宁试液、明胶液、铁铵矾试液、三氯化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。1化学定性检查3(1)香豆精类的检出:异羟肟酸铁反应 取秦皮粗粉0.2g,置具塞试管中,加乙醚3ml,浸渍510分钟,时加振摇,放置,吸取上清液(或滤过)于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液23滴,l 0氢氧化钾甲醇溶液23滴,水浴温热12分钟,冷后加l 0盐酸,使pH为34,再加l三氯化铁乙醇溶液12 滴,两液混合面或溶液应显什么颜色?(2)强心苷的检出:三氯化铁一冰醋酸反应 取洋地黄叶粉末0.5g,加水5ml,水浴加热2

8、0分钟,滤液加3mlCHCl3,振摇萃取后,再加乙醚3ml,待分层,用吸管吸取取下层,将CHCl3层转于蒸发皿中蒸干,放冷,加冰醋酸lml使残渣溶解,移人试管中,加三氯化铁溶液1滴,并沿管壁慢慢注入浓H2S04 l520滴,观看上层液及界面的颜色变化。(3)皂苷的检出: 泡沫反应 取桔梗粉末0.2g,加水5ml,加热煮沸,过滤,滤液在试管中强烈振摇,注意是否产生大量持久性泡沫。 溶血试验 取穿山龙的l生理盐水溶液lml和l生理盐水lml,分别置试管中,各加2红血球悬浮液0.3ml,摇匀后放置,注意观看哪支试管溶液变清而透亮。(示溶血现象)(4)鞣质的检出: 显色及沉淀反应 取五倍子,儿茶粉末各

9、0.5g,分别置于锥形瓶中,加25ml水,水浴加热,过滤备用。各取滤液2ml,分别加下列试剂,观看反应现象。1盐酸奎宁试液明胶液铁铵矾试液、五倍子儿茶 (5)氰苷类的检出: 苦味酸钠反应 取苦杏仁一粒捣碎,用水潮湿置试管中,试管中悬挂用NaHC03饱和溶液潮湿的苦味酸试纸一条,用软木塞塞紧,置4050C水浴中,观看试纸颜色变化。 (6)黄酮苷的检出: 盐酸镁粉反应 取黄芩(槐米)粉末约0.2g,加乙醇5ml,水浴温热约5分钟,滤过,取滤液2ml,加镁粉少量,混匀,滴加盐酸数滴,注意有气泡产生,同时观看出现什么颜色。1、香豆精苷,强心苷,氰苷,黄酮苷及鞣质的反应机理是什么?2、黄酮类成分遇盐酸一

10、镁粉是否都显红色?如不显红色是否能够否定黄酮成分的存在?4实验三 根类生药黄芪 Rabix Astragali一、实验目的:l、把握黄芪生药性状。2、把握黄芪横切面组织特点和粉末显微特点。二、实验要紧仪器及试剂: 显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液。三、实验材料: 蒙古黄芪 Astragalis membranaceus BgcVarmongholieus(Bgc)Hsiao原植物标本、生物、组织横切片及粉末。四、实验内容及步骤: l、观看蒙古黄芪的原植物标本,注意其属于豆科植物的形状特点。 2、性状鉴定 观看黄芪生药,注意其表面色泽,皮孔形状,栓皮有无剥落;折断面是否呈纤维状,横断面

11、形成层环是否明显?观看皮部与木部的色泽,尝味。 3、显微鉴定(1)镜检黄芪根的横切片,自外至内观看其组织特点? 木栓层 为数列木细胞。 栓内层 由数列薄壁细胞组成。 韧皮部 纤维群与筛管群交互排列,射线弯曲。 形成层 成环,束内形成层明显。 木质部 导管单个散在或23个相聚,直径l8l60微米,木纤维成束,木薄壁细胞少数壁稍厚,具多数单纹孔;木射线发达。 (2)镜检黄芪粉末,分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特点: 纤维 众多,成束,细长,直径936,壁厚,非木化,孔沟不明显。另取黄芪生药,刮取少量纤维(粉末),透化后装片,注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。 导管 主为具缘纹孔导管,纹孔呈椭

12、圆形,类方类或斜方形。 木栓细胞表面观呈多角形或类方形。 淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形,直径313,复粒由24分粒组成。五、作业: 1、绘黄芪横切面组织简图。 2、绘黄芪粉末特点图,示纤维,导管,木栓细胞与淀粉粒。六、摸索题: l、黄芪什么缘故不易折断? 2、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末? 5实验四 根类生药甘草 Radix Clycyrrbizael、把握甘草生药性状特点。2、把握甘草根横切面组织和粉末显微特点。 显微镜、临时装片用具、白瓷板、蒸发皿、蒸馏水、水合氯醛试液、80硫酸。甘草clycyrrbiza uralensis Fisch.原植物标本、生药、饮片、组织横切片和粉

13、末。l、观看甘草植物腊叶标本,注意根茎和根的形状,复叶上的小叶数和花序或果实形状等。2、性状鉴定 观看甘草生药,注意其表面色泽,有无纵皱及横向皮孔?断面色泽与特点、质地如何?将它折断,有无粉尘飞扬?尝味。3、显微鉴定 (1)镜检甘草根横切片,自外向内观看其组织特点: 木栓层 数列至2030列木栓细胞,红棕色,排列整齐。 皮层 较窄,为数列薄壁细胞,有纤维群散在。 韧皮部 韧皮纤维与韧皮薄壁细胞及筛管群相问排列,靠外方的筛管组织常被挤压而颓废成条状;韧皮纤维壁厚,微木化,其周围薄壁细胞中多含草酸钙方晶;韧皮射线广,多弯曲;常有裂隙。 形成层 束内形成层明显,为数列扁平细胞,束间形成层不明显o 木

14、质部 导管较大,直径约至l 6,常单个或23个相聚;木纤雏多成群,其周围薄壁细胞中也含草酸钙方晶;木射线较平直,宽35列细胞。 髓部 根中心无髓。根茎中心有髓。髓由薄壁细胞组成,近木质部处偶见有些细胞含红棕色物质。 薄壁细胞中含众多细小的淀粉粒。 (2)镜检甘草粉末 分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特点: 纤维 众多,成束或散离,细长,直径614,壁厚,木化或非木化,孔沟不明显;晶鞘纤维易察见,草酸钙方晶类双锥形,长方形或类方形,含晶细胞的壁增厚,微木化或非木化。 导管 主为具缘纹孔导管,多破裂,纹孔椭圆形或略呈斜方形,对列或互列,有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。 木栓细胞棕红色,壁薄

15、,微木化,表面观呈多角形。 淀粉粒众多,单粒椭圆形、卵形或类球形,直径316,脐点点状或短缝状。复粒稀少,由2分粒组成。此外,尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。 61、绘甘草横切面组织简图。2、绘甘草粉末显微特点图,示晶纤维,具缘纹孔导管,木栓细胞和淀粉粒。l、甘草的组织构造中,有哪些较显著的鉴别特点?2、什么是晶鞘纤维?实验五 根类生药百部 Radix Stemonael、把握百部生药性状特点。2、把握直立百部根的组织特点,并了解其与蔓生百部根和对叶百部根的鉴别。显微镜、临时装片用具、水合氯醛试液、间苯三酚、浓盐酸。 直立百部 Stmona sessilifolia(Mig)Miq蔓生百部S

16、japanica(B1)Miq对叶百部Stuberosa Lour三种百部的原植物标本、生药及其组织横切片。l、观看三种百部的植物标本,从叶序、叶柄的长短、叶脉、花的着生等方面比较其异同点。2、性状鉴定观看百部生药形状,外表皱缩情形、色泽及质地;注意直立百部及蔓生百部的根较小而干、空、质轻;对叶百部根较粗大,角质而坚实。 (1)观看直立百部根的横切片,注意下列组织特点: 根被 34列多角形细胞,外侧细胞常破裂,壁木栓化及木化,具致密交错的细条纹。 皮层 宽广,约占半径的23,外皮层为一列排整齐、切向延长的细胞,内皮层明显,有时可见凯氏点。 中柱鞘 l2列薄壁细胞组成。 维管束 辐射型,韧皮部束

17、与木质部束相间排列,各l923个,韧皮部束内侧有单个或23个相聚的非木化纤维,木质部导管偶成2轮排列。 髓 薄壁细胞组成,散有单个或23个相聚的非木化纤维。 7(2)镜检对叶百部根横切片 注意其与直立百部根横切面特点的要紧区别;根被约为3列细胞,壁木化,无细条纹,最内层细胞的内壁特厚;皮层外缘散有纤维,壁微木化;韧皮部束和木质部束3640个,木质部束的木化纤维及木化薄壁细胞连接成环。髓部纤维少,常单个散在o(3)镜检蔓生百部根横切片,注意其与直立百部根横切面特点的要紧区别:根被细胞26列,无角质条纹,韧皮部纤维木化;导管较大,并深入分布于髓部,大多呈23轮排列。l、绘直立百部根横切面组织简图。

18、2、绘直立百部根的根被细胞,示角质条纹。 试列直立百部、蔓生百部与对叶百部的生药性状检索表及组织构造检索表。实验六 根茎类生药黄连Rhizoma Coptidisl、把握黄连的生药性状特点。2、把握黄连根茎横切面组织特点与粉末显微待征。3、了解其它根及根茎类中药的性状特点 显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。 黄连 Coptis chinensis Franch原植物标本、生药(味连)组织切片及粉末。1、性状鉴定 观看味连性状 味连根茎多簇状分枝,有时弯曲,形如倒鸡爪。分枝类圆柱状,长37cm直径0.30.9cm。表面黄棕色或灰黄色,粗糙,有不规则结节状隆起,上有较密的环纹,着生须根或

19、须根残基,并有鳞叶,顶端常有残留的茎基和叶柄基,根茎中段的节间有时较细,表面光滑,习称“过桥,长l4参谋。质硬,折断面不平坦;横断面可见皮部棕红色或暗棕色,木部鲜黄色或橙黄色,具放射状统纹理。髓部红棕色,有时中空,气微,味极苦。 2、显微鉴定 (1)镜检黄连根茎横切面组织切片 自外向内观看其要紧组织特点:8木栓层为数列扁平细胞,壁薄,其外有时可见鳞叶的横切面组织,由上下表皮及多角形薄壁细胞组成。皮层较宽,薄壁组织中有石细胞,单个或成群散在。常可见根迹维管束和叶迹维管束。维管束外韧型,韧皮部较狭窄,外侧有中柱鞘纤维束,约由l020个纤维组成,或伴有少数石细胞;形成层细胞扁平,束问形成层不明显;木

20、质部由导管、管胞、木纤维、木薄壁细胞组成,木纤维较发达。髓部由薄壁细胞组成,无石细胞。注:三角黄连Cdeltoidea C。YCheng et Hsiao的根茎(雅连)髓部有石细胞。云连Cjteetoides C.YCheng的根茎皮部、髓部均无石细胞。 薄壁细胞均含淀粉粒。(2)取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特点:石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形,有时稍延长,长径25 75m,孔沟及纹孔明显。韧皮纤维鲜黄色,纺锤形或长梭形,直径:2040m,壁较厚,纹孔少。木纤维众多,常成束,鲜黄色,直径l 535m,壁具裂隙状纹孔。导管多为孔纹导管,也有具缘纹孔,网纹及螺纹导管。

21、鳞叶表皮细胞类方形或长方形,壁薄曩垂厨壁微波状。淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形,直径ll0,复粒少,由24分粒组成。 l、描述记载黄连根茎性状。2、绘黄连根横切面简图。3、绘黄连粉末显微特点图,示石细胞、韧皮纤维、木纤维、导管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。l、如何从性状与组织上鉴别“味连”、“雅连”和“云连”?实验七 根茎类生药大黄 Rhizomo Rhei l、把握大黄的生药性状特点。2、把握大黄横切面组织特点与粉末显微特点。显微镜、临时装片用具、蒸馏水 水合氯醛试液。9大黄Rheum Palmatum L.原植物标本、生药饮片、组织横切片及粉末。l、性状鉴定 取大黄标本,从形状、表面特点、断面特

22、点、气味等方面描述大黄性状特点。2、显微鉴定(1)镜检大黄根茎横切面组织切片,自外向内观看其要紧组织特点:木栓层与皮层多已除去,偶残存。韧皮部射线l4列细胞,内含棕色物。形成层环状。木质部导管径向稀疏排列。髓宽广,散有多数异型维管束(星点),系复合维管束,由多个外木式维管束组成,形成层类圆形,射线呈星芒状射出。(2)取大黄粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特点:草酸钙簇晶大而多,棱角大多短钝。, 。导管主为网纹导管,并有具缘纹孔及细小螺纹导管,直径约至140m,非木化。淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形,脐点大多呈星状,复粒由27个分粒组成。3、观看所示标本的性状特点。l、描述大黄性状特点。

23、2、绘大黄根茎横切面简图。3、绘大黄粉末显微特点图,示草酸钙簇晶、导管、淀粉粒。实验八 根茎类生药半夏 Rhizoma Pinelliae l、把握半夏的生药性状特点。2、把握半夏粉末显微特点。显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。半夏Pinellia ternata(Thunb)Breit.原植物标本、生药、饮片、粉末。 10 1、性状鉴定 取半夏块茎,从形状、表面、质地、断面、气味等方面描述半夏性状特点。 取半夏粉末先后以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特点: 淀粉粒单粒类圆形、半圆形或圆多角形,直径220,脐点裂缝状,人字状或星状;复粒由26分粒组成。 草酸钙针晶成束存在于椭圆形

24、粘液细胞中或随处散在,针晶长20ll0m。 螺纹导管直径1024m o 3、观看所示标本的性状特点。 l、描述半夏性状特点。 2、绘半夏粉末显微特点图,示淀粉粒,草酸钙针晶束,导管。实验九 茎木类生药关木通Caulis Aristolocbiae Manshuriensis l、把握关木通的生药性状。 2、熟悉关木通茎的组织及粉末特点。 东北马兜铃Aristolochia manshuriensis Kom生药、组织横切片及粉末。 l、性状鉴定 观看关木通生药,注意茎呈圆柱形,稍弯曲。表面灰黄或淡棕色,节明显,稍膨大。节间有浅纵沟及浅棕色残余的斑块状木栓。体轻质坚,不易折断,触之稍有弹性。横切

25、面黄白色,皮部薄,木部占切面的绝大部分,密布导管小孔,与浅色射线排列呈蛛网状,髓部不明显,味苦。 2、显微鉴定 (1)镜检关木通茎横切片,自外向内观看下列特点: 木栓组织多已刮去,仅残存数列扁平的木栓细胞。 栓内层为十余列扁平薄壁细胞。 中柱鞘众多纤维成群,切向排列于韧皮部外,常呈新月形,纤维群中有少数石细胞散在。维管束外韧型,约为l 2个。韧皮部狭窄,颓废筛管和韧皮薄壁细胞相间层状排列,形成层明显成玮,木质部中导管口径大,多单个散在,切向整齐排列11 成环,木薄壁细胞稀少。初生射线宽而长,次生射线窄而短。 髓狭小,条状,细胞多颓废。 薄壁细胞含有草酸钙簇晶和淀粉粒。 (2)取关木通粉末少量,分别以蒸馏水和水合氯醛试液透化装片,镜检下列特点: 导管 庞大,多破裂,具缘纹孔排列紧密,孔径可达l 3pm。 木纤维 要紧为纤维管胞,多成束,单个纤维长梭状,有明显的具缘纹孔。 韧皮纤维长梭形,壁较厚,有斜纹孔。 石细胞较少,类方形或类长方形,壁较厚。 此外,尚有傍管木薄壁细胞和木栓细胞,以及淀粉粒、

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