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2017

分解尿素的微生物筛选

基因文库、表达载体

自变量、豆豉发酵

cDNA,DNA连接酶

提取绿色植物的物质W

专题6

大部分的必修、基因工程

2016

氮源、实验设计、计数

质粒载体、病毒知识

苹果醋发酵、原核细胞结构

核移植、克隆哺乳动物

乳酸菌纯化、筛选

表达载体

2015

油脂鉴定、微生物计数

逆转录、必修知识

胡萝卜素基本知识、提取

必修、蛋白质工程步骤

2014

分离纤维素分解菌、实验

杂交瘤细胞、单抗

微生物培养、纯化、计数

基因文库、基因工程步骤

2013

泡菜制作

基因工程步骤、胚胎移植

微生物纯化、鉴定、实验

必修、细胞融合、组培

2012课标卷

MS培养基、植物组织培养

专题3

限制酶、运载体、反转录

2011课标卷

分解原油的微生物筛选

大部分必修、生态工程

专题5

2010课标卷

蒸馏法提取玫瑰精油

试管苗、植物组织培养

分析1:

近10年共19套新课标卷,专题一考察频率为:

26%;

专题二:

63%,专题六:

15%。

可见专题二是高频考点。

但就云南卷而言,从2013年至2018年依次考察了:

专题二→二→六→一、二→六→一、二→二。

建议1:

2020年出现专题六的可能性较高,但是全部全国卷中专题二出现概率远超其他专题,故此专题二、六需着重复习。

分析2:

历年考察专题一、专题二时都会涉及必修基础知识和实验技能。

建议2:

选修一是实验素养考察的重点模块,请梳理实验相关知识,掌握实验设计的核心思想。

2、

选修一高考试题汇编和分析

1.【2010年课标卷】下列是与芳香油提取相关的问题,请回答:

(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取,其理由是玫瑰精油具有的性质。

蒸馏时收集的蒸馏液(是、不是)纯的玫瑰精油,原因是

(2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和。

当原料量等其他条件一定时,提取量随蒸馏时间的变化趋势是。

(3)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会,原因是

(4)密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度的地方,目的是。

(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。

提取精油时采摘花的最合适时间为天左右。

(6)从薄荷叶中提取薄荷油时(能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是。

2.【2011年课标卷】有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。

某同学欲从受石油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。

回答问题:

(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基土,从功能上讲,该培养基属于培养基。

(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。

(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈说明该菌株的降解能力。

(4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、__________

和。

无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

3.【2013年Ⅰ卷】回答下列有关泡菜制作的习题:

(1)制作泡菜是,所用盐水煮沸,其目的是。

为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是。

(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。

该过程发生在乳酸菌的中。

(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。

(4)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是,原因是:

4.【2013年Ⅱ卷】临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。

实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

回答下列问题:

(1)为了从样本中获取致病菌菌落,可用__________法或____________法将样本借种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。

(2)取该单菌落适当稀释,用_________法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。

(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A__________;

含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B________;

含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明_____________________

_______________;

含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的___________。

(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素_________。

5.【2014年Ⅰ卷】植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。

(1)分解桔秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶。

其中的葡萄糖苷酶可将________________分解成______________。

(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成______色复合物。

用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________________。

(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):

酵母膏

无机盐

淀粉

纤维素粉

琼脂

CR溶液

培养基甲

+

培养基乙

注:

“+”表示有,“—”表示无。

据表判断,培养基甲_________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是_______________________________________________________________;

培养基乙_________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是_______________

___________________________________________________________________。

6.【2014年Ⅱ卷】为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。

在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;

然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;

经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。

据此可得出每升水样中的活菌数为。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。

操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。

这样做的目的是

(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。

结果发现:

振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。

分析其原因是:

振荡培养能提高培养液的的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高的利用率。

7.【2015年Ⅰ卷】已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。

脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。

回答有关问题:

(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用于染色。

微生物A产生的油脂不易挥发,可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用直接计数;

若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,℃条件下该酶活力最小。

为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕℃设计后续实验。

8.【2015年Ⅱ卷】回答与胡萝卜有关的问题:

(1)胡罗卜含有的胡罗卜素中,最主要的是_______________(填“α—胡罗卜素”或“β—胡罗卜素”或“γ—胡罗卜素”),该胡罗卜素在人体内可以转变成两分子__________,后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症,该疾病称为_______________,胡罗卜素是_______________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。

(2)工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡罗卜素时,__________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的__________作为胡罗卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是______________________________________________________

_______________________。

9.【2016年Ⅰ卷】空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。

某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。

实验步骤如下:

①配置培养基(成分:

牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);

②制作无菌平板;

③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________________________。

若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是________。

(2)步骤③中,实验组的操作是__________________________________________________

______________________________________________。

(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了____________现象。

若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法____________(填“正确”或“不正确”)。

10.【2016年Ⅱ卷】苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的,回答下列问题:

(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。

图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段,在酵母菌细胞的____________中进行,其产物乙醇与____________试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;

过程③在酵母菌细胞的____________中进行,与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度____________。

(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在________条件下才能完成。

(3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶段的温度________(填“低于”或“高于”)第二阶段。

(4)醋酸杆菌属于____________核生物,其细胞结构中__________(“含有”“不含有”)线粒体。

11.【2016年Ⅲ卷】某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。

分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是______________________________________________________________________。

(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________和_________________。

分离纯化时应挑选出____________的菌落作为候选菌。

(3)乳酸菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。

12.【2017年Ⅰ卷】某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。

(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生________________。

能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是_______________________

__________________________________,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是___________________________________________________(答出两点即可)。

(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是___________________________

________________________________________________________________________。

(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有___________

______________________________________________________(答出两点即可)。

13.【2017年Ⅱ卷】豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。

为了研究影响豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将两者置于适宜条件下进行发酵,并在32h内定期取样观测发酵效果。

(1)该实验的自变量是____________、_______________。

(2)如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌是__________。

(3)如果在实验后,发现32h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵的最佳时间;

若要确定最佳发酵时间,还需要做的事情是_______________

_____________________________________________________。

(4)从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生一定的变化,其中,蛋白质转变为___________,脂肪转变为______________________。

14.【2017年Ⅲ卷】绿色植物甲含有物质W,该物质为无色针状晶体,易溶于极性有机溶剂,难溶于水,且受热、受潮易分解。

其提取流程为:

植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。

(1)在提取物质W时,最好应选用的一种原料是________(填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”)的植物甲,不宜选用其他两种的原因是___________________________________________

_________________________________________________________________。

(2)提取物质W时,振荡的作用是________________________________________________。

(3)活性炭具有很强的吸附能力,在提取过程中,用活性炭处理提取液的目的是_________

___________________________________。

(4)现有丙酮(沸点56℃)、乙醇(沸点约78℃)两种溶剂,在提取物质W时,应选用丙酮作为提取剂,理由是_______________________________________________。

(5)该实验操作过程中应注意的事项是______________________________(答出两点即可)。

15.【2018年Ⅰ卷】将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。

在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。

(1)M培养基着用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培养基属于培养基。

(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。

氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有(答出两点即可)。

(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂选出能产淀粉酶的微生物。

加入的显色剂是该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是。

(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:

甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;

乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是

16.【2018年Ⅱ卷】在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。

(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。

(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是________________________________________________________。

(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能_________________,在照射前,适量喷洒_______________,可强化消毒效果

(4)水厂供应的自来水通常是经过___________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。

(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是_________________________________________________________。

17.【2018年Ⅲ卷】回答下列与酵母菌有关的问题:

(1)分离培养酵母菌通常使用_________________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用____________灭菌法灭菌。

若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后会观察到菌落,菌落的含义是___________________________________。

(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进_____________(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”);

若进行厌氧培养,可促进_____________(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是______________________________________________________________。

18.【2019年Ⅰ卷】已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。

某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。

Ⅰ号培养基:

在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。

Ⅱ号培养基:

氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。

Ⅲ号培养基:

氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量)。

X(45g/L)。

(1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是___________。

Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是___________________。

(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会_________,其原因是______________________________________________________。

(3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是___________________。

(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供_________和______________________。

19.【2019年Ⅱ卷】物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。

W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。

某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。

回答下列

问题。

(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是____。

(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。

如果要得到目标菌,应该选择________菌落进一步纯化,选择的依据是______________________________________。

(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。

若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即__________________________________________________________________________。

(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。

为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加______________,三处滴加量相同。

②一段时间后,测量透明圈的直径。

若C处没有出现透明圈,说明_________________________________________;

若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明_______________________________________

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