粮油查验大米中直链淀粉含量测定快速仪器法编制说明Word下载.docx
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本标准的编写规那么是依照GB/T《标准化工作导那么第1部份：
标准的结构和编写》的要求进行编写。
该标准所述方式是成立在科学研究、权威鉴定和充分应用的基础上，不排除尔后其他通过性能测试、行业准入的同类产品。
大米直链淀粉含量检测的意义
大米是我国最要紧的主食，要紧成份是淀粉。
而淀粉分为直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉随着大米品种的不同在大米淀粉中所占比例有专门大不同。
例如，GB1354-2020《大米》中规定优质大米的直链淀粉含量，在粳米中为14%～20%，籼米中那么为14%～24%。
大米直链淀粉含量对大米蒸煮品质与口感阻碍专门大，直链淀粉含量越高，米饭越硬、越难熟。
同时，直链淀粉含量与淀粉的糊化、凝胶化、粘稠度、溶解度、膨胀能力、消化性和抗性等性质也紧密相关，对大米的合理加工与利用，农业选种、育种均具有重要意义。
因此，快速、准确测定直链淀粉含量对米及米制品生产行业的生产与进展具有重要意义。
GB/T15683-2020检测时刻较长，部份实验步骤不易操作，实验的重复性与再现性较差。
第一，利用索氏提取器进行样品脱脂、用2d时刻来平稳水分等操作步骤耗时较长，以至于大幅度延长了检测时刻。
第二，该标准并无对平稳水分的环境进行严格规定，不确信度大。
再次，绘制标准曲线所需的马铃薯直链淀粉和糯米支链淀粉需要实验人员自行制备，标准物的纯度缺乏一致性，而且个人的体会与操作技术水平对测定结果阻碍较大，致使不同实验室间绘制的标准工作曲线也存在较大不同。
以致造成实验的重复性和再现性差，从而阻碍测定结果的准确度。
通过对GB/T15683-2020《大米直链淀粉含量的测定》、ISO6647-1:
2007《大米直链淀粉含量的测定》（英文版）、NY/T2639-2021《稻米直链淀粉的测定分光光度法》、GB/T21305-2007《谷物及谷物制品水分的测定》的研究，为缩短大米中直链淀粉的测按时刻，有效地减小操作进程中的人为误差，使测定结果加倍准确稳固、客观公正，成立了大米直链淀粉含量测定的快速仪器法。
快速仪器法通过专有的样品前处置进程，大幅度地缩短了实验周期。
同时，通过仪器内置曲线免去了标准曲线的绘制工作，不仅减少了实验时刻，专门大程度上克服了人为误差，还有效地提高实验的准确性、重复性与再现性，最大限度保证测定进程快速、测定结果准确，更好地效劳市场要求，为企业进展提供科技支撑。
标准的要紧内容
本标准的要紧内容有：
标准的范围、标准性引用文件、术语和概念、原理、试剂和仪器、操作步骤、结果表示、精准度。
2.要紧实验（或验证）的分析、综述报告，技术经济论证，预期的经济成效
适用范围和原理
本标准适用于直链淀粉含量高于5%（质量分数）的大米。
在延伸应用范围取得确认后，也能够用于糙米、玉米、小米和其他谷物的测定。
直链淀粉速测仪原理：
将大米粉碎至细粉，以破坏淀粉的胚乳结构，使其易于完全分散及糊化，并脱脂粉碎后试样，将脱脂后的试样分散在氢氧化钠溶液中。
向必然量的试样分散液中加入专用显色试剂，生成显色复合物，然后利用直链淀粉速测仪于720nm波优势测定该显色复合物的吸光度值与直链淀粉含量。
快速仪器法的技术改良
快速仪器法针对GB/T15683-2020《大米直链淀粉含量的测定》的多处操作方式与利用的试剂进行了改良。
尤其是利用超声波设备替代索氏提取器进行样品脱脂，利用恒温烘箱烘干样品，这两项操作的改良大幅度地缩短了实验检测周期。
超声波脱脂
为了减少样品脱脂时刻，进行了利用超声波提取法替代索氏提取器脱脂的研究。
选取20份直连淀粉含量在15%～25%范围内的大米样品，采纳不同的脱脂方式与脱脂时刻对样品进行脱脂，并测定直链淀粉含量。
实验共设四组，第一组为对照组，采纳GB/T15683-2020方式测定直链淀粉含量；
其余三组为超声Ⅰ组、超声Ⅱ组、超声Ⅲ组，也依照GB/T15683-2020测定所有样品直链淀粉含量，但将索氏提取器脱脂的操作步骤替换为利用超声波设备进行脱脂。
利用超声波设备进行脱脂的具体操作如下：
称取样品置于脱脂袋内，将脱脂袋放入装有150mL甲醇的250mL广口瓶中，以后，将广口瓶放到超声波设备内，水温45℃，进行超声波处置。
超声Ⅰ组、超声Ⅱ组、超声Ⅲ组超声时刻别离是40min、60min、80min。
超声波处置后将脱脂袋掏出，依照GB/T15683-2020的要求平稳水分后并继续进行其余操作。
实验结果如表1所示，将四组数据进行单因素方差分析，考察采纳不同的超声波脱脂条件处置样品后测定的结果与采纳国家标准方式测定的结果之间是不是存在显著性不同。
p=<
，各组之间不同显著。
其中，超声Ⅰ组与对照组不同显著，超声Ⅱ组和超声Ⅲ组与对照组无显著性不同，可是，超声Ⅱ组的平均值与对照组更为接近，而且该组的超声时刻较短。
因此，选定超声Ⅱ组的处置条件作为超声波脱脂的条件，为水温45℃，时刻60min。
平稳水分方式的改良
为了缩短样品平稳水分的时刻，进行了利用恒温干燥箱烘干样品的研究。
选取20份直连淀粉含量在15%～25%范围内的大米样品，依照GB/T15683-2020方式脱脂后，采纳不同的平稳水分方式与平稳时刻对脱脂后样品进行平稳水分，并测定直链淀粉含量。
实验共分四组，第一组为对照组，采纳GB/T15683-2020方式测定样品的直链淀粉含量；
其余三组为烘干Ⅰ组、烘干Ⅱ组、烘干Ⅲ组，利用恒温干燥箱烘干脱脂后的样品，烘干时刻别离是30min、45min、60min，而且，其余操作都依照GB/T15683-2020执行。
用恒温干燥箱烘干样品的具体操作如下：
掏出用索氏提取器脱脂回流后的样品，自然风干30min，使甲醇挥发近干，然后，将样品转移至铝盒，置于恒温干燥箱中90℃烘干。
烘干Ⅰ组、烘干Ⅱ组、烘干Ⅲ组，别离烘干30min、45min、60min，并在干燥器中冷却30min。
随后依照GB/T15683-2020进行其余操作。
表1不同方案脱脂处理后样品直链淀粉含量（%）
样品编号
对照组
直链淀粉含量（%）（GB/T15683-2008）
超声Ⅰ组
直链淀粉含量（%）
（45℃，40min）
超声Ⅱ组
（45℃，60min）
超声Ⅲ组
（45℃，80min）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
平均值
标准差
注：
肩标a，b表示同一行内组间不同，肩标相同的表示组间无显著性不同，肩标不同的组间有显著性不同。
将四组测定结果进行单因素方差分析，考察烘干样品是不是会对样品的测定结果产生阻碍并挑选出适合的烘干条件，结果见表2。
p=>
，测定结果之间无显著性不同，即采纳恒温干燥箱烘干样品并非会阻碍直链淀粉含量的测定结果。
可是，由于对照组平均值与烘干组平均值的差值最小的是烘干Ⅱ组，因此，选择烘干Ⅱ组的烘干条件，即90℃，烘干45min作为平稳水分的条件。
表2不同方案平衡水分后样品直链淀粉含量（%）
（GB/T15683-2008）
烘干Ⅰ组直链淀粉含量（%）（90℃，30min）
差值d1
烘干Ⅱ组直链淀粉含量（%）（90℃，45min）
差值d2
烘干Ⅲ组直链淀粉含量（%）（90℃，60min）
差值d3
/
显色试剂的保留
快速仪器法采纳了两种专用显色试剂，显色试剂A：
利用碘化钾酸性溶液和抗氧化剂配制的专用显示试剂；
显色试剂B：
利用过硫酸钾配制的专用试剂。
两种试剂均需4～7℃，避光保留。
表3中是用同一份显色试剂，在配制当天、配制1个月后、配制3个月后、配制6个月后测定同份样品直链淀粉含量的结果。
进行单因素方差分析，p=>
，无显著性不同。
因此，能够以为显色试剂的有效期为6个月，但考虑到各个实验室实验条件的限制，推荐保质期为3个月。
表3显色剂保存时间与测定效果
组别
配制当天
配制1个月后
配制3个月后
配制6个月后
直链淀粉含量（%））
直链淀粉速测仪内置的标准曲线
直链淀粉速测仪内置的标准曲线是利用已知直链淀粉含量的参考物质绘制的。
第一，测定不同浓度参考物质的吸光度值，然后，以吸光度值为纵坐标，直链淀粉含量为横坐标，绘制标准曲线。
参考物质，是从坛墨质检（北化恒信-国家标准物质中心）购入的有证标准物质，编号BCR®
-467。
BCR标准物质是由欧盟研究基金项目支持其研制，并由欧洲标准局（IRMM）负责保留、分发和后续监控进程和复制。
本标准与国家标准测定值相关性验证
为了验证直链淀粉速测仪测定值可否准确判定，选取20份粳稻样品，别离用快速仪器法和GB/T15683-2020测定其直链淀粉含量。
对直链淀粉速测仪测定值与GB/T15683-2020《大米直链淀粉含量的测定》的测定值的相关性进行实验验证，对结果进行统计分析，见图1。
由图1可明显看出，直链淀粉速测仪测定值与GB/T15683的测定值具有明显的正相关关系，相关系数为，说明两种测定方式的测定值具有必然的关联性。
图1快速仪器法与国家标准测定值相关性验证
国家标准适用性验证
样品的制备
直链淀粉速测仪性能评判实验的样品：
支链淀粉选用蜡质糯米，纯度100%（手动挑选去除非糯性大米），粉碎至80目～100目；
按GB/T15683-2020将上述样品进行脱脂和平稳水分，测试用样品采纳糯米作为基质，按15%～30%范围加标。
准确性
一名测试人员用两台直链淀粉速测仪，依照仪器规定的方式完成直链淀粉含量在14%至30%加标样品测定，两次测定均值作为测试结果。
采纳测定值与定值进行配对T查验，考察验证仪器测定结果与国家标准方式的测定结果之间是不是存在显著性不同，结果见表4、5。
仪器1：
td=，查t散布表，,8=，td=<
8=；
仪器2：
td=，查t散布表，,8=，td=<
8=说明测定结果与国家标准方式测定结果之间无显著性不同。
表4直链淀粉测定仪器1准确性
定值/%
仪器1/%
差值di/%
均值d
标准差sd
td
8
22
24
26
28
30
表5直链淀粉测定仪器2准确性
仪器2/%
重复性
采纳一台直链淀粉速测仪，6次重复测定直链淀粉含量在20%左右的样品，依照GB/T489-2020《数据的统计处置和说明正态散布均值和方差的估量与查验》中单整体方差或标准查验实施χ2
散布查验，判定该方式重复性测定标准差是不是超过标准方式中规定的重复性要求，同时采纳6次测定极差与现有国家标准规定的6次测定重复性临界极差进行对照，考察该方式的重复性。
测定结果见表6。
依据国家标准规定计算得出，在重复性条件下取得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过，6次测定的重复性临界极差为，标准规定的重复性标准差sr=，显著水平α=情形下，χ2=<
χ（5）=，极差<
重复性临界极差=，说明该方式测定的重复性标准差和极差均没有超过标准方式中规定的重复性要求。
表6直链淀粉测定重复性
测定次数
测定值/%
标准差s
χ2
χ（5）
极差
稳固性
采纳一台直链淀粉速测仪，对直链淀粉含量在20%左右的样品每小时测定一次，持续测定12个小时，以仪器测定数据的标准差和极差是不是超过标准方式中规定的重复性要求来考察设备稳固性。
结果见表7。
依据国家标准规定而计算出在重复性条件下取得的两次独立测定结果的绝对差不得超过，13次测定的重复性临界差值，国家规定的重复性标准差sr=，显著性水平α=情形下，极差=<
重复性临界极差=，说明该方式测定的稳固性标准差和极差均没有超过国家标准方式中规定的重复性要求。
表7直链淀粉测定稳定性
χ（12）
台间差
用两台直链淀粉速测仪测定均值进行配对T查验，结果见表9。
8=，说明两台设备的测定结果之间无显著性不同。
表8直链淀粉测定台间差
方式验证
选取8份大米样品，直链淀粉含量在17%～23%。
在用快速仪器法测定直链淀粉含量的同时，将这些样品别离送至三家单位，采纳GB/T15683-2020法测定直链淀粉含量。
这三家单位别离为单位A：
湖北省粮油食物质量监督检测中心、单位B：
安徽省粮油产品质量监督检测站、单位C：
南京财经大学。
快速仪器法测定值与各单位国家标准测定值的对照见表9。
快速仪器法与GB/T15683-2020法之间的方式差值均值在%～%之间，有良好的一致性，快速仪器法测定结果准确靠得住；
将各组实验结果进行单因素方差分析，p=>
，测定结果之间无显著性不同，即直链淀粉速测仪的测定结果与不同实验室、不同实验操作人员采纳国家标准方式测定的结果之间无显著性不同，说明快速仪器法能够推行到实际应用中。
表9直链淀粉速测仪测定值与各单位国家标准测定值
样品
编号
直链淀粉速测仪测定值（%）
单位A国标法测定值（%）
单位B国标法测定值（%）
单位C国标法测定值（%）
标准偏差
与GB/T15683-2020对如实验
在2016年度国家级收成粮食粳稻谷质量会检样品中，随机搜集粳稻样品40份，同时用GB/T15683-2020《大米直链淀粉含量的测定》和直链淀粉速测仪测定样品直链淀粉含量，并将测定结果进行配对T查验，结果见表10。
td=，查t散布表，,39=，td=<
39=，说明两种检测方式的测定结果之间无显著性不同，直链淀粉速测仪测定值与国标法测定值相符。
同时，两种检测方式的测定结果的两次独立测试结果差的绝对值，均小于重复性r，说明两种检测方式的重复性都十分良好，该次测试结果真实靠得住。
3.采纳国际标准和国外先进标准的程度，和与国际、国外同类标准水平的对照情形，或与测试的国外样品、样机的有关数据对照情形
本国家标准在技术水平上能与国际水平接轨。
表10直链淀粉速测仪测定值与GB/T15683-2008测定值对比
GB/T15683-2008测定值
两次测定值差值d
重复性限r
直链淀粉速测仪测定值
21
23
25
27
29
续表10直链淀粉速测仪测定值与
升级会员 