有机磷农药的检测Word格式.docx

有机磷农药的检测Word格式.docx

《有机磷农药的检测Word格式.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《有机磷农药的检测Word格式.docx（6页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

掌握常见有机磷农药的鉴别试验；

了解有机磷农药的理化性质和生物学特性。

实验内容及时间分配

1、讲解实验相关知识（10′）

2、指导学生进行实验操作（80′）

3、实验课小结及书写实验报告（30′）

授课形式

利用板书讲解、实验示教、学生操作

教材与参考文献

教材：

《法医毒理学、法医毒物分析实验指导》

参考资料：

《法医毒物分析》、《技能实验技术》

教研室审查意见

主任签字

基础医学院法医临床学教研室2006年5月15日

新乡医学院实验课教案

法医毒物分析

基本内容

教学手段和教学组织

一、目的

1.了解有机磷农药的理化性质和生物学特性；

2.掌握常见有机磷农药的鉴别试验。

理论知识回顾:

基本结构：

有机磷杀虫药是磷酸酯或硫代磷酸酯为基本骨架的一系列有机化合物。

可分为磷酸酯类（如敌敌畏）、硫代磷酸酯类（如对硫磷、乐果）。

外观与气味：

有机磷纯品大多为无色、黄色或白色结晶，工业用品多数为无色、黄色至棕黄色油状液体。

有机磷农药都具有强弱不等的气味，含硫的有蒜臭味，不含硫的有酯的气味或刺激性气味。

在实际工作中，有经验的人通过检材的气味，大致能够判断此类农药的类别。

稳定性：

有机磷杀虫药不具有酸碱性，不能与酸或碱成盐。

分子中含有易断裂的酯键，化学性质多不稳定，一般没有累积作用；

碱能使之分解。

极性与溶解性：

有机磷杀虫药具有一定极性，都能溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿、苯等有机溶剂。

有机磷品种很多，有的极性较弱，有的极性较强，在提取中要注意根据有机磷极性的强弱和检材中脂肪、蛋白、色素等杂质含量的高低，选择合适的溶剂。

原则上，极性强的有机磷应用极性强的有机溶剂，极性弱的有机磷用极性弱的有机溶剂。

敌百虫、敌敌畏、乐果、磷胺、久效磷等属强极性有机磷；

3911、1240等属

介绍本次实验课的目的和要求。

回顾有机磷杀虫药的基本结构、外观和气味、稳定性、极性与溶解性。

指出在提取检材时的注意事项。

2006年5月15日

第1页

弱极性有机磷；

1605、4049、1059等属中极性有机磷。

但总的来说，有机磷农药的极性都比较强。

中等极性和强极性的有机溶剂，如苯、二氯甲烷、氯仿、丙酮、甲醇等均能将各种有机磷从检材中提取出来。

二、实验要求

本次试验提供检材1、2、3，分别为敌敌畏、乐果、1605中的一种，通过有机磷农药颜色鉴别试验，鉴别三种检材为上述那种有机磷农药。

三、颜色鉴别试验

（一）不含硫代磷酸脂类有机磷的颜色反应

间苯二酚-氢氧化钠反应：

分别取三种检材1滴至滤纸上，加1％间苯二酚酒精液1滴及5％氢氧化钠醇液1滴，置小火加热片刻，观察斑点处的颜色变化。

结果：

检材1呈红色。

检材2、3无颜色变化。

说明：

敌敌畏、敌百虫、久效磷、二溴磷有机磷杀虫药现红色斑点，本次试验中提供的检材中含有敌敌畏，由此颜色反应可鉴别出检材1为敌敌畏。

（二）含硫代磷酸脂类有机磷的颜色反应

1.亚硝酸反应

原理：

1059、3911、1240、4049、乐果等有机磷农药被碱水解后所生成的硫醇化合物能与亚硝酸作用生成亚硝基化合物，该化合物在汞离子（Hg＋＋）存在下水解，又能释出亚硝酸，与Griess试剂作用，生成紫红色偶氮化合物。

介绍实验思路。

指导学生进行实验操作。

做试验的过程中，给学生强调一下试验中的注意事项。

2006年3月13日

第2页

分别取检材2、3各1～2毫升于两个烧杯内，加0.4N氢氧化钠5毫升，在35-40℃水浴中放置10分钟进行水解，加亚硝酸溶液（临用前将1N硫酸和0.01N亚硝酸钠溶液按9：

1混合）5毫升，加时应由管的中央直接加到溶液中。

以免沾到管壁上，影响结果。

放置10分钟，加25％尿素溶液1毫升，振摇10分钟，加氨基苯磺酸溶液1毫升，混合后加入饱和二氯化汞溶液0.2毫升混合，再加a-萘胺溶液1毫升，混匀，在37-38℃水浴中放置5分钟。

观察结果。

结果：

检材2很快出现紫红色，检材3放置一段时间后出现淡紫红色。

检材2、3为含硫代磷酸酯类有机磷农药。

本反应较为灵敏，灵敏度为0.025毫克，还可用作定量试验。

本法的关键在于加尿素去除过剩的亚硝酸，一定要彻底去除干净，否则极易出现假阳性。

同时，每次必须作空白试验加以对照。

2.亚硝酰铁氰化钠反应：

1059、3911、1240、4049、乐果等有机磷农药被碱水解后所生成的硫醇化合物，与亚硝酰铁氰化钠作用，在酸性溶液中，能产生红色，检出限度约0.1毫克／毫升。

取检材2、3各1-2ml，加少量蒸馏水（约1-2毫升），加2滴5％亚硝酰铁氰化钠（新鲜配制），5滴10％氢氧化钠，充分振荡，置30℃水浴中，加热2分钟，取出置冷水中冷却，沿管壁加入1-2滴浓盐酸。

观察结果。

检材2为即呈红色，检材3为蓝绿色。

（检材2为乐果）

此反应欠灵敏，条件较为严格。

水解时加碱不可过浓，时间不可过长，温度不可过高，根据实验证明，30℃，2分钟较为适宜，量

第3页

少时红色容易消退，量多时，溶液全部变红，长时间不退。

加浓盐酸后，如出现蓝绿色是为阴性，温度过高，时间过长，酸化后会出现阴性，乙醚过多也有干扰，往往一次难以成功，须多做两遍，并应同时作阳性样品对照和空白对照试验。

3.偶氮染料反应：

对硫磷的硝基用锌粉和盐酸还原成胺基后，用亚硝酸盐和盐酸进行重氮化。

加氨基磺酸胺除去剩余的亚硝酸，最后与N-1-萘基乙二胺偶合，产生紫色。

取2毫升检材3，加等量蒸馏水，6N盐酸2滴，锌粉0.2克，然后置40℃水浴中加热30分钟，放冷、过滤。

滤液中加入0.25％亚硝酸钠2滴，振摇片刻，放置5分钟，加2.5％氨基磺酸胺2滴，振摇片刻，放置5～15分钟，在酸性环境中，0.5％N-1-萘基乙二胺2滴，如有1605存在．呈紫红色。

说明检材3为1605。

四、实验结果

检材1为敌敌畏；

检材2为乐果；

检材3为1605

五、注意事项

1.本次实验操作要认真仔细，一次不成功可多做几次。

2.注意安全，避免有机磷农药接触皮肤。

发生中毒。

3.注意实验室卫生。

六、小结

本次通过几个简单的颜色鉴别反应初步判断检材为何种农药。

要求掌握常见的有机磷农药的鉴别试验。

小结本次课内容，要求独立完成实验报告。

第4页