胶体金法生产工艺规程模板样本文档格式.docx
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三类6840体外诊断试剂。
3.2.3.规格：
100T/盒（25T/筒*4筒）（无卡）；
25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋）
3.3.产品概述
乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检测线（T）和质控线（C）分别包被重组乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。
当检测样本为阳性时，样本中乙肝病毒表面抗体与胶体金标记重组乙肝病毒表面抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，通过检测线（T）时与预包被重组乙肝表面抗原反映，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记兔IgG则在质控线（C）与羊抗兔IgG结合显现红色条带。
阴性样本则仅在质控线（C）显色。
3.4.试剂盒构成、储存、有效期
3.4.1.试剂盒构成：
组件
100T/盒
25袋/盒（1支/袋）
50袋/盒（1支/袋）
装量
数量
试纸条
25条/筒
4筒
无
试纸卡
1支/袋
25袋
50袋
样品稀释液
2ml
4瓶
1瓶
2瓶
阐明书
1份
3.4.2储存条件：
2-30℃保存。
3.4.3.有效期：
24个月。
3.5.生产工艺流程图文献末（23页）。
3.6.生产工艺过程及工艺条件
3.6.1配液
依照如下各配方，按各有关试剂配制作业指引书进行配制。
（1）
原料名称
用量
配制环境：
（2）
（3）
3.6.2样品稀释液分装
按照《液体分装作业指引书》，依照相应规格装量规定进行分装，分装量＝规格+附加量。
如下表所示（单位：
ml/瓶）：
标示量
附加量
15ml
0ml
3.6.3胶体金制备
烧金溶液A
烧金溶液B
超纯水
制备环境：
金标车间配料间（十万级干净区）
（1）量取ml超纯水到恰当大小烧瓶中；
（2）量取ml烧金溶液A并加入烧瓶中；
（3）水沸腾后，加入已经平衡烧金溶液Bml；
（4）水继续沸腾5分钟关闭加热搅拌器，并将烧瓶移至桌面，用铝箔纸盖住瓶口，让胶体金自然冷却。
（5）胶体金储存：
2～8℃；
有效期6个月。
3.6.4胶体金标记
3.6.4.1依照试样验证成果，量取胶体金，迅速搅拌中加入0.2MK2CO3液，混匀后，迅速搅拌中加入相应量乙肝抗原或兔IgG（乙肝抗原和兔IgG分开标记），混合均匀后，反映30分钟。
3.6.4.2终结：
充分反映后在搅拌中加入金标记过程终结液（20ul/1ml金溶液）；
继续搅拌30分钟直至混匀。
3.6.4.3将胶联溶液离心，9000转离心6分钟，收集沉淀并用金工作液定容至总体积1/10；
3.6.4.4储存：
2～8℃，有效期6个月。
3.6.5铺金液配制
3.6.5.1用工作液将1/10体积乙肝病毒表面抗原金标记物沉淀放大10倍；
兔IgG金标记物沉淀按1/3乙肝病毒表面抗原沉淀量，加至上述乙肝金标工作液中（即兔IgG金标记物沉淀为乙肝1/3）
3.6.5.2按0.2mg/ml量加入抗RBC到铺金液中；
3.6.6小样实验：
在铺金和划膜之前，应一方面将待铺基因重组抗原-胶体金复合物溶液，先铺一条玻纤（6mm×
310mm）上，用配好质控线液、检测线液划膜一张，与其她组分组合在一起，进行检测，规定：
阴性参照品符合率：
20份阴性参照品符合率（-/-）应为20/20。
敏捷度：
敏捷度参照血清，呈阳性反映。
精密性：
持续重复测定精密性参照品10次，反映成果应均为阳性，且显色度均一。
3.6.7铺金
3.6.7.1按每张玻纤可以铺金36ml计算金标液体积
3.6.7.2按计算好体积在每张玻纤上铺金，并用圆形试管刮均匀。
3.6.7.330%湿度如下，37～40℃干燥18～24小时，如不立虽然用，加干燥剂铝箔袋封存。
3.6.7.4储存：
保存过程中严格防潮，后来打开和使用一定要在30%湿度如下。
3.6.7膜包被
按照《划膜机原则操作规程》，以“252”泵速（相应速度2.7ul/cm），将质控线液和检测线液均匀地划在膜上，质控线划在距膜顶端12.1±
0.1cm处，检测线划在距膜顶端12.5cm±
0.1cm处，质控线与检测线相距5mm±
1mm。
3.6.7.230%湿度如下，37～40℃干燥18～24小时，如不立虽然用，加干燥剂铝箔袋封存。
3.6.7.3储存：
3.6.8样品垫准备
3.6.8.1按每张玻纤可以铺液36ml计算全血样品垫解决液体积
3.6.8.2按计算好体积在每张玻纤上铺液，并用圆形试管刮均匀。
3.6.8.330%湿度如下，37～40℃干燥18～24小时，如不立虽然用，加干燥剂铝箔袋封存。
3.6.8.4储存：
3.6.9半成品检测：
以上生产出来胶体金、胶金垫、包被膜、分装好样品稀释液均应作为半成品请检，质量管理部QC按照《半成品检查作业指引书》检查合格方可进入下一道工序。
3.6.10组装
3.6.10.1按照《贴膜组装工序作业指引书》规定，将包被好NC膜贴在塑料大卡上。
3.6.10.2各构成某些切割：
各组分用切割机切割成如下大小：
金标垫：
6mm×
310mm样品垫：
15mm×
310mm吸水垫：
20mm×
310mm
不干胶纸：
13mm×
310mm
3.6.10.3层压
将上述切割好材料进行贴膜制成乙型肝炎表面抗体胶体金试纸条，各膜层叠关系如下：
1）
2）
T线
C线
3）
3）
5）
（4）
6）
1）不干胶纸
2）样品垫
3）金结合物垫
4）包被有检测线（T线）和质控线（C线）硝酸纤维素膜
5）吸水垫
6）塑料衬片
3.6.10.4层压参数
金标垫2片，第一片搭上NC膜2mm，第二片搭第一片3mm；
样品垫15mm，搭上金标垫2mm；
吸水垫20mm，搭上NC膜2mm，不干胶13mm，搭上露出NC膜2mm。
3.6.11切条
（1）组装环境条件控制在相对湿度30%如下，并所有组件拆封后暴露于空气中时间不超过2小时。
（2）按照《切条工序作业指引书》使用切条机，将组装好乙肝病毒表面抗体检测试剂切割成宽度为2.5mm±
0.1mm试条，切条过程中应于前、后及过程中每30分钟对切条宽度检查一次。
3.6.12检测卡装配
按照不同规格规定，需要进行检测卡装配试纸条先把切好试条装配到完好PVC卡中，再用压卡机进行压卡，装条时应注意检查条有无划痕污渍，宽度与否符合规定；
PVC卡外观应清洁，平整，无变形，底面配套性好，压卡应注意调节松紧度，避免将卡压破或变形。
3.6.13内包装
3.6.13.1成品规格为25支/盒、50支/盒，所相应半成品内包装：
（1）装卡：
单个卡和无水硅胶干燥剂一起放入铝箔袋中，卡印字方向应朝向铝箔袋开口方向，保证无漏装。
（2）密封。
密封时应检查密封效果及铝箔袋上效期印字与否对的，使用封口机进行封口。
3.6.13.2成品规格为100支/盒，所相应半成品内包装
装筒，将无卡试纸以25支/筒规格装入筒中，放入干燥剂，然后封筒。
3.6.14外包装
（1）不干胶标签批号、生产日期、有效期打印：
以试纸条组装日期为“生产日期”，并由此推算出“有效期至”，批号按照《批号管理规程》规定设立。
按照《批号打印机使用、清洁、维护、保养原则操作规程》进行操作打印标签、包装盒上“三期”。
（2）贴签：
在上述装好检测卡铝箔袋及装好试纸条筒上贴上标签。
（3）成品组装：
纸盒内组份：
按包装盒原则折叠办法折好包装盒，依照成品组分名称、规格及数量，分别装入检测卡铝箔袋或试纸筒、样品稀释液、阐明书。
包装组组长每盒清点查看，合格后用封口签（合格证）封口。
（4）储存：
2～30℃，有效期24个月。
3.6.15.成品检定：
抽检量为3%，最小抽检量为500人份。
经质量管理部QC检测合格，QA做生产记录审核后开具《成品放行审核单》方可入库。
3.7质量原则
3.7.1.重要原辅料质量原则及根据：
（1）重组乙肝抗原
质量
原则
性状
肉眼观测不含异物、浑浊或摇不散沉淀或颗粒
蛋白浓度
用福林-酚法，以Sigma公司生产牛血清白蛋白作对照，蛋白含量以毫克/毫升表达，浓度为0.5-10.0mg/ml；
纯度和分子量
用SDS-PAGE蛋白电泳法测定，每个泳道加样量10μg，电泳带显示无杂蛋白。
分子量：
效价
ELISA检测，效价应不不大于1∶10000
功能性实验
以本品制备三批小试样品，与其她合格组分组装后检测：
20份阴性参照品符合率（-/-）应为20/20；
最低检出量：
抗-HBs最低检出量应不高于10mIU/ml；
批内精密度用1份乙型肝炎病毒表面抗体精密性参照品平行检测同批内10个测试卡，成果应所有呈阳性，且显色度均一。
批间精密度：
持续三批小试样本，分别重复检测精密度参照品5次，成果应所有为阳性，且呈色度均一。
稳定性实验：
置37℃放置10天，进行阴性参照品符合率、阳性参照品符合率、最低检出量和精密度检测，应符合上述规定。
贮藏条件
-20℃冻存
根据
《抗原质量原则及检查操作规程》
（2）兔IgG抗体
经OD280办法检测浓度≥5mg/mL。
纯度
用SDS-PAGE蛋白电泳法测定，每个泳道加样量10μg，电泳带显示无杂蛋白
抗-HBs最
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