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七,实验项目(根据学时选取实验)

序号

实验内容

学时

实验类型

实验类别

实验要求

每组人数

1

氨基氮测定

—甲醛滴定法

3

综合型

技术基础实验

必修

2

蛋白质浓度测定

—Folin-酚

法,紫外吸收法及其比较

6

血清蛋白质醋酸纤维薄

膜电泳

4

总糖和仍原糖测定

—3.5-二硝

基水杨酸法

5

酶的专壹性

验证型

技术基础

蛋白酶的活

力测定

7

酵母核糖核酸(RNA)的

提取制备

8

葡聚糖凝胶

层析

9

氨基移换反

10

底物浓度对酶活性的影响—蔗糖酶米式常数的

测定

11

聚丙烯酰胺

凝胶等电聚焦

12

药物毒性的生化分析

—血清尿素

氮的测定

13

氨基酸的分

离鉴定—纸层析法

实验壹氨基氮测定—甲醛滴定法

(壹)实验学时:

(二)实验项目内容:

1.样品测定

2.计算样品氨基氮含量

(三)主要仪器设备及配套数

1.仪器:

吸量管5ml,10ml;

量杯10ml;

三角瓶;

酸度计

2.试剂:

甲醛溶液;

0.01N氢氧化钠

(四)实验室名称:

生化实验室

实验二蛋白质浓度测定——Folin壹酚法,紫外吸收法及其比较

1.Folin—酚法中标准曲线的绘制

2.Folin—酚法中样品液的测定

3.紫外吸收法中标准曲线的绘制

4.紫外吸收法中样品液的测定

(三)主要仪器设备及配套数:

吸量管(0.5、1.05ml)和吸量管架;

试管和试管架;

分光光度计;

外分光光度计

Folin壹酚试剂A;

Folin壹酚试剂B;

各蛋白标准溶液(400ug/ml);

蛋白质样品液

(四)实验室名称:

实验三血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳

1.浸泡

2.点样

3.电泳

4.染色

5.漂洗

主要仪器:

毛细管1.5mm内径,电泳仪,电泳槽

生物化学实验室

实验四总糖和仍原糖测定――3.5-二硝基水杨酸法

(二)实验项目内容

1.葡萄糖标准曲线的制作

2.样品中仍氧糖和总糖的测定

容量瓶,玻璃漏斗,吸管,量筒,721型分光光度计,电热恒温水浴锅,水浴

配套数:

10套

实验五酶的专壹性,温度、PH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响

(二)实验内容:

1.温度对酶活力的影响

2.pH对酶活力的影响

3.活化剂和抑制剂对唾液淀粉酶的影响

4.酶对底物的专壹性

(三)主要仪器设备及其配套数

水浴锅,吸量管,白瓷瓶,小漏斗,烧杯,量筒,滴管,玻璃漏斗配套数:

实验六蛋白酶的活力测定

1.酪氨酸标准曲线制作

2.蛋白酶活力测定

试管,吸管,721型分光光度计,电热恒温水浴锅配套数:

实验七:

酵母核糖核酸(RNA)的提取制备

1.破碎细胞

2.提取

3.分离

4.沉淀RNA

5.洗涤及抽滤

6.干燥

量筒,三角烧瓶,吸滤瓶,布氏漏斗,表面皿,温度计,干燥器,离心机,水浴锅,烘箱,药物台秤

实验八葡聚糖凝胶层析

1.凝胶容胀

2.装柱

3.加样

4.洗脱和收集

5.绘制洗脱曲线

(三)主要仪器设备及配套数

吸管1m,层析柱,刻度离心筒配套数:

实验九氨基转换反应

1.肌肉糜制备

2.氨基酸样品的制备

3.纸层析

吸管1ml;

试管5*15cm;

培养皿15cm;

毛细管;

0.01M磷酸缓冲液;

0.1M丙氨酸;

0.1Ma—酮戊二酸;

0.1M谷氨酸;

0.1%

茚三酮丙酮溶液;

层析展开剂

实验十底物浓度对酶活性的影响—蔗糖米式常数的测定

(壹)实验(壹)实验学时:

1.标准曲线的绘制

2.根据活力选择酶浓度

3.底物浓度对酶促反应速度的影响—米式常数的测定

100ml三角烧瓶;

研钵;

50ml及100ml容量瓶;

离心机;

糖管;

恒温水浴;

吸量管;

停表;

分光光度计

实验十壹聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦

1.制胶柱

2.聚焦

3.显示

4.测pH

小玻璃管;

小玻璃架;

注射器;

圆盘电泳槽及直流稳压电流;

pH计;

平皿及竹夹;

吸量管

实验十二药物毒性的生化分析—血清尿素氮的测定

1.加入反应试剂

2.反应

3.比色

实验十三氨基酸的分离鉴定——纸层析法

(壹)实验目的:

1.学习分配层析的原理.

2.掌握氨基酸纸上层析法的操作技术(包括点样、平衡、展层、显色、鉴定)。

3.学习分析未知样品的氨基酸成分(水解、层析及鉴定)。

1.点样

2.展开

3.显色

4.计算各种氨基酸的Rf值

层析缸,培养皿d=15cm,喷雾器,毛细管,电吹风,烘箱配套数:

生物化学实验室根据教学要求开设相应的实验。

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