德国Zeiss活细胞工作站标准操作规程Word格式文档下载.docx
《德国Zeiss活细胞工作站标准操作规程Word格式文档下载.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《德国Zeiss活细胞工作站标准操作规程Word格式文档下载.docx（9页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
激光扫描共聚焦显微镜系统主要由：
电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。
系统组成及光路示意图：
电动荧光显微镜扫描检测单元激光器电脑工作站
实物照片说明：
电动荧光显微镜
扫描检测单元
CO2培养系统控制器
激光器
电脑工作站
2
（1）打开稳压电源（绿色按钮）
等待2分钟（电压稳定）后，再开其它开关
（2）主开关[MAINSWITCH]“ON”
电脑系统[SYSTEMS/PC]“ON”
扫描硬件系统[COMPONENTS]“ON”
（3）打开[电动显微镜开关]
打开[荧光灯开关]
（注：
具有5档光强调节旋钮）
（4）Ar离子激光器主开关“ON”
顺时针旋转钥匙至“—”
预热等待约15分钟，
将激光器[扳钮]由“Standby”扳至
“Laserrun”状态，即可正常使用
（5）打开[电脑开关]，进入操作系统
注：
键盘上也具有[电脑开关]
2.2软件的快速使用说明
（1）电脑开机进入操作系统界面后，双击桌面共聚焦软件ZEN图标
（2）进入ZEN界面，弹出对话框：
“StartSystem”——初始化整个系统，用于激光扫描取图、分析等。
“ImageProcessing”——不启动共聚焦扫描硬件，用于已存图像数据的处理、分析。
（3）软件界面：
1功能界面切换：
扫描取图（Acquisition）、图像处理Processing）、维护Maintain）
Maintain仅供Zeiss专业工程师使用）
2动作按钮；
3工具组（多维扫描控制）4工具详细界面；
5状态栏；
6视窗切换按钮；
7图像切换按钮；
8图像浏览/预扫描窗口；
9文档浏览/处理区域；
10视窗中图像处理
；
动作按钮：
Single
Stop
New
——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。
——开始扫描单张图片或一个实验流程（1组图片，如XYZ、XYT等）
——暂停/结束扫描。
——建立一个新图像扫描窗口/文档。
激光连接状况检查
眼睛观察/相机相机/共聚焦LSM光路切换（ZEN软件界面右上角）
Ocular——通过观察筒用眼睛观察。
（激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。
）
Camera——光路切换至相机。
LSM——共聚焦扫描成像光路。
显微镜设置：
“Ocular”——>
“LightPath”——>
——>
点击物镜图标，选择物镜——
样品聚焦。
透射光控制（TransmittedLightControl）
反射光光闸控制（ReflectedLightShutter）
荧光激发块选择（Reflector）
：
共聚焦LSM扫描设置
点击“LSM”ZEN软件界面右上角，系统切换至共聚焦扫描光路：
光路设置：
SmartSetup——自动预设光路
选取“荧光探针”“颜色”、扫描方法，
应用“Apply”
Fastest为最快速扫描，多条激光谱线同时扫
描。
Bestsignal为最佳信号扫描，多条激光谱线顺
序扫描。
Bestcompromise为兼顾速度与信号的折
中式扫描。
扫描图像参数设置：
每个通道的精细调节：
包括：
（1）Pinhole的调节（一般设为1AU。
该值越大，则信号越强，但共聚焦图像效果会降低。
原则上，
在保证图像质量的前提下，该值越接近于1AU越好）
（2）MasterGain的调节（增大则信号和噪音都增强，减小则信号和噪音均减小。
原则上，在保证图
像质量的前提下，Gain值越小越好）
（3）DigitalOffset的调节（可扣除背景噪音，但标本信号也有一定程度的扣除。
像质量的前提下，DigitalOffset值越接近于0越好）
（4）DigitalGain的调节（增大则信号和噪音都增强，减小则信号和噪音均减小。
像质量的前提下，Gain值越接近于1.0~1.2越好）
（5）另外，对于每个通道，需要灵活调节激光的强度（激光强度越高，则信号越强，但噪音也相应增
强，同时标本更容易被漂白或淬灭。
原则上，在保证图像质量的前提下，激光强度越低越好。
可连续扫描、一边预览图像效果、精细调节各个通道的扫描参数。
如果预览图像的效果可以，则先“Stop”
即可完成图像的扫描。
，再点击“Single”
或“Start”
图像的保存：
三种方法：
（1）File”菜单下，Save”
或者“SaveAS”
（2）点击右下角按钮
（3）点击工具栏按钮
（如图所示）
另外，通过“File”菜单下的“Export”也可将图像以其它格式输出。
，
显微镜可由TFT液晶触摸屏进行控制：
由触摸屏“Home/主页”进入“Control/显微镜控制”界面，
TFT触摸屏控制
直观、便捷。
触摸屏常用控制界面：
Objectives物镜控制
TL透射光光闸
RL反射光光闸
Reflector荧光激发块控制
荧光观察时，需要选择相应的
荧光激发块
（或者激发波长、发射波长相
近的荧光激发块）
Lightpath光路设置
触摸控制，可将光路切换至“Eyepiece”
目镜观察筒，或者将光路切换至左侧共聚
焦光路“SideportL”或者将光路切换至
前侧“Frontport”相机。
2.4关机顺序：
（1）关闭软件：
主菜单“File”——>
“Exit”退出共聚焦软件ZEN。
（2）关闭主电脑操作系统、显示器电源。
（3）关闭[荧光灯电源]。
（4）关闭电动显微镜电源。
（5）关闭Ar激光器：
先将扳钮从“Laserrun”扳到“Standby”状态；
再将钥匙逆时针从“—”旋转到“O”状态；
等待约8-10分钟、激光器风扇停止转动后（切记！
将主开关按钮按到“OFF”
（6）扫描硬件系统[COMPONENTS]“OFF”
电脑系统[SYSTEMS/PC]“OFF”
主开关[MAINSWITCH]“OFF”
（7）等灯箱充分冷却后，再放防尘罩。
（8）如果系统长时间（超过5个小时）不使用，则关闭稳压电源。
主要注意事项如下：
（1）打开稳压电源时，应等待2分钟（电压稳定）后，再开其它开关。
（2）严格遵守[激光器激光器]的开、关流程（详见“2.1、2.4开/关机顺序”）
（3）如果使用过[油镜油镜]，或者物镜表面较脏，则需用[擦镜纸擦镜纸]擦干净物镜的前表
面（清洁液使用无水乙醇和无水乙醚的混合液，混合比例：
无水乙醇30%、
无水乙醚70%）
（4）不使用荧光时，不打开[荧光灯荧光灯]。
避免频繁开/关荧光灯。
（5）必须等灯箱充分冷却后，再小心地盖上防尘罩。
（6）显微镜可由[TFT触摸屏]控制，使用触摸屏时注意：
①手指保持清洁、干燥状态，并且为了保证他人使用安全，触摸时严禁配
戴有可能接触污染物或危险样品的手套；
②触摸屏已足够灵敏，不要大力按压触摸屏；
③不要旋转、插拔触摸屏。
（7）刻录图像数据资料：
应使用刻录光驱刻录，实验前应准备好刻录光盘。
切记：
为了防止计算机病毒，严禁在共聚焦电脑上使用U盘、硬动硬盘或
者上网！
！
（8）XX，严禁自行安装任何软件！
（9）实验室温度应保持在22℃±
2℃，湿度40%-60%。
（10）避免空调直接对着显微镜吹风。
（11）整个实验过程应注意保持显微镜周围环境清洁。
3
。
升级会员 