实验动物基本操作技术_精品文档PPT课件下载推荐.ppt

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1岁家兔红色与白色长度相等；

1岁以下，红多于白；

1岁以上，白多于红。

还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。

青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。

另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；

皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。

11/1/202220第四节妊娠检查雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。

为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断（pregnancydiagnosis）。

通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。

11/1/202221外部检查法外部检查法摸胎法摸胎法阴道检查法阴道检查法直肠检查法直肠检查法超声波检查法超声波检查法孕酮含量测定法孕酮含量测定法妊娠检查方法有11/1/202222第五节分组与编号动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。

一、随机分组

（一）当分为二组时例：

设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。

分组方法：

假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个随机数字，如下：

11/1/202223动物编号：

123456789101112随机数字：

78386957910374566826541组别：

乙乙甲甲甲乙甲甲乙乙甲甲现在以随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组，则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲组，而1、2、6、9、10号分人乙组。

因两组数字不等，继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之（因甲组原分配7只）得6，即把原分配在甲组的第6个甲（即11号大鼠）调入乙组。

11/1/202224如果甲组多两个，则接下去抄两个数。

分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。

最后各组的鼠数就相等了。

调整后各组鼠的编号为：

组别鼠的编号甲组3457812乙组1269101111/1/202225

（二）当分为三组时例：

设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为A、B、C三组。

假设所定的点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字：

动物编号：

082701501529393943796910除3余数：

201202001101组别：

BCABCBCCAACA调整组别：

B11/1/202226以3除各随机数字，若余数为l，即该鼠归A组；

余数为2，归人B组；

余数为3，归入C组。

结果A组为4只，B组为3只，C组为5只。

C组多一只应调入B组。

方法同上。

仍采用随机方法；

从10后面接着抄，为61。

除以5，余数为1，则将第一个C，即第2号鼠调入B组。

调整后各组鼠的编号如下：

组别鼠的编号A组391012B组l246C组57811对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致11/1/202227二、编号标记方法实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。

1体表颜料着色法一般对短期试验的白色动物可用颜料涂搽被毛的方法标记。

常用的涂染化学药品有：

红色：

0.5中性红或品红溶液；

黄色：

35苦味酸溶液或8090苦味酸酒精饱和液；

咖啡色：

2硝酸银溶液；

黑色：

煤焦油酒精溶液。

11/1/202228左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。

红色表示十位数,用黄色表示个位数。

11/1/2022292个体耳号标记法3.个体断趾标记法4.耳号钳标记法5.挂牌法11/1/202230第六节常规采血方法一、大、小鼠的采血方法1颈静脉或颈动脉采血2股静脉或股动脉采血3心脏采血4尾部采血5眼眶采血6断头取血11/1/202231颈静脉或颈动脉采血尾部采血11/1/202232心脏采血11/1/202233二、家兔的采血方法1心脏采血2耳中央动脉采血3耳静脉采血11/1/202234采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。

凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。

当需血量较多时可作静脉采血。

静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。

而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。

11/1/202235采血场所有充足的光线；

室温夏季最好保持在2528，冬季，1520为宜；

采血用具有采用部位一般需要进行消毒；

采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；

若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。

采血时要注意11/1/202236部位动物种类尾静脉大鼠、小鼠耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠d舌下静脉兔e腹壁静脉青蛙、蟾蜍f冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅取少量血11/1/202237部位动物种类动物种类后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫耳中央动脉兔颈静脉狗、猫、兔心脏豚鼠、大鼠、小鼠断头大鼠、小鼠翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅取中量血11/1/202238部位动物种类股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔心脏狗、猴、猫、兔颈静脉马、牛、山羊、绵羊摘眼球大鼠、小鼠取大量血11/1/202239动物种类最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴15604.最大安全采血量与最小致死采血量11/1/202240急救措施动物实验过程中，可因麻醉药过量、出血过多、分泌物或血块堵塞气管造成窒息以及某种药物原因引起动物血压、呼吸不规则等现象，此时应立即进行急救处理措施。

急救处理措施首先要迅速排查原因，并中断诱因（如止血、停药、排除分泌物等），然后对症实施急救措施。

11/1/202241一、呼吸、心跳（血压）的改变动物实验过程中，需密切观察实验动物的呼吸、心跳及血压的变化，一者它们是实验反应的数据指标，二者是实验动物状态的主要指征。

尤其对呼吸的观察，因为动物的死亡首先是呼吸的停止。

（一）诱发原因1麻醉给药速度过快或过量：

实施静脉给药麻醉，可因给药速度过快或过量导致呼吸停止。

因此，为防止麻醉剂过量，注射速度一定不要过快，严密观察动物状况，若需追加麻醉剂，一次不宜超过总量的1/5。

11/1/2022422气道不畅或堵塞：

常见于麻醉后，因为气管分泌物增多或气管切口的出血凝块堵塞气管，动物呼吸不规则、呼吸困难甚至引起的窒息。

3大失血：

如因大动脉插管的松脱所造成的大失血。

4实验药物的作用：

如静脉注射乙酰胆碱过量或动物对其反应过强，引起心搏减弱减慢，继而出现呼吸、心跳的停止。

11/1/202243

（二）急救措施1迅速排查、中断、排除诱因。

如应用棉签清除干净气管、气管插管内的分泌物及血凝块。

必要时拔出气管插管冲洗后再行气管插管术。

2根据下列不同情况采取相应的急救措施：

（1）呼吸极慢、不规则，但心跳正常时：

给予人工呼吸-压胸法，适当给予苏醒剂。

（2）呼吸停止仍有心跳时：

实施人工呼吸，必要时可使用人工呼吸机或吸氧（吸入气中O2占95%，CO2占5）；

注射50葡萄糖液510ml；

给肾上腺素及苏醒剂。

（3）呼吸、心跳均停止时：

用l：

10000肾上腺素溶液心内注射，其余同

（2）。

11/1/202244二、大失血

（一）诱发原因多因动脉插管结扎不牢、动物挣扎，导致大动脉插管的松脱，或在进行动脉插管术时，因未放置动脉夹或动脉夹夹闭不全而剪切动脉引起。

（二）急救措施1立即止血：

应迅速手指压迫或捏住出血处（尽量不要用止血钳，以防损伤动脉和神经），然后仔细检查分离出血点，于近心端放置动脉夹，再行动脉插管术。

2补充血容量：

若失血太多，适当加快输液（生理盐水）速度，增加血容量。

3注射强心剂：

静脉注射110000肾上腺素0.5ml。

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