高中生物《蛋白质工程的原理和应用》微课精讲+知识点+课件教案习题Word文档格式.docx
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从预测蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质。
难点：
目前科学家对大多数蛋白质的高级结构了解还很不够。
知识点三：
蛋白质工程的进展和前景
在食品工业、日用品工业方面有着广泛的应用前景，目前来看成功的例子很少。
精品课件：
教案：
1.教学目标
1.说出蛋白质工程崛起的缘由。
2.概述蛋白质工程的基本原理。
3.举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。
2.本节电子教材
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3.图片素材
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4.教材旁栏问题和练习及答案
从社会中来
你见过用细菌画画吗？
右图是用发出不同颜色荧光的细菌“画”的美妙图案。
这些细菌能够发出荧光，是因为在它们的体内导入了荧光蛋白的基因。
最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白，科学家通过改造它，获得了黄色荧光蛋白等。
这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用那么，科学家是怎样对蛋白质分子进行设计和改造的呢？
【提示】科学家解析了多管水母绿色荧光蛋白的晶体结构，并利用计算机进行辅助设计，在此基础上再采用定点突变的技术将绿色荧光蛋白发光基团正下方的第203位的苏氨酸替换为略氨酸，从而获得了一种新的绿色荧光蛋白的衍生物一一黄色荧光蛋白。
旁栏思考题
你知道人类蛋白质组计划吗？
它与蛋白质工程有什么关系？
我国科学家承担了什么任务？
【提示】人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后，生命科学乃至自然科学领域重大的国际合作科研项目。
2001年，国际人类蛋白质组组织宣布成立。
2003年，该组织正式提出启动两项重大国际合作项目：
一项是由中国科学家牵头执行的“人类肝脏蛋白质组计划”；
另一项是由美国科学家牵头执行的“人类血浆蛋白质组计划”；
由此拉开了人类蛋白质组计划的帷幕。
“人类肝脏蛋白质组计划”是国际上第一个人类组织器官的蛋白质组计划，由我国贺福初院土牵头，这是中国科学家第一次领衔重大国际科研协作计划。
它的目标是通过对肝脏蛋白质高通量、规模化的研究,解析肝脏蛋白质在生理、病理过程中的功能意义，为重大肝病的预防、诊断、治疗和新药的研发提供重要的科学依据。
2010年，该计划“两谱、两图、三库”的目标初步实现。
我国科学家完成了人类肝脏蛋白质组表达谱和修饰谱，绘制了蛋白质相互作用连锁图和定位图。
“三库”则是建立符合国际标准的肝脏标本库、发展规模化抗体制备技术并建立肝脏蛋白质抗体库和建立完整的肝脏蛋白质组数据库。
人类蛋白质组计划取得的成果有力推动了蛋白质工程的发展，为它提供了重要的理论支持。
2014年6月，中国人类蛋白质组计划启动。
思考与讨论
讨论
1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？
请把相应的碱基序列写出来。
【答案】每种氨基酸都有对应的密码子，只要査一下密码子表,就可以将题中的氨基酸序列的编码序列査出来。
但是由于题中的氨基酸序列中有几个氨基酸是由多个密码子编码的，因此其碱基排列组合起来就比较复杂，至少可以排列出32种，可以让学生根据学过的排列组合的知识自己排列一下。
首先应该根据密码子推出mRNA序列为GCU（或C，或A，或G）UGGAAA（或GGAA（或G）UUU（或C），再根据碱基互补配对原则推出脱氧核苷酸序列为CGA（或G，或T或C）ACTT（或C）CTT（或C）AAA（或G）。
2.确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因？
【答案】确定目的基因的碱基序列后，可以人工合成目的基因或从基因文库中获取目的基因。
对基因的改造经常会用到基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等。
异想天开
能不能根据人类需要的蛋白质的结构，设计相应的基因，导入合适的宿主细胞中，让宿主细胞生产人类所需要的蛋白质食品呢？
【提示】理论上讲可以，但目前还没有真正成功的例子。
利用改造后的动物细胞、微生物细胞等可以生产人类需要的蛋白质，但这些蛋白质往往都是自然界中已经存在的蛋白质，并非完全是人工设计出来的、自然界中不存在的蛋白质。
主要原因是蛋白质的高级结构非常复杂，人类对大多数蛋白质的高级结构和蛋白质在生物体内如何行使功能了解得还不够，很难设计出一个全新的而又具有功能的蛋白质。
即使设计并获得了一个全新的蛋白质，它的生理生化特性、用它生产的蛋白质食品的安全性等都需要长期深入的研究。
到社会中去
酶制剂在食品工业、医药工业等方面都有广泛的应用。
现在，酶制剂的生产已经形成一个市场可观的新兴产业。
蛋白质工程的应用又为酶制剂产业的发展提供了强大助力。
请查阅资料，了解我国酶制剂产业发展的现状和趋势，分析蛋白质工程在酶制剂产业中的作用。
【提示】酶用作工业催化剂，比无机催化剂具有更大的优越性，主要体现在以下几个方面：
由于酶促反应能在常温、常压和中性pH条件下进行，因此可以节省大量的能源和设备投资；
生产过程中不会造成严重的污染，符合环境保护的要求；
生产过程简单、效率高，产品质量好，生产成本低。
因此,酶制剂在工业领域得到了广泛的应用。
近年来，通过引进国外先进设备、优良菌种以及开发新型酶制剂，我国酶制剂产业保持了较快的增长态势，品种越来越丰富，产品的市场竞争力也在不断提升。
2016年，我国工业酶制剂年产量达120万吨，年增长率保持在10%左右。
在全球范围内，我国酶制剂的市场份额已占到了30%左右，我国进入酶制剂生产大国的行列。
在酶制剂产业中，蛋白质工程被广泛用于开发酶的新品种或改进酶的性能，如提高酶的热稳定性，增加某些被用作去污剂的酶的去污效率等。
练习与应用
一、概念检测
1.蛋白质工程可以说是基因工程的延伸。
判断下列相关表述是否正确。
（1）基因工程需要在分子水平对基因进行操作，蛋白质工程不需要对基因进行操作。
（x）
（2）蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列。
（x）
（3）蛋白质工程可以改造酶，提高酶的热稳定性。
（
√）
2.
蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，它最终要达到的目的是（D）
A.分析蛋白质的三维结构
B.研究蛋白质的氨基酸组成
C.获取编码蛋白质的基因序列信息
D.改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求
3.水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。
研究人员发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。
在这项替换研究中，目前可行的直接操作对象是（A）
A.基因
B.氨基酸
C.多肽链
D.蛋白质
二、拓展应用
T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，但是它在温度较高时容易失去活性。
为了提高T4溶菌酶的耐热性，科学家首先对影响T4溶菌酶耐热性的一些重要结构进行了研究。
然后以此为依据对相关基因进行改造，使T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸。
于是，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，T4溶菌酶的耐热性得到了提高。
这项工作属于什么工程的范畴？
在该实例中引起T4溶菌酶空间结构发生改变的根本原因是什么？
如果要将该研究成果应用到生产实践，还需要做哪些方面的工作？
【提示】这项工作属于蛋白质工程的范畴。
引起T4溶菌酶空间结构发生改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化。
如果要将改造后的T4溶菌酶应用于生产实践,还有很多工作需要做。
例如由于改造后酶的空间结构发生了变化,因此它的一些基本特性需要重新明确,包括它能耐受的温度范围、催化反应的最适温度、酶活力的大小等;
需要建立规模化生产该酶的技术体系,评估生产成本等。
复习与提高
1.某动物体内含有研究者感兴趣的目的基因，研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存。
该质粒含有氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、LacZ基因及一些酶切位点，其结构和简单的操作步骤如下图所示。
请根据以上信息回答下列问题。
（1）在第②步中，应怎样选择限制酶？
【答案】应选择用相同的限制酶或切割能产生相同末端的限制酶切割质粒和含有目的基因的DNA片段，并且注意限制酶的切割位点不能位于目的基因的内部，以防破坏目的基因，限制酶也不能破坏质粒的启动子、终止子、标记基因、复制原点等结构。
（2）在第③步中，为了使质粒DNA与目的基因能连接，还需要在混合物中加入哪种物质？
【答案】加入DNA连接酶。
（3）选用含有AmpR和LacZ基因的质粒进行实验有哪些优势？
【提示】该质粒便于进行双重筛选。
标记基因AmpR基因可用于检测质粒是否导入了大肠杆菌，一般只有导入了质粒的大肠杆菌才能在添加了青霉素的培养基上生长。
而由于LacZ基因的效应，这些生长的菌落可能出现两种颜色：
含有空质粒（没有连接目的基因的质粒）的大肠杆菌菌落呈蓝色；
含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色。
（4）含有重组质粒的大肠杆菌菌落将呈现什么颜色？
为什么？
【答案】含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色。
因为目的基因的插入破坏了LacZ基因的结构，使其不能正常表达，形成β-半乳糖苷酶，底物X-gal也就不会被分解。
2.科学家将Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，然后在培养ES细胞的培养基上培养这些细胞。
2〜3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。
请回答下列问题。
（1）在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是什么？
【答案】逆转录病毒是载体，能将外源基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。
（2）如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？
【提示】可以设置对照组。
将转入外源基因和没有转人外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，并确保其他培养条件相同。
如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，就可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。
（3）如果要了解Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因在诱导iPS细胞时，每个基因作用的相对大小，该如何进行实验？
请你给出实验设计的思路。
【提示】可以依次去掉1个基因，将其他3个基因转入小鼠成纤维细胞中，然后通过与转入4个基因的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较，来推测缺失的那个基因对诱导iPS细胞的影响，进而判断每个基因作用的相对大小。
（其他合理答案均可）
（4）若将病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞，再使它转化为需要的细胞，用这些细胞给该病人治病，这是否会引起免疫排斥反应？
iPS细胞具有分裂活性，用它进行治疗时可能存在什么风险？
【提示】不会引起免疫排斥反应，因为在诱导转化的过程中细胞的遗传物质没有发生变化，理论上产生的还是“自体”细胞。
iPS细胞拥有分化为各种细胞的潜能，因此存在分化成肿瘤细胞的风险。
3.
水稻根部一般没有根瘤菌，在种植时常需要施加氮肥。
科学家想利用基因工程技术来减少施用氮肥的生产成本及可能造成的环境污染，他们提出了以下两种方案。
方案一 把根瘤菌的固氮相关基因导入水稻根系微生物中，使
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