常用蛋白质分子量标准参照物精Word格式文档下载.docx
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十一、层析法常用数据表及性质
(一)离子交换纤维素
目前常用的离子交换纤维素列于下表
DEAE-
纤维素
形状
长度
(微米)
交换当量
(毫克当量/克)
蛋白吸附容量(毫克/克)
床体积(毫升/克)
胰岛素(pH8.5)
牛血清清蛋白(pH8.5)
pH6.0
pH7.5
DE-22
DE-23
DE-32
DE-52
CM-纤维素
CM-22
CM-23
CM-32
CM-52
改良纤维性*
同上(除细粒)
微粒性(干粉)
同上(溶胀)
改良纤维性
12~400
18~400
24~63
1.0±
0.1
0.6±
0.06
750
850
(pH5.0)
600
1,260
450
660
7S-γ球蛋白(pH5.0)
150
400
7.7
8.3
6.0
pH5.0
9.1
6.8
6.3
6.7
*:
英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。
还有DE-11,纤维性,50~250微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。
(二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
型号
排阻的下限
(Mr)
分级分离的范围
膨胀后的床体积
(mL/g干凝胶)
膨胀所需最少时间
(室温,小时)
Bio-gel-P-2
Bio-gel-P-4
Bio-gel-P-6
Bio-gel-P-10
Bio-gel-P-30
Bio-gel-P-60
Bio-gel-P-100
Bio-gel-P-150
Bio-gel-P-200
Bio-gel-P-300
1600
3600
4600
10000
30000
60000
100000
150000
200000
300000
200~2000
500~4000
1000~5000
5000~17000
20000~50000
30000~70000
40000~100000
50000~150000
80000~300000
100000~400000
3.8
5.8
8.8
12.4
14.9
19.0
24.0
34.0
40.0
2~4
10~12
24
48
注:
上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-RadLaboratories,Rich-mond,California,U.S.A.
(三)琼脂糖凝胶的技术数据
(琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在0~4℃,pH4~9范围内是稳定的。
)
名称、型号
凝胶内琼脂糖百分
含量(W/W)
排阻的下限(Mr)
分级分离的范围(Mr)
生产厂商
Sagavac10
Sagavac8
Sagavac6
Sagavac4
Sagavac2
10
8
6
4
2
2.5×
105
7×
2×
106
15×
150×
1×
104~2.5×
104~7×
5×
104~2×
105~15×
107
SeravacLaboratories,
Maidenhead,England
Bio-GelA-0.5M
Bio-GelA-1.5M
Bio-GelA-5M
Bio-GelA-15M
Bio-GelA-50M
Bio-GelA-150M
1
0.5×
1.5×
50×
<
104~1.5×
104~5×
4×
104~15×
105~50×
106~150×
Bio-RadLaboratories,
California,U.S.A.
(四)凝胶过滤层析介质的技术数据
凝胶过滤介质名称
分离范围
颗粒
大小
(μm)
特性/应用
pH稳定性工作
耐压(Mpa)
最快
流速
(cm/h)
Superdex30
Superdex75
Superdex200
Superose6
Superose12
Sephacryl
S-100HR
S-200HR
S-300HR
S-400HR
Sepharose6
FastFlow
Sepharose4
Sepharose2B
Sepharose4B
Sepharose6B
Sepharose
CL-2B
CL-4B
CL-6B
10000
3000~70000
300010000~600000
5000~5×
1000~300000
1000~100000
5000~250000
10000~1.5×
20000~8×
10000~4×
60000~20×
70000~40×
24~44
20~40
25~75
平均90
60~200
45~165
肽类、寡糖、小蛋白等
重组蛋白、细胞色素
单抗、大蛋白
蛋白、肽类、多糖、核酸
蛋白、肽类、寡糖、多糖
肽类、小蛋白
蛋白,如清蛋白
蛋白、抗体
多糖、具延伸结构的大分
子如蛋白多糖、脂质体
巨大分子
巨大分子如重组乙型肝
炎表面抗原
蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)
蛋白、多糖
蛋白、多糖
3~12
3~11
2~12
4~9
3~13
0.3
0.4
0.7
0.2
0.004
0.008
0.02
0.005
0.012
100
30
20~39
300
250
11.5
14
15
26
分离
范围
pH
稳定性
工作
干凝胶
溶胀体积
(mL/g)
溶胀最少
平衡时间(h)
最快
流速
室温
沸水
SephadexG-10
SephadexG-15
SephadexG-25Coarse
SephadexG-25Medium
SephadexG-25Fine
SephadexG-25Superfine
SephadexG-50
Coarse
SephadexG-50Medium
SephadexG-50Fine
SephadexG-50Superfine
SephadexG-75
SephadexG-75Superfine
SephadexG-100
Superfine
SephadexG-150
SephadexG-200
700
1500
1000~5000
1000~5000
1500~30000
3000~80000
4000~1.5×
4000~1×
5000~3×
5000~1.5×
5000~6×
5000~2.5×
干粉40~120
干粉100~300
干粉50~150
干粉20~80
干粉10~40
脱盐及交换缓冲液用
小分子蛋白质分离
中等蛋白质分离
稍大蛋白质分离
较大蛋白质分离
2~13
2~10
2~3
2.5~3.5
4~6
9~11
9~1