江苏专用高考生物二轮复习 非选择题冲击高分规范练 命题点5 生物技术实践Word格式文档下载.docx

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a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌

b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落

c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量

d．可以通过逐步提高培养基中的甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和________供应。

为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×

16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上________色细胞的个数应不少于________，才能达到每毫升3×

109个活细胞的预期密度。

答案　

（1）pH　高压蒸汽（湿热）　

（2）50℃　（3）a、b、d（4）氧气　无　30

解析　

（1）配制培养基时，进行计算、称量、溶解、定容后，需先调节pH再分装到锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌。

（2）倒平板时的培养基温度约为50℃，冷凝后倒置培养。

（3）平板划线时，接种针、接种环使用前和每次划线后都需要进行灼烧灭菌，以免造成杂菌污染，a正确；

划线时不能划破培养基表面，否则不能形成正常菌落，b正确；

挑取菌落时，应挑取多个不同的菌落，分别测定酵母细胞中蛋白质含量，c错误；

逐步提高培养基中甲醇的浓度，能筛选出其中的耐受菌，获得甲醇高耐受菌株，d正确。

（4）酵母是兼性厌氧型真菌，在有氧条件下可大量繁殖。

酵母扩大培养时，需保证充足的营养和氧气等条件。

由题中信息“经等体积台盼蓝染液染色”可知，计数室中培养液容积实际只有0.1÷

2＝0.05mm3。

设5个中方格中无色（活细胞不能被台盼蓝染色）的细胞数目为x个，则3×

109＝x/5×

25×

1000×

1000÷

0.05，解得x＝30。

2．（2017·

江苏，31）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。

小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。

请回答下列问题：

（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________________________________________________________________________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐__________，以达到富集酚降解菌的目的。

若上图平板中菌落过于密集，应进一步____________，以便于菌落计数与分离。

制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加____________。

（3）下图为连续划线法示意图，在图中________（填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。

先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为____________________。

管号

1

2

3

4

5

6

苯酚浓度/（mg·

L－1）

如果废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释________（填序号：

①5　②10　③20）倍后，再进行比色。

答案　

（1）蛋白胨、苯酚　

（2）增加　稀释涂布　凝固剂

（3）③　（4）0、0.2、0.4、0.6、0.8　③

解析　

（1）含碳有机物如蛋白胨、苯酚均可作为异养型细菌的碳源。

（2）为达到富集苯酚降解菌的目的，培养过程中随转接次数增加，应逐渐提高苯酚用量。

若平板中菌落过于密集，为便于分离计数，则应进一步稀释涂布；

进行分离计数应制备“固体”培养基，故平板培养基中除需水、营养物质外，还需添加凝固剂。

（3）连续划线法分离菌种时，在最后的划线区，菌种分散最充分，最宜获得单菌落。

（4）制作系列浓度梯度进行显色反应应设置无菌水作对照组（苯酚浓度为0），并设置等差密度梯度，故1～5号比色管中苯酚浓度依次为0、0.2、0.4、0.6、0.8。

若废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则降解后残留液中苯酚浓度为50×

21%＝10.5（mg/L），宜将其稀释20倍方可达到适宜比色管苯酚浓度。

3．（2016·

江苏，29）为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响，以及固定化藻对含Zn2＋污水的净化作用，科研人员用筛选到的一株绿球藻进行试验，流程及结果如下。

―→―→

（1）实验中的海藻酸钠作用是__________________，CaCl2的作用是________________。

（2）为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物，并保持绿球藻活性，宜采用__________________洗涤。

图1中1.0%海藻酸钠组培养24h后，移去凝胶球，溶液呈绿色，原因是________________________________________________________________________。

（3）为探索固定化藻对含Zn2＋污水的净化作用，应选用浓度为________海藻酸钠制备凝胶球。

（4）图2中空白凝胶球组Zn2＋浓度下降的原因是____________________________。

结合图1和图2分析，固定化藻的实验组24～48h间Zn2＋浓度下降速度较快的主要原因是____________________________；

72～96h间Zn2＋浓度下降速度较慢的原因有

________________________________________________________________________。

答案　

（1）包埋绿球藻（包埋剂）　与海藻酸钠反应形成凝胶球（凝固剂）　

（2）培养液（生理盐水）　海藻酸钠浓度过低（凝胶球孔径过大）　（3）2.0%　（4）凝胶球吸附Zn2＋　绿球藻生长（增殖）速度快　绿球藻生长（增殖）速度减慢，溶液中Zn2＋浓度较低

解析　

（1）海藻酸钠溶液在CaCl2溶液中形成凝胶球，包埋绿球藻。

（2）可采用培养液或生理盐水洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物，并保持绿球藻活性。

溶液呈绿色，说明固定化的绿球藻数量少，原因是海藻酸钠浓度过低（凝胶球孔径过大）。

（3）根据图1可知，浓度为2.0%的海藻酸钠制备的凝胶球最有利于绿球藻的繁殖。

（4）空白凝胶球容易吸附Zn2＋，导致溶液中Zn2＋浓度下降；

根据图1和图2分析，固定化藻的实验组24～48h间绿球藻数量增加最快（处于“S”型曲线的K/2值处），导致Zn2＋浓度下降速度较快；

72～96h间绿球藻数量基本不再增加。

4．（2015·

江苏，31）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。

为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是________（填序号）。

①酒精灯　②培养皿　③显微镜　④无菌水

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________________________________________________。

（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是________________________________________________________________________。

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见下图）。

图中降解圈大小与纤维素酶的__________有关。

图中降解纤维素能力最强的菌株是______（填图中序号）。

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株________更适合用于人工瘤胃发酵，理由是________________________________________________________________________。

答案　

（1）③　

（2）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果　（3）避免培养基污染棉塞　（4）量与活性　①　（5）J4　发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

解析　

（1）样品稀释和涂布平板的操作不需要显微镜。

（2）涂布平板时若培养基表面的菌悬液过多，菌体堆积，会影响分离效果。

（3）试管口粘附的培养基，需要用酒精棉球擦净，避免培养基污染棉塞。

（4）菌株产生的降解纤维素酶的量越多、活性越高，会使降解圈越大。

降解纤维素能力最强的菌株是①，因其菌株菌落最小，但降解圈最大。

（5）分析图中曲线可知，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，而发酵过程会产热和酸，故该菌株最适合用于人工瘤胃发酵。

5．（2014·

江苏，30）为了获得β胡萝卜素产品，某小组开展了产β胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。

（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是________________________________；

为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该________________________。

（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是______________________________。

（3）下图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是________。

（填序号）

①安全阀、放气阀、压力表

②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表

④放气阀、安全阀、温度表

（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是___________________________________________。

（5）为增加β胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是__________________________；

研磨时__________（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是____________________________。

答案　

（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）　用牛皮纸（报纸）包扎器皿　

（2）抑制细菌（放线菌）生长（3）①　（4）接种环温度过高，菌被杀死　（5）有助于研磨充分　不需要　β胡萝卜素较耐酸

解析　

（1）培养皿灭菌常用的方法有湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）、干热灭菌等。

将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎，避免灭菌后的再次污染。

（2）青霉素能抑制细菌和放线菌的生长繁殖，但对酵母菌等真菌不起作用，因此添加青霉素可筛选出酵母菌。

（3）图中乙连接软管，为排（放）气阀，