江苏学业水平测试生物实验专题Word文件下载.doc
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选材→制备组织样液→加入斐林试剂→水浴加热→显色(砖红色沉淀)
实验结果分析:
还原性糖:
如果出现砖红色沉淀,则待测样品中含有还原糖,反之;
则没有。
注意事项:
①防止颜色的干扰:
取材白色或近于白色,如:
苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料。
②淀粉和蔗糖不是还原性糖。
③还原糖鉴定,必需水浴加热,不能用酒精灯直接加热。
若不加热则无砖红色沉淀出现。
④留出一些样液,以便与鉴定样液的颜色变化作对比。
⑵蛋白质的鉴定
材料:
双缩脲试剂:
(A液)0.1g/mLNaOH溶液、(B液)0.01g/mLCuSO4溶液(分开使用)
选材与制备:
黄豆浆滤液或蛋白稀释液(使用蛋清做实验材料要稀释)
呈色反应:
取2mL组织样液,向试管中加入1mLA液,摇匀;
再加入B液4滴,并摇匀。
组织样液变成紫色。
注意事项
①双缩脲试剂AB液分开使用,先加1mL0.1g/mLNaOH溶液,再加4滴0.01g/mLCuSO4溶液或者先加A液,后加B液。
②用鸡蛋清作实验材料,鸡蛋清必须稀释,以免试验后黏住试管,不易洗刷。
③留出一些样液,以便与鉴定样液的颜色变化作对比。
⑶脂肪的检测和观察
方法一:
花生种子匀浆+3滴苏丹III染液→橘黄色
方法二:
(此法需要使用显微镜,因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴)
取材:
做脂肪的鉴定实验,应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最佳,实验前需浸泡3-4h。
将子叶削成薄片
①选取最薄的切片
制片②在切片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液(染色3min),染色时间不宜过长
③去浮色(1-2滴体积分数50%的酒精溶液,因为苏丹Ⅲ溶于酒精)
④制成临时装片(吸去酒精,加1滴蒸馏水,盖上盖玻片)
观察:
使用显微镜。
先用低倍镜观察,再用高倍镜观察
结论:
视野中有被染成橘黄色的脂肪颗粒,说明有脂肪存在。
花生种子切片要薄,只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。
【小结】①斐林试剂与双缩脲试剂的比较
试剂
斐林试剂
双缩脲试剂
鉴定成分
还原糖
蛋白质
鉴定原理
还原糖中的醛基(-CHO)在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu2O沉淀
双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性溶液中能与Cu2+结合生成紫色络合物,蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键
试剂浓度
甲液:
质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液;
乙液:
质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
A液:
B液:
质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
使用方法
甲液、乙液混合均匀后,再加入样液
先加A液造成碱性环境,再加B液
使用条件
加热(水浴50~65℃)
不加热,摇匀即可
实验现象
浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
②溶液颜色的变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色
③脂肪的鉴定可以使用花生匀浆或花生切片来做,后者需要使用显微镜
④鉴定的材料一定要选择白色的
⑤斐林试剂只能证明是不是还原性糖,不能确定是哪一种还原性糖
考点2观察植物细胞的质壁分离和复原
【实验原理】:
(B)
成熟的植物细胞的原生质层(细胞膜、液泡膜、两层膜之间细胞质)相当于一层半透膜,细胞液(液泡内液体)具有一定的浓度,能够渗透失水和吸水。
原生质层比细胞壁的收缩性大,细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
【实验材料用具、实验方法步骤】:
(A)
(1)材料用具:
紫色洋葱表皮,0.3g/ml蔗糖溶液,清水,载玻片,镊子,滴管,显微镜等
条件:
有大液泡、有颜色、成熟的植物细胞,便于观察实验现象。
注意:
①一般不选择细菌细胞,它能发生质壁分离,但现象不明显。
②不能选择动物细胞,它无细胞壁,不能发生质壁分离现象。
(2)实验方法步骤
步
骤
注意问题
分
析
1.制作洋葱表皮的临时装片。
在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平。
盖上盖玻片。
盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。
防止装片产生气泡。
2.观察洋葱(或水绵)细胞
可看到:
液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。
液泡含花青素,所以液泡呈紫色。
先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。
3.观察质壁分离现象。
从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
镜检。
观察到:
液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。
原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。
重复几次
糖液浓度不能过高
蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁分离。
重复是为了使细胞完全浸入蔗糖溶液
糖液浓度过高细胞会严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。
4.观察细胞质壁分离的复原现象。
从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状。
发生质壁分离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。
重复几次。
细胞液的浓度高于外界溶液,细胞通过渗透作用吸水,所以发生质壁分离复原现象。
不能久置因为细胞失水过久,也会死亡。
为了使细胞完全浸入清水中。
(1)本实验没有设置对照实验,实验前后自身对照。
(2)本实验用显微镜观察了三次,第一次与第二次形成对照,第三次与第二次形成对照,该对照方法为自身对照。
(3)只有成熟的植物细胞原生质层和细胞壁可以分离,而未成熟的植物细胞细胞膜和细胞壁是紧贴在一起的,无法正常分离。
(4)质壁分离时,在细胞壁和细胞膜间充满了降低浓度的外界溶液,原因是细胞壁具有全透性。
(5)当以可吸收的物质作溶质时(如甘油、尿素、KNO3、乙二醇等),可出现质壁分离及自动复原现象。
例如使用质量浓度为1mol•L-1的KNO3溶液,因为K+和NO3-可被细胞吸收,使细胞液浓度增大,所以细胞先发生质壁分离后又自动复原。
(尿素、甘油、乙二醇等现象同上,但原理不同)
原因:
①自由扩散发生质壁分离②主动运输吸收K+和NO3-③自由扩散吸水
【实验结果的分析】:
(C)
成熟的植物细胞能与外界溶液发生渗透作用,
外界溶液浓度>
细胞液浓度时,细胞失水(发生质壁分离现象)
外界溶液浓度<
细胞液浓度时,细胞吸水(发生质壁分离复原现象)
考点3探究影响酶活性的因素
【实验原理】(B)
温度或pH等能够影响酶的催化活性,在一定范围内,随着温度或pH的升高酶活性升高;
越过这一范围酶活性下降,甚至失活。
温度影响酶的活性鉴定原理:
温度影响酶的活性,从而影响淀粉的水解,滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性
H影响酶的活性鉴定原理:
pH影响酶的活性,从而影响O2的生成量,可用点燃但无火焰的卫生香燃烧的情况来检验O2生成量的多少。
【实验设计】(B)
a.材料:
新配置的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。
b.方法步骤
I.探究温度对酶活性的影响
鉴定原理:
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2
放置在不同温度环境下5分钟
0℃
100℃
60℃
3
加入新配置的α-淀粉酶溶液
1mL
4
完成反应
5min
5
滴入碘液
2滴
观察结果
变蓝
不变蓝
注:
①实验室使用的α
淀粉酶最适温度为60℃。
②由于H2O2不稳定,因此探究温度对酶活性影响时,不选择H2O2作反应物。
③本实验不宜选用斐林试剂鉴定,温度是干扰条件。
④本实验中步骤2、步骤3一定不能颠倒顺序,否则会使实验失败,即先控制条件再混合。
变量分析:
II.探究pH对酶活性的影响
(1)原理
①反应原理:
H2O2过氧化氢酶H2O+O2。
②鉴定原理:
(2)步骤
加入过氧化氢溶液
加入蒸馏水
-
加入盐酸
加入NaOH溶液
滴加肝脏研磨液
6
37℃水浴
7
检验
放入带火星的木条
不能够复燃
能够复燃
试管内气泡产生量
很少
少
3.【实验结果的分析】(C)
(1).说明温度过高和过低均不利于酶活性的发挥,在适宜温度下酶的活性才最高
(2).产生气泡多的试管中酶活性越高。
只有在适宜PH条件下酶的活性才最高
(3).若要探究该酶的最适pH,实验设计思路如下:
考点4叶绿体中色素的提取和分离
①提取原理:
叶绿体中含有叶绿素和类胡萝卜素,这两类色素都溶于有机溶剂无水乙醇中,不溶于水。
②分离原理:
利用色素在层析液中的溶解度不同进行分离,溶解度大的在滤纸上扩散得快,反之则慢。
这样,色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。
【实验材料用具、实验方法步骤】(A)
过程
操作目的
提取色素
(1)
选新鲜绿色的叶片
使滤液中色素含量高
(2)
研磨时加无水乙醇
溶解色素
(3)
加少量SiO2和CaCO3
研磨充分和保护色素
(4)
迅速、充分研磨
防止乙醇挥发,充分溶解色素
(5)
盛放滤液的试管管口加棉塞
防止乙醇挥发和色素氧化
分离色素
滤纸预先干燥处理
使层析液在滤纸上快速扩散
滤液细线要直、细、匀
使分离出的色素带平整不重叠
滤液细线干燥后再画一两次
使分离出的色素带清晰分明
滤液细线不触及层析液
防止色素直接溶解到层析液中
4、色素提取液