常用蛋白质分子量标准参照物精Word文件下载.docx

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2500

十一、层析法常用数据表及性质

(一)离子交换纤维素

目前常用的离子交换纤维素列于下表

DEAE-

纤维素

形状

长度

(微米)

交换当量

(毫克当量/克)

蛋白吸附容量(毫克/克)

床体积(毫升/克)

胰岛素(pH8.5)

牛血清清蛋白(pH8.5)

pH6.0

pH7.5

DE-22

DE-23

DE-32

DE-52

CM-纤维素

CM-22

CM-23

CM-32

CM-52

改良纤维性*

同上(除细粒)

微粒性(干粉)

同上(溶胀)

 

改良纤维性

12~400

18~400

24~63

1.0±

0.1

0.6±

0.06

750

850

(pH5.0)

600

1,260

450

660

7S-γ球蛋白(pH5.0)

150

400

7.7

8.3

6.0

pH5.0

9.1

6.8

6.3

6.7

*:

英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。

还有DE-11,纤维性,50~250微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。

(二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据

型号

排阻的下限

(Mr)

分级分离的范围

膨胀后的床体积

(mL/g干凝胶)

膨胀所需最少时间

(室温,小时)

Bio-gel-P-2

Bio-gel-P-4

Bio-gel-P-6

Bio-gel-P-10

Bio-gel-P-30

Bio-gel-P-60

Bio-gel-P-100

Bio-gel-P-150

Bio-gel-P-200

Bio-gel-P-300

1600

3600

4600

10000

30000

60000

100000

150000

200000

300000

200~2000

500~4000

1000~5000

5000~17000

20000~50000

30000~70000

40000~100000

50000~150000

80000~300000

100000~400000

3.8

5.8

8.8

12.4

14.9

19.0

24.0

34.0

40.0

2~4

10~12

24

48

注:

上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-RadLaboratories,Rich-mond,California,U.S.A.

(三)琼脂糖凝胶的技术数据

(琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在0~4℃,pH4~9范围内是稳定的。

名称、型号

凝胶内琼脂糖百分

含量(W/W)

排阻的下限(Mr)

分级分离的范围(Mr)

生产厂商

Sagavac10

Sagavac8

Sagavac6

Sagavac4

Sagavac2

10

8

6

4

2

2.5×

105

106

15×

150×

104~2.5×

104~7×

104~2×

105~15×

107

SeravacLaboratories,

Maidenhead,England

Bio-GelA-0.5M

Bio-GelA-1.5M

Bio-GelA-5M

Bio-GelA-15M

Bio-GelA-50M

Bio-GelA-150M

1

0.5×

1.5×

50×

<

104~1.5×

104~5×

104~15×

105~50×

106~150×

Bio-RadLaboratories,

California,U.S.A.

(四)凝胶过滤层析介质的技术数据

凝胶过滤介质名称

分离范围

颗粒

大小

(μm)

特性/应用

pH稳定性工作

耐压(Mpa)

最快

流速

(cm/h)

Superdex30

Superdex75

Superdex200

Superose6

Superose12

Sephacryl

S-100HR

S-200HR

S-300HR

S-400HR

Sepharose6

FastFlow

Sepharose4

Sepharose2B

Sepharose4B

Sepharose6B

Sepharose

CL-2B

CL-4B

CL-6B

10000

3000~70000

300010000~600000

5000~5×

1000~300000

1000~100000

5000~250000

10000~1.5×

20000~8×

10000~4×

60000~20×

70000~40×

24~44

20~40

25~75

平均90

60~200

45~165

肽类、寡糖、小蛋白等

重组蛋白、细胞色素

单抗、大蛋白

蛋白、肽类、多糖、核酸

蛋白、肽类、寡糖、多糖

肽类、小蛋白

蛋白,如清蛋白

蛋白、抗体

多糖、具延伸结构的大分

子如蛋白多糖、脂质体

巨大分子

巨大分子如重组乙型肝

炎表面抗原

蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)

蛋白、多糖

蛋白、多糖

3~12

3~11

3~11

2~12

4~9

3~13

0.3

0.4

0.7

0.2

0.2

0.004

0.008

0.02

0.005

0.012

100

30

20~39

20~39

300

250

11.5

14

15

26

分离

范围

pH

稳定性

工作

干凝胶

溶胀体积

(mL/g)

溶胀最少

平衡时间(h)

最快

流速

室温

沸水

SephadexG-10

SephadexG-15

SephadexG-25Coarse

SephadexG-25Medium

SephadexG-25Fine

SephadexG-25Superfine

SephadexG-50

Coarse

SephadexG-50Medium

SephadexG-50Fine

SephadexG-50Superfine

SephadexG-75

SephadexG-75Superfine

SephadexG-100

Superfine

SephadexG-150

SephadexG-200

700

1500

1000~5000

1000~5000

1500~30000

3000~80000

4000~1.5×

4000~1×

5000~3×

5000~1.5×

5000~6×

5000~2.5×

干粉40~120

干粉100~300

干粉50~150

干粉20~80

干粉10~40

脱盐及交换缓冲液用

小分子蛋白质分离

中等蛋白质分离

稍大蛋白质分离

较大蛋白质分离

2~13

2~10

2~3

2.5~3.5

4~6

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