镉对小鼠肝脏毒性作用的实验观察_精品文档Word文档格式.doc

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在肝脏中，镉易与巯基结合从而诱导金属硫蛋白生成镉一硫蛋白【1】，因而金属硫蛋白对急性镉中毒有应急保护作用【2】，但若镉在短期内大量转运到肝脏，便导致肝内金属硫蛋白相对不足，不能与镉有效结合而引起肝功能障碍，这可能是镉引起血清AST、ALT活性及MDA升高的原因之一。

【3】

有研究发现，染镉后，从外观上看，小鼠肝脏体积肿大，肝叶肿胀明显，肝叶间有粘连、边缘变钝，颜色紫黑，质地变硬。

【3】镜下肝实质细胞的肿胀、嗜酸性变、淋巴细胞浸润及核固缩等肝细胞损伤改变。

本研究通过动物实验，了解镉对小鼠肝脏的毒性作用，并从氧化应激方面探讨其作用机制。

二、 

实验内容与方法

（1）、实验动物：

健康成年清洁级昆明种小鼠40只，雌雄各半。

（2）、主要试剂与仪器：

l 

仪器：

7230分光光度计；

显徽镜；

分析天平；

SIGMA2K15型冷冻高速离心机；

试剂：

氯化镉 

（CdCI2，A．R．）、HNO3-HClO4、蒸馏水、生理盐水

（3）、动物分组与染毒：

体重 

18—25g的健康成年清洁级昆明种小鼠随机区组分为4组，每组10只，雌雄各办临用前以生理盐水配制CdCI2溶液，CdCI2染毒剂量分别为0.5、 

1.0、 

2.0mg/kg，染毒组小鼠皮下注射氯化镉溶液（10ml／kg体重），对照组注射生理盐水 

（10ml／kg体重），连续染毒三天。

各组小鼠最后一次染毒24小时后摘眼球采血或断头取全血，4°

下用3000r/min离心10分钟制备血清。

小鼠处死后迅速摘出肝脏，生理盐水洗净、吸干、称重。

血清用于AST、ALT生化指标测定，取部分肝脏用于SOD、MDA测定。

三、 

观察指标

1． 

AST、ALT活性的测定：

AST、ALT检测试剂盒，比色法。

2． 

MDA测定采用：

硫代巴比妥酸（TBA）法．以 

1,1,3,3—四乙氧基丙烷 

（TEP）为标准，单位以每克蛋白中与TBA反应物（TBARS）的μmol数表示。

蛋白质测定采用Lowry法，以小牛血清白蛋白为标准；

MDA检测试剂盒，比色法。

3． 

SOD测定：

SOD检测试剂盒，比色法。

4． 

肝重、体重、脏器系数：

称重法。

5． 

肝匀浆蛋白质测定：

考马氏亮蓝比色法

四、 

数据统计处理方法

各组检测指标计算均数、标准差，数据各组间比较采用F检验。

五、 

预期实验结果

1、随着CdCI2浓度的增长，AST、ALT的活性升高，提示镉对肝脏组织的损伤作用。

2、MDA测定的反应物TBARS与CdCI2的染毒浓度呈正相关，且有效应剂量关系。

文献资料：

【1】 

刘杰.用转基因动物研究金属硫蛋白对镉毒性的左右[J].中华劳动卫生职业病杂志，1998,16

（1）:

43.

【2】 

金慧英.急性镉中毒的肝脏损伤机制及金属硫蛋白的保护作用[J].中华劳动卫生职业病杂志,1998,16

（1）:

【3】 

陈敏，等.镉对小鼠肝脏的毒作用机理探讨[J].江苏大学学报 

（医学版），August2002,12（4）.

【4】 

XieJM,FunakoshiT,ShimadaH,etal.Comparativeeffectsofchelatingagentsinpulmonarytoxicityofsystemicnickelinmice[J].JApplToxicol,1996,16:

317.

【5】 

谢吉民，胡继岳，朱卫华.等.新型螯合剂对镍致小鼠肝脏毒性的影响[J].中华劳动卫生职业病杂志.1997.15（6）:

325.

【6】 

谢吉民，胡继岳，朱卫华.等.几种二六代氨基甲酸盐解镍致小鼠肝肾毒性作用比较[J].江苏医药.1998.24（增刊）:

521.

【7】 

李宏,张文昌,汪家梨,黄凌群. 

镉的雌激素样作用及相关机制体内的实验. 

[J]毒理学杂志.2005.19（3）:

231.