真菌基础及常见真菌的鉴定PPT课件PPT推荐.pptx
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其细胞膜含固醇而细菌无。
真菌的形态学变化,西安交大一附院,单细胞真菌:
圆形或卵圆形,常见于酵母菌或类酵母菌,多细胞真菌:
菌丝与孢子交织成团形成菌丝体(霉菌),二相性真菌:
37呈酵母型,25呈丝状型的真菌。
真菌形态,西安交大一附院,单细胞真菌,多细胞真菌,菌丝,西安交大一附院,真菌在适宜环境中,由孢子出芽长出芽管,逐渐延长呈丝状,称为菌丝(hypha)。
菌丝继续分支,交织成团,称为菌丝体(mycelium)。
菌丝分为营养菌丝和气生菌丝,气生菌丝中能形成孢子的叫做生殖菌丝。
有些真菌的菌丝具有隔膜,叫有隔菌丝;
有些真菌的菌丝无隔膜,叫无隔菌丝。
孢子,西安交大一附院,孢子(spore)是真菌的繁殖结构。
孢子分有性与无性两类。
孢子与细菌芽胞不同。
真菌孢子,抵抗力,不强,6070短时间即死,细菌芽胞强,煮沸短时间不死,数目,一条菌丝可产生多个孢子,一个细菌体只形成一个芽胞,作用,为繁殖方式之一,不是繁殖方式,形状,形状多种多样,圆形或椭圆形,孢子,西安交大一附院,无性孢子分为:
分生孢子:
大分生孢子小分生孢子叶状孢子:
芽生孢子关节孢子厚膜孢子孢子囊孢子,有性孢子分为:
卵孢子、接合孢子、子囊孢子及担孢子,1,西安交大一附院,4,3,2,1.大分生孢子2.关节孢子,3.孢子囊孢子4.有性孢子,培养特性,西安交大一附院,常用培养基:
沙保培养基,培养基ph值:
5.5(4.06.0),培养温度,浅部真菌:
2228,生长慢:
14w;
深部真菌:
37,生长快:
34d,菌落类型:
酵母型菌落或丝状菌落,繁殖方式,西安交大一附院,真菌依靠其孢子及菌丝进行繁殖,除有性繁殖各有其特点外,无性繁殖主要有以下几种形式:
出芽繁殖:
酵母菌的主要繁殖方式分裂繁殖芽管繁殖生隔繁殖,致病性,西安交大一附院,致病物质:
细胞壁糖蛋白(有内毒素样活性)、毒素、荚膜等。
致病方式:
条件致病性真菌感染(主要是内源性真菌),真菌性中毒(毒素引起),病原性真菌感染(主要是外源性真菌感染)真菌变态反应性疾病(皮炎、哮喘等),真菌毒素与肿瘤的关系(黄曲霉毒素等),引起皮肤和软组织感染的真菌,西安交大一附院,浅部真菌(superficialfungi)主要指侵犯机体皮肤、毛发和指(趾)甲,寄生和腐生于表皮、毛发和甲板的角质组织中,引起浅部真菌病。
分类:
表面感染真菌、皮肤癣真菌和皮下组织感染真菌三类。
临床上最多见的浅部真菌为皮肤癣真菌,包括毛癣菌属、表皮癣菌属和小孢子菌属。
足癣,西安交大一附院,股癣,左上:
白色浅表型左下:
近端甲下型,西安交大一附院,右上:
远端甲下型右下:
全甲营养不良型,甲癣的四种类型,红色毛藓菌,西安交大一附院,皮肤廯菌的特征,西安交大一附院,属名,种数,侵犯部位形态特征,皮肤大分生孢子,小分生孢子菌丝,毛癣,较多见,指毛甲发21+细长、棒形、梨形、棒形,螺旋状、鹿角,状、结节状、球拍状、破梳状,单纯细菌丝棒形,卵圆球拍状及破梳形,状菌丝较少见无,单纯菌丝,毛廯菌属,西安交大一附院,毛癣菌属(Trichophyton)属半知菌亚门丝孢菌目丛梗孢菌科,有20余种,其中14种能引起人和动物的感染。
临床上常见的有红色毛癣菌(Trichophytonrubrum)须癣毛癣菌(T.mentagrophytes,又称石膏样毛癣菌)许兰毛癣菌(T.schoenleinii,又称黄癣菌)紫色毛癣菌(T.violaceum)断发毛癣菌(T.tonsurans),微生物检验,西安交大一附院,标本采集直接显微镜检查皮屑+10%KOH液指甲+25%KOH/25%NaOH含5%甘油处理常用湿标本,不加染色,直接显微镜镜检。
皮肤癣菌感染的毛发,西安交大一附院,微生物检验,西安交大一附院,分离培养标本70%乙醇或在青、链霉素混合液内处理5min生理盐水洗3次接种沙氏琼脂斜面25培养观察菌落特征。
其他鉴定试验,毛发穿孔试验脲酶试验特殊营养需要试验,毛癣菌:
菌落灰白、红、橙或棕色,表面呈绒毛状、粉粒状或蜡样。
大分生孢子细长棒状薄壁。
菌丝有螺旋状、球拍状、鹿角状和结节状。
西安交大一附院,许兰毛癣菌,西安交大一附院,许兰毛癣菌纯培养的镜下形态,许兰毛癣菌在SDA上的菌落特征,表皮癣菌属,西安交大一附院,表皮癣菌属(Epidermophyton)目前有2个种,但只有絮状表皮癣菌(E.floccosum),能引起人类感染。
絮状表皮癣菌是一种常见的皮肤癣菌,可引起皮肤感染如股癣、足癣、体癣、手癣和甲癣。
微生物检验,西安交大一附院,皮屑和甲屑经+10%KOH液消化镜检可见分枝断裂的有隔菌丝,少见孢子。
沙氏培养基上培养后,菌落初为白色鹅毛状,以后转变为黄色粉末状。
镜下可见球拍状菌丝、卵圆形或巨大棒状薄壁大分生孢子,无小分生孢子,在陈旧培养物中可见厚膜孢子。
表皮癣菌:
菌落初为白色鹅毛状,以后变为黄绿色粉末状。
粗棒状薄壁大分生孢子。
菌丝球拍状,西安交大一附院,絮状表皮癣菌纯培养的镜下形态(乳酸酚棉蓝染色),西安交大一附院,絮状表皮癣菌在SDA上的菌落特征,絮状表皮癣菌,小孢子菌属,西安交大一附院,我国常见的有铁锈色小孢子菌、石膏样小孢子菌和犬小孢子菌等。
小孢子菌属感染皮肤和毛发,很少感染甲。
微生物检验,西安交大一附院,皮屑和毛发+10%KOH处理镜检,皮屑中有分枝断裂菌丝,在毛发中呈现小孢子镶嵌的鞘包裹着发干。
在沙氏培养基中可见白色、棕黄色或黄褐色、粉末或绒毛状菌落。
镜下可见梳状、球拍状或结节状菌丝,卵圆形小分生孢子、厚壁梭形(纺锤形)大分生孢子。
犬小孢子菌,西安交大一附院,犬小孢子纯培养的镜下形态,犬小孢子在SDA上的菌落特征,小孢子癣菌:
菌落为灰色、橘红色或棕黄色,厚壁大分生孢子,菌丝有结节状、梳状和球拍状。
西安交大一附院,引起侵袭性感染的真菌,西安交大一附院,又称深部感染真菌,是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌,主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲霉、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等,其中以隐球菌感染较常见。
组织胞浆菌为二相性真菌,假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉菌和卡氏肺孢菌等为条件致病性真菌,只有在一定条件下才引起机体致病。
假丝酵母菌属,西安交大一附院,假丝酵母菌(Candida),俗称念珠菌,生物学分类为半知菌亚门、半知菌纲、隐球菌目、假丝酵母菌属。
本属菌有150多个种,其中有11种对人有致病性,其中以白假丝酵母菌为最常见的致病菌。
白假丝酵母菌,西安交大一附院,临床意义:
女性的假丝酵母菌性阴道炎、外阴炎;
男性假丝酵母菌龟头炎、包皮炎;
体质虚弱婴儿的鹅口疮;
假丝酵母菌性肠炎、肺炎、膀胱炎、肾孟肾炎和心内膜炎等;
中枢神经系统白色假丝酵母菌病,如脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿等。
微生物检验,西安交大一附院,标本直接检查分离培养鉴定药物敏感试验抗体检测动物试验,分离培养,西安交大一附院,菌落特征:
标本接种至沙氏培养基上,25或37培养1-4d后,培养基表面可出现奶油色类酵母型菌落。
镜检可见假菌丝和芽生孢子。
鉴定试验:
芽管形成试验,厚膜孢子形成试验,糖同化或发酵试验,产色培养基鉴定。
沙氏斜面,西安交大一附院,血平板,芽管形成试验,西安交大一附院,C.albicans(green)白念,西安交大一附院,C.tropicalis(blue)热带C.parapsilosis(white)近平滑C.glabrata(pink).光滑/克柔,产色培养基,热带假丝酵母,西安交大一附院,直接显微镜检查将标本作涂片革兰染色后镜检,观察革兰阳性的假丝酵母菌。
分离培养与鉴定:
标本接种沙氏培养基上形成色暗而干燥的菌落取菌落作TZC(葡萄糖蛋白胨琼脂中加入0.05g/L氯化三苯基四氮唑,深红色或紫色)反应,取菌落作糖发酵或同化试验。
芽管形成较迟(血清中6h以上),不形成厚膜孢子、动物试验阴性。
隐球菌属,西安交大一附院,其中对人致病的最主要是新生隐球菌及其变种(新生隐球菌新生变种、新生隐球菌格特变种和新生隐球菌格鲁比变种。
新生隐球菌广泛分布于自然界,也可存在于人体体表、口腔和肠道中。
新生隐球菌(墨汁负染色),西安交大一附院,微生物检验,西安交大一附院,直接镜检:
用患者脑脊液作墨汁负染色检查是诊断隐球菌脑膜炎最简便、快速之方法。
抗原检测:
用免疫学方法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原,以乳胶凝集试验最为常用,此法简便、快速。
核酸检测、药物敏感试验、抗体检测。
分离培养:
将标本接种在沙氏培养基上,病原性隐球菌在25和37孵育均可生长,而非病原性隐球菌在37时不生长。
培养2-5d后观察菌落形态特点,并取菌落作印度墨汁负染色镜检。
新生隐球菌菌落,西安交大一附院,生化鉴定,西安交大一附院,酚氧化酶试验将菌接种L-多巴枸橼酸铁和咖啡酸培养基中,培养2-5d,新生隐球菌呈棕黑色菌落。
用已知新生隐球菌和浅白隐球菌分别作阳性和阴性对照。
脲酶试验新生隐球菌能产生脲酶,可分解尿素琼脂培养基的尿素形成NH4和CO2,使培养基pH升高,培养基由黄色变为粉红色。
白假丝酵母菌则为阴性。
糖同化及发酵试验新生隐球菌能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇,但不能发酵糖类、不同化硝酸盐。
非致病性隐球菌则不能同化肌醇。
曲霉菌,西安交大一附院,曲霉菌是条件致病菌,人体对其有极强免疫力,只有在人体免疫功能降低时才能致病。
曲霉可引起呼吸系统曲霉病;
全身性曲霉病;
曲霉可产生毒素引起机体食物中毒;
致癌作用。
最常见的是烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉。
微生物检验,西安交大一附院,直接显微镜检查取痰液等被检材料涂于载玻片上,在镜下可见分枝的菌丝、较粗的分生孢子头,顶端膨大形成顶囊,顶囊上有小梗,小梗上有许多小分生孢子。
抗原检测、抗体检测、药敏试验、皮肤试验。
分离培养与鉴定:
标本接种沙氏琼脂,室温培养后菌落形成快,呈毛状,一般为黄绿色。
将菌落涂片镜检可见特征性的分子孢子头和足细胞。
根据不同的曲霉的形态和菌落特征确定菌种。
曲霉结构图,西安交大一附院,烟曲霉菌落,西安交大一附院,烟曲霉,光镜X400,黄曲霉菌落,西安交大一附院,黄曲霉,光镜X200,黑曲霉菌落,西安交大一附院,黑曲霉,光镜X200,土曲霉菌落,西安交大一附院,土曲霉,光镜X200,构巢曲霉菌落,西安交大一附院,构巢曲霉,光镜X400,杂色曲霉菌落,西安交大一附院,杂色曲霉,光镜X400,组织胞浆菌,西安交大一附院,有两个种:
荚膜组织胞浆菌、组织孢浆菌的杜波变种。
本菌传染性极大,主要侵犯网状内皮系统,有时也可由血行播散而侵犯全身各脏器。
组织胞浆菌是一种双相型真菌,在25培养时呈典型菌丝体,在37培养时为酵母型,位于细胞内或外。
微生物检验,西安交大一附院,直接显微镜检查:
涂片染色后检查。
痰液等标本:
涂片后先用甲醇固定10min,再用姬姆萨染色镜检。
皮损、脓液等标本:
用20%KOH涂片后镜检抗原检测、药物敏感试验、