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真菌基础及常见真菌的鉴定PPT课件PPT推荐.pptx

1、其细胞膜含 固醇而细菌无。,真菌的形态学变化,西安交大一附院,单细胞真菌:圆形或卵圆形,常见于酵母菌或类 酵母菌,多细胞真菌:菌丝与孢子交织成团形成菌丝体(霉菌),二相性真菌:37呈酵母型,25呈丝状型的真 菌。,真菌形态,西安交大一附院,单细胞真菌,多细胞真菌,菌丝,西安交大一附院,真菌在适宜环境中,由孢子出芽长出芽管,逐渐延长呈丝状,称为菌丝(hypha)。菌丝继续分支,交织成团,称为菌丝体(mycelium)。,菌丝分为营养菌丝和气生菌丝,气生菌丝中能形成 孢子的叫做生殖菌丝。有些真菌的菌丝具有隔膜,叫有隔菌丝;有些真菌 的菌丝无隔膜,叫无隔菌丝。,孢子,西安交大一附院,孢子(spore

2、)是真菌的繁殖结构。孢子分有性与 无性两类。孢子与细菌芽胞不同。,真菌孢子,抵抗力,不强,6070短时间即死,细菌芽胞 强,煮沸短时间不死,数目,一条菌丝可产生多个孢子,一个细菌体只形成一个芽胞,作用,为繁殖方式之一,不是繁殖方式,形状,形状多种多样,圆形或椭圆形,孢子,西安交大一附院,无性孢子分为:,分生孢子:大分生孢子小分生孢子叶状孢子:芽生孢子关节孢子厚膜孢子 孢子囊孢子,有性孢子分为:卵孢子、接合孢子、子囊孢子及担孢子,1,西安交大一附院,4,3,2,1.大分生孢子 2.关节孢子,3.孢子囊孢子 4.有性孢子,培养特性,西安交大一附院,常用培养基:沙保培养基,培养基ph值:5.5(4.

3、06.0),培养温度,浅部真菌:2228,生长慢:14w;,深部真菌:37,生长快:34d,菌落类型:酵母型菌落或丝状菌落,繁殖方式,西安交大一附院,真菌依靠其孢子及菌丝进行繁殖,除有性繁殖各 有其特点外,无性繁殖主要有以下几种形式:,出芽繁殖:酵母菌的主要繁殖方式 分裂繁殖芽管繁殖 生隔繁殖,致病性,西安交大一附院,致病物质:细胞壁糖蛋白(有内毒素样活性)、毒素、荚膜等。致病方式:,条件致病性真菌感染(主要是内源性真菌),真菌性中毒(毒素引起),病原性真菌感染(主要是外源性真菌感染)真菌变态反应性疾病(皮炎、哮喘等),真菌毒素与肿瘤的关系(黄曲霉毒素等),引起皮肤和软组织感染的真菌,西安交大

4、一附院,浅部真菌(superficial fungi)主要指侵犯机体皮 肤、毛发和指(趾)甲,寄生和腐生于表皮、毛发和甲板的角质组织中,引起浅部真菌病。,分类:表面感染真菌、皮肤癣真菌和皮下组织感 染真菌三类。,临床上最多见的浅部真菌为皮肤癣真菌,包括毛 癣菌属、表皮癣菌属和小孢子菌属。,足癣,西安交大一附院,股癣,左上:白色浅表型 左下:近端甲下型,西安交大一附院,右上:远端甲下型右下:全甲营养不良型,甲癣的四种类型,红色毛藓菌,西安交大一附院,皮肤廯菌的特征,西安交大一附院,属名,种 数,侵犯部位形态特征,皮肤大分生孢子,小分生孢子菌 丝,毛癣,较多见,指毛甲发21+细长、棒形、梨形、棒形

5、,螺旋状、鹿角,状、结节状、球拍状、破梳 状,单纯细菌 丝棒形,卵圆 球拍状及破梳 形,状 菌 丝较少见无,单纯菌丝,毛廯菌属,西安交大一附院,毛癣菌属(Trichophyton)属半知菌亚门丝孢 菌目丛梗孢菌科,有20余种,其中14种能引 起人和动物的感染。临床上常见的有红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)须癣毛癣菌(T.mentagrophytes,又称石膏样毛癣菌)许兰毛癣菌(T.schoenleinii,又称黄癣菌)紫色毛癣菌(T.violaceum)断发毛癣菌(T.tonsurans),微生物检验,西安交大一附院,标本采集直接显微镜检查皮屑+10%KOH液指甲+25%

6、KOH/25%NaOH含5%甘油处理常用湿标本,不加染色,直接显微镜镜检。,皮肤癣菌感染的毛发,西安交大一附院,微生物检验,西安交大一附院,分离培养 标本70%乙醇或在青、链霉素混合液内处理5min生 理盐水洗3次接种沙氏琼脂斜面25培养观察菌落特征。其他鉴定试验,毛发穿孔试验脲酶试验特殊营养需要试验,毛癣菌:菌落灰白、红、橙或棕色,表面呈绒毛状、粉粒状或蜡样。大分生孢 子细长棒状薄壁。菌丝有 螺旋状、球拍状、鹿角状 和结节状。,西安交大一附院,许兰毛癣菌,西安交大一附院,许兰毛癣菌纯培养的镜下形态,许兰毛癣菌在SDA上的菌落特征,表皮癣菌属,西安交大一附院,表皮癣菌属(Epidermophy

7、ton)目前有2个种,但 只有絮状表皮癣菌(E.floccosum),能引起人类感染。,絮状表皮癣菌是一种常见的皮肤癣菌,可引起皮 肤感染如股癣、足癣、体癣、手癣和甲癣。,微生物检验,西安交大一附院,皮屑和甲屑经+10%KOH液消化 镜检可见 分枝断裂的有隔菌丝,少见孢子。沙氏培养基上培养后,菌落初为白色鹅毛 状,以后转变为黄色粉末状。镜下可见球 拍状菌丝、卵圆形或巨大棒状薄壁大分生 孢子,无小分生孢子,在陈旧培养物中可 见厚膜孢子。,表皮癣菌:菌落初为 白色鹅毛状,以后变 为黄绿色粉末状。粗 棒状薄壁大分生孢子。菌丝球拍状,西安交大一附院,絮状表皮癣菌纯培养的镜下形态(乳酸酚棉蓝染色),西安

8、交大一附院,絮状表皮癣菌在SDA上的菌落特征,絮状表皮癣菌,小孢子菌属,西安交大一附院,我国常见的有铁锈色小孢子菌、石膏样小孢子菌 和犬小孢子菌等。,小孢子菌属感染皮肤和毛发,很少感染甲。,微生物检验,西安交大一附院,皮屑和毛发+10%KOH处理镜检,皮屑中 有分枝断裂菌丝,在毛发中呈现小孢子镶 嵌的鞘包裹着发干。在沙氏培养基中可见白色、棕黄色或黄褐 色、粉末或绒毛状菌落。镜下可见梳状、球 拍状或结节状菌丝,卵圆形小分生孢子、厚 壁梭形(纺锤形)大分生孢子。,犬小孢子菌,西安交大一附院,犬小孢子纯培养的镜下形态,犬小孢子在SDA上的菌落特征,小孢子癣菌:菌落为 灰色、橘红色或棕黄 色,厚壁大分

9、生孢子,菌丝有结节状、梳状 和球拍状。,西安交大一附院,引起侵袭性感染的真菌,西安交大一附院,又称深部感染真菌,是指能侵袭深部组织和内脏 及全身的真菌,主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲 霉、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等,其中以 隐球菌感染较常见。组织胞浆菌为二相性真菌,假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉菌和卡氏肺孢菌等为条件致病性真菌,只有 在一定条件下才引起机体致病。,假丝酵母菌属,西安交大一附院,假丝酵母菌(Candida),俗称念珠菌,生物学分 类为半知菌亚门、半知菌纲、隐球菌目、假丝酵 母菌属。本属菌有150多个种,其中有11种对人有致病性,其中以白假丝酵母菌为最常见的致病菌。,白假丝酵母菌,西安

10、交大一附院,临床意义:女性的假丝酵母菌性阴道炎、外阴炎;男性假丝酵母菌龟头炎、包皮炎;体质虚弱婴儿的鹅口疮;假丝酵母菌性肠炎、肺炎、膀胱炎、肾孟肾炎和心内膜炎等;中枢神经系统白色假丝酵母菌病,如脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓 肿等。,微生物检验,西安交大一附院,标本直接检查 分离培养鉴定药物敏感试验抗体检测 动物试验,分离培养,西安交大一附院,菌落特征:标本接种至沙氏培养基上,25或37 培养1-4d后,培养基表面可出现奶油色类酵母型 菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。鉴定试验:芽管形成试验,厚膜孢子形成试验,糖同化或发酵试验,产色培养基鉴定。,沙氏斜面,西安交大一附院,血平板,芽管形成试验,西安交大一

11、附院,C.albicans(green)白念,西安交大一附院,C.tropicalis(blue)热带C.parapsilosis(white)近平滑C.glabrata(pink).光滑/克柔,产色培养基,热带假丝酵母,西安交大一附院,直接显微镜检查 将标本作涂片革兰染色后镜检,观察 革兰阳性的假丝酵母菌。,分离培养与鉴定:标本接种沙氏培养基上形成色暗而 干燥的菌落取菌落作TZC(葡萄糖蛋白胨琼脂中加入 0.05g/L 氯化三苯基四氮唑,深红色或紫色)反应,取 菌落作糖发酵或同化试验。芽管形成较迟(血清中 6h 以上),不形成厚膜孢子、动物试验阴性。,隐球菌属,西安交大一附院,其中对人致病的

12、最主要是新生隐球菌及其变种(新生隐球菌新生变种、新生隐球菌格特变种和 新生隐球菌格鲁比变种。新生隐球菌广泛分布于自然界,也可存在于人体 体表、口腔和肠道中。,新生隐球菌(墨汁负染色),西安交大一附院,微生物检验,西安交大一附院,直接镜检:用患者脑脊液作墨汁负染色检查是诊断隐球菌脑膜 炎最简便、快速之方法。抗原检测:用免疫学方法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原,以 乳胶凝集试验最为常用,此法简便、快速。核酸检测、药物敏感试验、抗体检测。分离培养:将标本接种在沙氏培养基上,病原性隐球菌在25 和37孵育均可生长,而非病原性隐球菌在37时不生长。培 养2-5d后观察菌落形态特点,并取菌落作印度墨汁负染色

13、镜检。,新生隐球菌菌落,西安交大一附院,生化鉴定,西安交大一附院,酚氧化酶试验 将菌接种L-多巴枸橼酸铁和咖啡酸培养基中,培养2-5d,新生隐球菌呈棕黑色菌落。用已知新生隐球菌 和浅白隐球菌分别作阳性和阴性对照。脲酶试验 新生隐球菌能产生脲酶,可分解尿素琼脂培养 基的尿素形成NH4和CO2,使培养基pH升高,培养基由黄 色变为粉红色。白假丝酵母菌则为阴性。糖同化及发酵试验 新生隐球菌能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇,但不能发酵糖类、不同化硝酸盐。非致病性 隐球菌则不能同化肌醇。,曲霉菌,西安交大一附院,曲霉菌是条件致病菌,人体对其有极强免疫力,只有在人体免疫功能降低时才能致病。,曲霉可引起呼吸

14、系统曲霉病;全身性曲霉病;曲 霉可产生毒素引起机体食物中毒;致癌作用。,最常见的是烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉。,微生物检验,西安交大一附院,直接显微镜检查取痰液等被检材料涂于载玻片上,在镜下 可见分枝的菌丝、较粗的分生孢子头,顶端膨大形成顶囊,顶囊上有小梗,小梗上有许多小分生孢子。抗原检测、抗体检测、药敏试验、皮肤试验。分离培养与鉴定:标本接种沙氏琼脂,室温培养后菌落形 成快,呈毛状,一般为黄绿色。将菌落涂片镜检可见特征 性的分子孢子头和足细胞。根据不同的曲霉的形态和菌落 特征确定菌种。,曲霉结构图,西安交大一附院,烟曲霉菌落,西安交大一附院,烟曲霉,光镜 X400,黄曲霉菌落,西安交大一附院,黄

15、曲霉,光镜 X200,黑曲霉菌落,西安交大一附院,黑曲霉,光镜 X200,土曲霉菌落,西安交大一附院,土曲霉,光镜 X200,构巢曲霉菌落,西安交大一附院,构巢曲霉,光镜 X400,杂色曲霉菌落,西安交大一附院,杂色曲霉,光镜 X400,组织胞浆菌,西安交大一附院,有两个种:荚膜组织胞浆菌、组织孢浆菌的杜波 变种。,本菌传染性极大,主要侵犯网状内皮系统,有时 也可由血行播散而侵犯全身各脏器。,组织胞浆菌是一种双相型真菌,在25培养时呈 典型菌丝体,在37培养时为酵母型,位于细胞 内或外。,微生物检验,西安交大一附院,直接显微镜检查:涂片染色后检查。,痰液等标本:涂片后先用甲醇固定10min,再用姬姆萨染色 镜检。,皮损、脓液等标本:用20%KOH涂片后镜检抗原检测、药物敏感试验、

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