完整word版植物生物技术考试重点.docx

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完整word版植物生物技术考试重点

植物生物技术考试重点

1、生物技术？

现代生物技术主要包括哪几个方面的技术？

生物技术（biotechnology），也称生物工程,是指以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需要的产品或达到某种目的的一系列技术。

先进的工程技术：

基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程等新技术。

改造生物体：

获得优良的动植物品种。

为人类生产所需的产品：

食品、医药、能源、原料等。

生物技术的产生以DNA重组技术的建立为标志。

现代植物生物技术包括：

植物组织培养技术、人工种子技术、细胞工程技术、基因工程技术。

2、什么是胚培养？

有什么意义？

无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。

意义：

克服远缘杂交不亲和性和杂种不育性，获得种间或属杂种。

种间或属杂交中，受精作用能正常完成，胚也能进行早期的发育，但由于胚乳发育不良，杂种胚最终将夭折，因而不能形成有发芽能力的种子。

3、什么是基本培养基？

仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基

4、什么是转基因沉默？

5、什么是逆转录酶？

6、植物组织培养？

将植物的离体器官（如根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等）、细胞（如体细胞、生殖细胞花粉等）以及去除细胞壁的原生质体，甚至幼小的植株，在人工控制的无菌环境下，应用人工培养基创造适宜的培养条件，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。

也称为离体培养或试管培养。

7、愈伤组织的形成的过程？

8、愈伤组织的定义和特点？

愈伤组织（Callus）：

离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态、由薄壁细胞组成的排列疏松的组织。

细胞分裂快，结构疏松，颜色浅而透明

9、阐述外植体的成苗途径。

10、植物组织培养常用的培养基及各自的特点？

据其营养水平分：

基本培养基、完全培养基

据其态相分：

固体培养基、液体培养基

据其作用分：

诱导培养基、增殖培养基、生根培养基

据培养物的培养过程分：

初代培养基、继代培养基

组织培养中常用的培养基主要有：

MS、White、N6、B5、Heller、Nitsch、Miller、KM-8P

培养基种类

固体培养基：

加凝固剂（多为琼脂）的培养基；

液体培养基：

不加凝固剂的培养基。

初代培养基：

用来第一次接种从植物体上分离下来的外植体的培养基。

继代培养基：

用来接种继初代培养之后的培养物的培养基。

基本培养基：

只含有机和无机成分，但不包括糖、激素和复杂有机添加物等。

完全培养基：

基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如植物生长调节物质和其它复杂有机附加物等。

2、培养基的特点

MS培养基--大量元素。

特点：

无机盐的浓度高，具有高含量的氮、钾，尤其硝酸盐的用量很大，同时还含有一定数量的铵盐，这使得它营养丰富，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，有加速愈伤组织和培养物生长的作用，当培养物久不转移时仍可维持其生存。

White（WH）培养基。

特点：

无机盐浓度较低。

它的使用也很广泛，无论是生根培养还是胚胎培养或一般组织培养都有很好的效果。

ƒN6培养基。

特点：

KNO3和（NH4）2SO4含量高，不含钼。

目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花粉和花药培养和组织培养。

B5培养基。

特点：

含有较低的铵盐，较高的硝酸盐和盐酸硫胺素。

铵盐可能对不少培养物的生长有抑制作用，但它适合于有些植物如双子叶植物特别是木本植物的生长。

KM-8P培养基。

特点：

特点是有机成分较复杂,它包括了几乎所有的单糖和维生素、呼吸代谢中的主要有机酸。

主要用于原生质体培养。

固体培养基和液体培养基：

固体培养基：

使用简便，一般用于组织、愈伤组织、短枝、茎尖等材料的培养。

特别适合植物的快速繁殖。

缺点：

一块外植体只能部分接触培养基，不能浸没在培养基中，结果培养物上下部因接受养分不匀而形成差异，不易使细胞群体保持一致。

液体培养基（不加琼脂）：

提供比较均匀的营养，而且细胞的增殖速度快，一般用于细胞，原生质体的培养，也可用于愈伤组织的培养，胚状体等材料的继代培养。

11、植物组织培养室需要控制的条件。

温度：

大多数植物组织培养温度在23~27℃之间。

低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止，高于35℃时对植物生长不利。

不同植物培养的适温不同。

月季是25~27℃、番茄是28℃。

温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。

如烟草芽的形成以28℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。

光照：

主要表现在光照强度、时间长短、光照质量等。

有的材料培养需要光，有的则不需光；不同的植物所需的光照强度也不一样。

一般1000-5000Lx/12-16h/天。

湿度：

湿度影响包括培养容器内湿度和环境湿度。

容器内湿度水平主要受培养基水分含量和封口材料的影响。

封口材料直接影响容器内湿度情况。

封闭性差的材料易导致培养基干燥；封闭性高的封口材料易引起透气性不好。

湿度过低会使培养基丧失大量水分，导致培养基各种成分浓度的改变和渗透压的升高，进而影响组织培养的正常进行。

湿度过高时，易引起棉塞长霉，造成污染。

气体环境:

氧气是组织培养中必需的因素，瓶盖封闭时要考虑通气问题，可用附有滤气膜的封口材料。

通气最好的是棉塞封闭瓶口，但棉塞易使培养基干燥，夏季易引起污染。

固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。

培养室要经常换气，改善室内的通气状况。

液体振荡培养时，要考虑振荡的次数、振幅等，同时要考虑容器的类型、培养基等。

12、植物组织培养最常用的C源、常用的激素及其作用和浓度？

蔗糖2%~5%作为植物生长发育所需的营养物质和调节培养基中的渗透压

生长素诱导细胞分裂和根的分化

细胞分裂素促进细胞分裂和由愈伤组织形成器官，分化不定芽

赤霉素刺激在培养中形成的不定胚发育成小植株

油菜素内酯促进伸长提高植物內源生长素

乙烯促进RNA和蛋白质合成和使细胞膜透性增加

脱落酸抑制外植体形成体细胞胚状体

13、植物组织培养中培养基配制过程中应注意的环节？

培养基的配制：

准备工作、母液的配置和保存、培养基配置、培养基的灭菌

配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水。

药品应选取等级较高的化学纯或分析纯。

各种药品要充分溶解再依次混合.配制时注意一些离子之间易发生沉淀（如Ca2+和S042-）。

铁盐容易发生沉淀，需单独配制。

培养基的配制注意事项：

1、溶解特征：

大量元素易沉淀；

2、标签（浓度、日期）

3、保存期：

发现沉淀不能用。

培养基的配制步骤：

1、将配制好的母液按顺序排列，

2、列表计算各母液用量

3、先取适量的蒸馏水放入容器，再依次加入母液

4、加入肌醇和蔗糖，定容后调pH

5、加入琼脂，煮开至完全溶解

6、分装到组培容器

7、封口，贴标签

14、植物组织培养的理论依据？

植物细胞全能性

组织培养的生理依据：

激素（植物生长调节剂）调控

15、植物组织培养技术在目前农业生产上的应用？

1育种上的应用:

单倍体育种：

快速纯化个体，缩短育种年限，提高育种效率等作用。

远缘杂交：

克服杂交不亲和性，用于植物的远缘杂交；体细胞杂交；胚珠培养。

体细胞变异的应用：

果树苗木等。

单细胞突变体的筛选：

抗性育种。

2种子繁育与生产：

快速繁育：

兰花、香蕉、甘蔗、咖啡等。

获得脱毒植株，提高种性：

病毒可通过维管束传递，茎尖细胞分裂很旺，几乎没有病毒，如土豆。

人工种子：

不受气候影响，苜蓿、芹菜、胡萝卜等。

3植物产品的工厂化生产：

喜树的喜树碱（抗癌），人参皂苷，香料植物的香油精。

4种质资源的保存：

对于难于产生种子，种子不易保存，或珍稀的植物。

番薯的块根保存很难，可以取其茎尖进行组织培养，进行保存。

16、简述植物组织无菌培养的一般步骤？

外植体表面消毒：

将外植体置于有螺丝盖的玻璃瓶中,注入含有几滴活化剂的浓度适当的消毒液,使材料完全浸没在消毒液中,盖上盖,把玻璃瓶置入超净工作台。

消毒期间摇动2-3次,使消毒液充分接触植物组织。

‚消毒处理后,打开瓶盖,倒出消毒液,注入适量的无菌蒸馏水,再盖上盖,摇动数次,将水倒掉如此重复3～4次。

ƒ将材料取出,置于一个已经灭菌的培养皿中。

器械消毒：

将所要使用的器械（如解剖刀、镊子、剪刀等）置入95%乙醇中,取出后于酒精灯火焰上灼烧,待冷却后即可使用。

所有操作器械需使用一次,消毒一次。

…用这些消过毒的将已经过表面消毒的材料切取或剥取适当的外植体。

o将培养容器的盖或塞子打开,将外植体接种到培养基上,如果使用的是玻璃培养容器,把瓶口置酒精灯火馅上烘烤数秒钟,然后迅速用瓶盖或瓶塞封严。

17、与整体植物相比，植物离体组织有哪些特点？

整体植物不同的器官具有明显的分工，只要有水和无机盐就可以完成整个生命过程。

离体组织与植株没有了物质、能量和信息的交流，从而：

1、生长发育不受植株的控制，可以脱离原来的发育路线；

2、得不到生长发育所需要的培养，从自养变成异样。

3、所需要的营养与活体组织所需要的营养具有很大的差别。

能量来源（碳源）；有机成分、激素等。

18、简述激素在植物组织离体培养过程中的作用？

19、常用的PCR技术有哪些？

20、PCR反应的条件？

21、PCR反应中关键的试剂有哪些？

22、什么是离体授粉？

23、柯斯质粒？

24、载体的种类以及载体应具备的特性？

25、质粒载体构建的基本原则，以及质粒载体的一般生物学特性？

26、噬菌体的特征？

什么是溶菌周期，什么是溶源周期？

27、同源基因的共抑制效应？

28、基因克隆操作中常用的工具酶种类？

29、基因克隆的本质以及基因克隆主要包括哪些内容？

30、简述植物基因组文库构建的一般步骤以及构建原则？

31、什么是转基因育种？

转基因育种有哪些特点？

32、理想的植物受体系统应符合的条件

33、根据你的理解详细说明农杆菌介导的转基因技术（包括土壤农杆菌Ti质粒转化系统和发根农杆菌Ri质粒转化系统）有哪些优点？

34、以水稻为例详细介绍农杆菌介导的转基因技术的具体操过程?

35、外源基因整合到植物染色体上的主要的分子鉴定方法？

36、转基因检测可以从哪些方面进行检测，具体的检测原理是什么？

植物基因工程理论上的三大发现：

DNA为遗传信息的携带者。

DNA的双螺旋模型和半保留不不连续复制机制。

中心法则和操纵子模型。

植物基因工程技术上的三大发明：

DNA体外切割与连接技术。

基因工程载体的使用。

DNA分析技术：

电泳、测序、杂交技术。

基因工程的定义：

用人工的方法，从不同生物中提取外源基因及载体DNA，经过体外切割、拼接和重组，然后采取某种方法，把重组后的带有外源基因的载体DNA引入植物细胞，并使其在植物细胞内进行复制和表达，以达到预期改变受体植物细胞遗传特性的目的。

它的核心是重组DNA技术。

也称：

遗传工程，基因操作，基因克隆，分子克隆。

基因工程的生产应用：

克服远缘杂交（有性杂交）的困难。

1、使基因在动物、植物，微生物不同生物系统中传递。

2、快速、定向的获取人类所需要的生物新类型。

细胞工程的定义：

利用细胞培养、细胞融合等细胞生物学方法对细胞进行改造，使细胞按人类需要生产有用的产品，或者遗传物质，从而培育新的生物类型。

包括：

细胞杂交技术、单克隆抗体、细胞