执业兽医之微生免疫第01部分.docx
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执业兽医之微生免疫第01部分
执业兽医之【微生免疫】【第01部分】
姓名:
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指导:
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日期:
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一细菌的结构与生理
【01】细菌形态:
具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。
无成形的细胞核,无完整的细胞器。
以微米为测量单位。
在固体培养基上培养,肉眼可见菌体集落。
【02】细菌结构
(一)细胞壁:
1、肽聚糖:
为聚糖骨架;原核生物细胞特有。
2、磷壁酸:
G+菌特有;其抗原性较强:
黏附宿主细胞。
3、外膜:
外膜蛋白:
脂蛋白、微孔蛋白。
脂质双层:
脂多糖:
类脂A:
内毒素成分。
核心多糖:
具有属特异性。
特异性多糖:
具有种型特异性。
4、周浆间隙:
外膜与细胞膜之间,可获得营养,解除病毒。
(二)细胞膜:
定义:
为脂质双层,并镶嵌有特殊功能的载体蛋白酶类;不含胆固醇。
功能:
物质交换、分泌胞外酶、产生与利用能量有关、细胞生物合成的场所。
(三)细胞质:
成分:
水、蛋白质、脂类、核酸、少量无机盐、核糖体、质粒。
(为超微结构)
核糖体:
由RNA和蛋白质组成;是蛋白质合成场所。
质粒:
定义:
细胞染色体外的遗传物质,为双股DNA分子。
包括:
F质粒:
决定细菌的致育性。
R质粒:
决定耐药性。
毒力质粒:
决定致病性。
(四)核体:
染色体(裸露的双链DNA)
【03】G+菌:
革兰氏染色为紫色;G-菌:
革兰氏染色为红色。
【04】细胞壁的功能:
维持固有形态、物质交换、携带有抗原决定簇与致病性有关。
【05】细菌特殊结构:
⑴荚膜:
①为黏液样物质;
②为多糖或多肽或透明质酸奶;
③在营养品丰富时才形成;
④能抵抗吞噬;
⑤有特异性抗氧。
⑵鞭毛:
①细长波浪状物业;
②成分为蛋白质;
③能运行(沙门菌);
④有特异的H抗氧;
⑤与黏附有关。
⑶菌毛:
①普通菌毛:
有黏附功能的;
②性菌毛:
F菌毛。
成分为菌毛蛋白(pillin);有良好的抗生素抗性。
⑷芽孢:
定义:
一定条件下胞质脱水浓缩形成;有多层膜包裹;通透性低;有完整核质和酶系统;代谢静止;不能分裂繁殖。
是抵抗不良环境的特殊形成。
灭活方法:
160℃干热灭菌或高压蒸气灭菌。
【06】细菌染色方法
①革兰氏染色法的程序:
草酸铵结晶紫染色1min→碘液染1min→95%醇脱色30s→碳酸复红1min、
意义:
鉴别细菌、选择抗菌药物。
②瑞氏染色法:
l【09】细菌的生长曲线分为四个时期:
①迟缓期:
菌体增大,代谢活跃;分裂迟缓,细菌数增加不显著。
②对数期:
活菌数对数直线上升;生物活性典型;对抗生素敏感。
③稳定期:
新繁殖的活菌数与死菌数平衡;产生芽孢,外毒素等。
④衰亡期:
死菌数超过活菌数;菌体形态改变。
【10】细菌新成代谢的能量由ATP供给。
【11】细菌生物氧化的类型
①发酵:
以有机物为受氢体。
②有氧呼吸:
以氧气为受氢体。
③厌氧呼吸:
以无机物硝酸盐为受氢体。
【12】细菌合成的代谢产物:
①致热源:
(操作时严格注意无菌操作)。
②毒素:
内毒素为G-菌死后释放,外毒素为G+菌分泌的蛋白质。
③侵袭性酶类:
透明质酸酶(促使细菌扩散)。
④色素:
铜绿假单胞菌产绿色色素。
⑤细菌素:
仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质,如:
绿脓菌素。
⑥抗生素:
多有放线菌和真菌产生。
⑦维生素:
大肠杆菌能合成维生素B维生素K。
【13】细菌的分解代谢试验:
①氧化发酵试验:
大肠杆菌产酸产气;沙门菌产酸不产气。
②氧化酶试验:
阳性者为什么紫色。
(阳性菌有假单胞菌、气单胞菌;阴性菌有:
肠科杆菌)
③过氧化氢酶试验:
阳性者产生气泡。
(阳性:
葡萄球菌、微球菌。
阴性:
链球菌。
)
④硫化氢试验:
产生黑色为阳性(阳性:
变形杆菌;阴性:
大肠杆菌)
⑤尿素酶试验:
阳性者呈红紫色(阳性:
变形杆菌;阴性:
沙门菌)
⑥吲哚试验:
阳性呈红色(阳性:
大肝杆菌、变形杆菌)
⑦甲基红试验(MR):
红色反应为阳性(阳性:
大肠杆;阴性:
产气杆)
⑧VP试验:
阳性呈红色(阳性:
产气杆菌;阴性:
大肠杆菌)
⑨枸橼酸盐利用试验(C):
培养基变深兰为阳性(阳性:
产气杆菌;阴性:
大肠杆菌)
⑩IMVC试验:
大肠杆菌++--;产气杆菌--++
【14】固体培养基中琼脂含义2%;半固体培养基中琼脂含量0.5%。
【15】基础培养基:
常用普通肉汤培养基,含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等;常用于糖发酵试验。
【16】营养培养基:
在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等;常用血琼脂平板(链球菌)。
【17】选择培养基:
麦康凯培养基抑制G+生长,利于用大肠杆菌、沙门菌生长。
【18】鉴别培养基:
另加入底物及指示剂,而鉴别细菌。
【19】厌氧培养基:
常用疱肉培养基;即在肉浸液中加入煮过的肉渣,用凡士林封口。
【20】液体培养基生长现象:
①混浊生长(葡萄球菌);②沉淀生长(链球菌);③菌膜生长(枯草杆菌)。
【21】半固体培养基中的生长现象:
沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长。
【22】固体培养基中的生长现象:
平板上划线后形成菌落;斜面上划线重叠形成菌苔。
二细菌的感染
【01】正常菌体的分布:
①口腔:
球菌、乳杆菌、棒状杆菌;
②胃:
乳杆菌、幽门螺杆菌;
③反刍前胃:
无芽孢厌氧菌;
④大肠:
双歧,拟杆菌,肠球菌,大肠杆菌,乳杆菌;
⑤鼻、咽:
葡萄酒球菌;
⑥喉、扁桃体:
甲型链球菌,卡他球菌;
⑦阴道:
乳杆菌;
⑧尿道口:
葡萄球菌,棒状杆菌;
⑨支气管、肺:
无菌;
【02】正常菌群的生理作用:
生物颉颃作用,营养作用,免疫作用。
【03】柯赫法则:
是确定某种细菌是否有具有致病性的主要依据。
①特定的病原菌应在同一疾病中可见,在健康者不存在;
②此病原菌能被分离培养而得到纯种;
③此病原菌纯培养物接种易感动物能导致同样病症;
④自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养物。
【04】细菌的毒力因子:
⑴侵袭力
①黏附因子
F1菌毛:
无特异性;
F4菌毛K88:
黏附猪小肠前段;
F6菌毛987P:
黏附猪小肠后段。
②侵袭性酶
透明质酸酶、链激酶:
链球菌产生;
胶原酶:
梭菌、气单胞菌产生;
血液凝固酶:
致病葡萄菌产生。
③Ⅱ型分泌系统
沙门氏菌、大肠杆菌等具有。
④干扰防御
荚膜:
抵抗吞噬;
细菌表面蛋白:
抗吞噬、避免抗体补体作用;
蛋白酶;
细胞内逃逸:
如产生过氧化氢,中和吞噬细胞中的氧自由基。
⑵毒素
①外毒素
由G+及少量G-(如产毒性大肠埃希氏菌)产生;
0、3%甲醛刺激机体
外毒素→→→→类毒素→→→产生抗毒素;
神经毒素:
包括破伤风毒素,肉毒毒素。
②内毒素
是G-菌细胞壁的脂多糖,当细菌死亡后才游离出来;
产生症状:
发热、毒血症、休克、内凝血、出血。
【05】破伤风梭菌及其芽孢必须侵入缺氧的深部创口才能致病。
【06】几种血症的区别
①菌血症:
病原菌侵入血统,但不繁殖。
②毒血症:
病原菌不的入血,但其产生内毒素入血,引起症状。
③败血症:
病原菌入血,并繁殖产生毒性物质,引起中毒症状(高热、皮肤黏膜淤斑、肝脾肿大)。
④脓毒血症:
化脓性细菌入血并繁殖,产生新的化脓灶。
【07】药敏试验结果判定标准:
①敏感:
用常用剂量时,该抗菌药物治疗有效。
②中介:
指被测菌株的MIC与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相近。
③耐药:
指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制,临床治疗无效。
三细菌感染的诊断
【01】采集样本的原则:
①严格无菌操作;
②根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本;
③应在使用抗菌药前采集,且采集时不得使用消毒剂;
④样本须新鲜,尽快送检;
⑤多数可冷藏运输,粪便样本常加入甘油缓冲盐水保存液;
⑥按规定包装、冷藏、专人递送;做好标记。
【02】抗体检测:
最好检测急性期和恢复双份血清样本,后者为前者4倍以上才具诊断价值。
【03】聚合酶链式反应(PCR)的4种主要材料:
DNA模板、引物、耐热DNA聚合酶、脱氧核苷酸。
【04】核酸杂交技术的设计原理:
DNA双螺旋分子的碱基互补原理。
【05】利用生化反应对肠道杆菌进行鉴定是必不可少的。
四消毒与灭菌
【01】消毒:
指杀灭病原微生物,但不一定能杀死芽孢。
【02】灭菌:
指杀灭病原微生物、非病原微生物及其芽孢。
【03】高压蒸汽灭菌法:
应用最广、灭菌效果最好的方法。
其条件为103、4kp、121、3℃、维持15-30min、
【04】煮沸法:
100℃时5min可杀死细菌的繁殖体,1-3h杀死芽孢,加入2%碳酸钠则沸点升至少105℃
【05】流通蒸汽法:
100℃30min杀死细菌的繁殖体,不可杀死芽孢。
【06】巴氏消毒法:
主要用于食品消毒,如下65℃维持30min、
【07】热空气灭菌法:
160℃,2h可杀死芽孢。
用于玻璃器皿消毒。
【08】紫外线灭菌:
265nm波长的紫外线杀菌能力最强。
用于实验室,养殖场入口的消毒室、手术室、种蛋等的空气消毒。
【09】电离辐射灭菌:
称“冷灭菌”,用于一次性医用塑料制品消毒。
【10】滤过除菌法:
所器具为滤菌器,其孔径为0、22-0、45um即细菌不能通过,但病毒、支原体可通过。
【11】紫外线消毒:
有效距离不超过2-3m、
【12】消毒剂作用机制:
①使菌体蛋白变性、凝固(醇、酚、醛);
②干扰细菌代谢(酚类);
③改变细胞膜通透性(新洁尔灭)。
【13】能杀灭芽孢的消毒剂:
氯制剂、过氧化化物、醛类。
【14】影响消毒药作用的因素:
①浓度、性质、作用时间;
②温度和酸碱度;
③细菌种类、数量状态;
④有机物。