细 胞.docx

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细胞

名词解释

连接子：

间隙连接处有许多排列规则的微型管道，将相邻细胞的质膜连接起来。

这些管道由相邻细胞各提供一半，每一半都是由6个跨膜蛋白分子围成的结构单元，称为连接子

周边蛋白：

依靠电荷和氢键的相互作用，与整合蛋白或膜脂的极性头结合，从而附着在膜表面的蛋白质。

协同运输：

指一种物质的逆浓度梯度穿膜运输依赖于另一种溶质的顺浓度梯度的穿膜运输，二者协同进行。

同向运输：

两种溶质的运输方向相同，如细胞对葡萄糖的吸收，即是与Na+同向穿膜；

反向运输：

两种溶质的运输方向相反，如红细胞清除组织中CO2时，即是肺释放出HCO3-，而纳入Cl-的过程。

细胞连接：

在多细胞生物的组织中，细胞与细胞间和细胞与细胞外基质间往往形成一些结构关系，这些结构称为细胞连接

细胞电泳：

细胞表面带有许多荷电基团，有的为正电荷，有的为负电荷，正负相抵总静电荷为负值，因而细胞在悬液中总是向电场的正极移动，细胞在外加电场的作用下发生泳动的现象称为细胞电泳

细胞外被：

动物细胞表面存在着一层厚约10~20nm的富含糖类物质的结构，称为细胞外被或糖萼

细胞骨架：

广义上，细胞骨架各级成分可概括如下:

细胞外基质、细胞膜骨架、细胞质骨架、细胞核骨架；其中狭义上的细胞骨架是指：

细胞质骨架。

细胞培养：

技术或称组织培养技术，选用各种最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。

整合蛋白：

又称内在蛋白、跨膜蛋白。

部分或全部想抢在细胞膜中或内外两侧，以非极性氨基酸与脂双分子层的非极性疏水区相互作用而结合在质膜上。

群体培养：

将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合后形成均匀的单细胞层；

克隆培养：

将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，此种集落即称为克隆。

一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。

陷穴小泡：

陷穴小泡也是由质膜内陷形成的有被胞饮泡，直径约50~100nm，普遍存在于各类细胞中。

其结构成分不同于其它小泡。

紧密连接：

又称封闭小带，是存在于脊椎动物上皮细胞间以及表皮细胞间的连接。

紧密连接环绕细胞表面形成带状区，与其四周相邻细胞构成连接。

在连接区内，质膜上有许多跨膜蛋白质分子排成分支链索条与相邻细胞质膜上的链索条对应结合，将细胞间隙密封起来。

功能是连接相邻细胞、封闭细胞间隙，进而防止大分子从细胞间隙穿过，故又被称为不通透连接

细胞质决定子：

指卵和胚胎细胞中所含的蛋白质和RNA性质的细胞质因子，不同性质的决定子影响着细胞向不同方向分化。

细胞化学染色：

利用染色剂可同细胞某种成份发生反应而着色的原理，对该成份进行研究和分析的技术。

免疫细胞化学：

根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原结合，对抗原进行专一定位测定的技术。

放射自显影术：

放射性同位素发射出的各种射线能使照相乳胶中的溴化银晶体还原（感光）。

利用放射性物质使照相乳胶膜产生该物质自身影像的技术，称为放射自显影术

细胞周期蛋白：

在周期后期逐渐合成、G2晚期达到高峰、至周期的中/后期突然消失的周期性存在的蛋白。

微管组织中心：

存在于细胞质中决定微管生理状态或实验处理解聚后重新装配的结构叫微管组织中心。

程序化细胞死亡：

体内健康细胞受特定的细胞外信号或细胞内信号的诱导，其死亡途径被激活，于是在有关基因的调控下发生死亡，细胞的这种死亡方式称为程序化细胞死亡，

填空

1转速为10000-25000r/min（离心力小于89000g）的离心机成为高速离心机，转速超过25000r/min（离心力大于89000g）者成为超速离心机：

目前超速离心机的最高转速可达80000r/min，离心力超过500000g。

2Na+-K+ATP酶分子为跨膜蛋白，求α、β两个亚基构成，α亚基为大亚基：

120kDa，具有ATP酶活性，其胞质端有Na+和ATP结合部位，其胞外端有K+和乌本苷结合部位。

磷酸化和去磷酸化可引起分子发生构成交替变化，发挥泵的作用。

当α亚基与β亚基分开时，α亚基的酶活性即消失。

3与膜的结合比较疏松，用温和的方法即可将其分离下来。

在人的红细胞内表面有一种红细胞蛋白-血影蛋白，即为周边蛋白，作用：

可用高盐或碱性PH条件分离，为水溶性。

简答及论述

1简述胞饮的过程

配体与质膜上的运输受体相结合，在胞内微丝作用下，结合部位质膜内凹陷将物质包围形成胞饮小泡，进入细胞内部。

2简述MAP蛋白的功能。

1）调节微管装配：

MAP-2磷酸化后可抑制微管装配；MAP-1和tau蛋白的作用是控制微管的延长。

2）稳定微管：

横连相邻微管-----一定方式排列稳定已装配好的微管结构

3）调节微管蛋白同其他蛋白间的相互作用：

调节微管同其他微管、肌动蛋白、细胞器或膜结构的相互作用

4）为纤毛与鞭毛的运动提供动力：

纤毛和鞭毛中的动力蛋白构成动力蛋白臂，是细胞内的马达蛋白

3简述细胞坏死与细胞凋亡的区别

首先是引起死亡的原因不同：

如物理性与化学性的损害因子及缺氧与营养不良均导致细胞坏死，而程序性细胞死亡则是由基因控制的；第二是死亡的过程不同，坏死细胞的质膜通透性增高，致使细胞肿胀，细胞器变形或肿大，早期核无明显形态学变化，最后细胞破裂；而程序性细胞死亡的细胞不会膨胀、破裂，而是收缩并割裂成膜性小泡后被吞噬；第三是坏死的细胞裂解要释放出内含物，并常引起炎症反应：

在愈合过程中常伴随组织器官的纤维化，形成疤痕。

而程序性细胞死亡的细胞没有被完全裂解，所以不会引起炎症。

4简述有丝分裂与减数分裂区别。

1）有丝分裂是体细胞的分裂方式，而减数分裂仅限于生殖细胞。

2）有丝分裂是DNF复制一次细胞分裂一次。

染色体数由2n→2n，DNA量由4C→2C；减数分裂是DNF复制一次，细胞分裂两次，染色体数由2n→1n，DNA量由4C变为1C

3）有丝分裂前，在S期进行DNA合成，经过G2期进入有丝分裂期；减数分裂前DNA的合成时间长（减数分裂前DNA合成），合成后立即进入简述分裂，G2期很短或没有。

4）有丝分裂时每1条染色体独立活动，遗传物质不变；减数分裂中染色体要发生联会、交叉和交换等，产生了遗传物质的多样性。

5）有丝分裂进行的时间短，一般为1-2小时，减数分裂进行的时间长，可达数月甚至数年。

5简述影响膜脂分子流动性的因素

1）脂肪酸链的不饱和程度（不饱和脂肪酸越多，流动性越大）

2）脂肪酸链的长度（脂肪酸链短，相变温度低，流动性大）

3）胆固醇/磷脂的比值（胆固醇含量增加，膜脂流动性降低）

4）卵磷脂/鞘磷脂比值（鞘磷脂含量高，流动性低）

5）膜蛋白的影响（结合蛋白质，影响其流动性）

此外，膜脂的极性基团、环境温度、离子强度、金属离子等均可对膜脂的流动性产生一定影响。

6简述膜蛋白的运动性的制约因素

1）周围膜脂的性质和相态；处于晶态膜脂之直流去中的膜蛋白不易运动；处于液态脂质区的膜蛋白则易于发生运动

2）质膜相关结构的作用：

膜蛋白在膜中的运动并不是随脂质随即漂流，它还要受膜相关结构的影响

3）细胞骨架的作用：

细胞质中的细胞骨架对蛋白的运动性具有动态控制作用（微管可固定膜蛋白的位置；而微丝可引起膜蛋白的运动）

7简述癌细胞的基本特征

1）失去生长的接触抑制

2）自分泌激活

3）细胞死亡特征改变

4）失去了间隙连接

5）染色体异常，正常的细胞在生长和分裂时能够维持二倍体的完整性，而癌细胞常常出现费整倍性，有染色体的缺失或增加

6）细胞骨架的变化。

正常的细胞的细胞质中有高度组织化的细胞骨架网络结构，而癌细胞中的细胞骨架不仅少而且杂乱无章

7）细胞表面蛋白减少，细胞黏着降低

8简述细胞凋亡的特征和过程

1）细胞凋亡程序启动后，细胞内发生了一系列的结构变化，如细胞质凝缩，细胞萎缩，细胞骨架解体，核纤层分解，核被膜破裂

2）过程：

引发，接受来自内部或外部的死亡信号

执行，启动了细胞的程序性死亡反应体系，细胞凋亡

吞噬，凋亡细胞被近邻的细胞吞噬

清除，吞噬的凋亡细胞被消化清除，营养再利用

9简述蛋白质的合成过程

蛋白质的合成过程：

起始，延伸和终止三个阶段

1）蛋白质合成起始涉及mRNA、起始tRNA和核糖体小亚基之间的相互作用，最后装配成完整的核糖体，其实过程分三步完成：

（1）30S亚基与mRNA的结合

（2）第一个氨酰-tRNA进入核糖体（3）完整起始复合物的装配

2）一旦起始复合物形成、蛋白质的合成随即开始，此过程称多肽链的眼神，涉及4个副职的步骤

（1）氨酰tRNA进入核糖体的A位点

（2）肽键形成（3）转位（4）脱氨酰tRNA释放。

上述四步的循环，使肽链不断延长，在整个过程中，需要GTP和一些延长因子的参与

3）蛋白质合成的终止是指核糖体沿着mRNA移动，如果A位点是终止密码子，由于没有与之匹配的反密码子，而终止蛋白质的合成

10简述G蛋白的作用机理

1）G蛋白被受体激活：

当配体与受体结合时，引起受体的结构改变，从而提高与G蛋白的亲和力，结合有配体的受体在细胞质膜内侧面G蛋白结合，形成受体-G蛋白复合物，与受体结合的G蛋白α亚基释放出GDP，并与GTP结合，这样就使G蛋白称为活性状态

2）G蛋白将效应物转移：

GTP取代GDP改变了G蛋白α亚基的结构，使得它与G蛋白的另外两个亚基β、γ分开，而β和γ两个亚基仍以Gβγ复合物存在，与GTP结合的Gα单独去激活效应分子产生第二信使，只要Gα-GTP与效应物结合，就会不断产生第二信使

3）应答终止：

当Gα结合的GTP被水解成GDP时，信号转导就会终止

11简述细胞间的相互作用及环境对细胞分化的影响

1）胚胎诱导：

动物在一定的发育时期，一部分细胞影响相邻细胞分化方向的作用。

2）细胞数量效应：

细胞分化必须有一定数量的细胞为基础

3）激素的作用

4）环境对细胞分化的影响：

环境中的物理、化学因子：

以提供信号的方式影响机体的细胞分化

12信号传递级联反映

（1）信号分子→受体

（2）1）、G蛋白→酶I→酶II→酶III→→靶蛋白→→细胞反映

（3）2）、激酶→磷酸化酶I→磷酸化酶II→→靶蛋白→细胞反映

（4）G蛋白在信号传递中的功能

（5）调节离子通道：

G蛋白可调节K+通道的开放，从而参与心率的调节

（6）细胞信号传递与第二信使：

细胞内的信号传递1、cAMP2、Ca2+3、肌醇三磷酸（IP3）

（7）细胞内的钙信号：

细胞内[Ca2+]提高：

1、卵受精后启动胚胎的发育2、激起肌肉收缩3、激发分泌细胞和神经细胞分泌

13主动运输特点

逆梯度运输

依赖于膜运输蛋白

需要代谢能

并对代谢毒性敏感

具有选择性和特异性

14Na+-K+泵主要作用

调节渗透压

物质吸收（为次级主动运输供能）

细胞正常代谢的必要条件

保持膜电位。

15细胞衰老的理论及学说

衰老的基因程序理论

衰老的损伤积累理论

细胞衰老的端粒假说

细胞衰老的线粒体损伤论

自由基理论

归纳分为两类：

一类是基因程序衰老理论；另一类是损伤积累衰老理论。

16膜脂分子的运动方式:

旋转异构运动（烃链全反式构象-歪扭构象）；

左右摆动（以与膜平面相垂直的轴线）；

旋转运动（围绕与膜平面相垂直的轴）；

侧向扩散或侧向移动（在膜内沿膜平面）；

倒翻运动（两层脂分子中180倒翻）。

17蛋白聚糖的功能

蛋白聚糖的功能取决于其核心蛋白和GAG的性质:

（1）渗滤作用：

蛋白聚糖在细胞间形成一个水化空间，其GAG链构成的凝胶具有选择筛的作用（可据大小、带电性质及荷电量对分子和细胞的穿筛孔运输进行调节）

（2）细胞间化学信号传递：

蛋白聚糖可同细胞分泌出的信号分子如生长因子结合，从而增强或抑制其活性

（3）调节分泌蛋白的活性：

结合分泌蛋白后,可限制其作用范围,为其缓释提供储库,浓集与保护分泌蛋白

（4）细胞表面的辅受体（co-receptor）质膜中的蛋白聚糖可与细胞表面的适当受体协作，既可介导细胞与ECM结合，亦可引发细胞对某些生长因子产生反应

18化学渗透假说：

①电子传递链不对称分布，起着质子泵的作用；

②在电子传递过程中所释放的能量转化成了跨膜的pH梯度和电位梯度；

③由于内膜具有完整性，因此在将质子从内室泵至外室时，质子只能经由F1-F0ATPase返回基质，该酶便可利用其能量合成了ATP。

化学渗透学说的要点可综合如下：

1.NADH提供一对电子，经呼吸链，最后为O2所接受。

2.呼吸链中的载氢体和电子传递体相间排列。

每当电子由载氢体传向电子传递体时，氢即以H+的形式释放到膜间隙，1对电子在呼吸链中3次穿膜传递，向膜间隙排放3对H+。

3.内膜对H+和OH-具有不可透性，故随电子传递的进行，H+便在膜间隙中积累，造成了内膜两侧的H+浓度差（势能差）。

4.膜间隙中的H+有顺浓度差返回基质的倾向，H+只能通过F1-F0复合物进入基质，ATP酶即可利用H+势能合成ATP。

5.F1-F0复合物需要2个H+合成1分子ATP。

19陷穴小泡可能有的功能

物质运输

信号转导

肿瘤抑制。

20原核细胞特点

没有由膜包围的细胞核

大多数原核细胞比较小、繁殖方式简单

原核细胞的形态和结构比较简单

21真核细胞特点

细胞由膜间隔成了许多功能区。

含有由膜围成的细胞核和细胞器（线粒体、叶绿体、内质网、高尔基体、溶酶体等）。

核膜、内质网、高尔基体在结构上形成了一个连续的体系，称为内膜系统。

质膜、溶酶体和分泌泡均可看作是内膜系统的产物。

内膜系统将细胞质分隔成了一些区间，即分区化

22简述细胞分裂的影响因素

细胞的大小

抑素

cAMP

接触抑制

激素

23膜蛋白的运动方式：

侧向扩散：

膜蛋白沿膜的二维表面运动：

细胞融合，成斑和成帽反应，凝集作用

旋转：

绕与膜平面相垂直的轴线旋转。

24影响细胞周期调控的因素：

生长因子及其受体

癌基因和抑癌基因

细胞的信使系统

25减数分裂与有丝分裂的主要区别：

（1）有丝分裂是体细胞的分裂方式，而减数分裂仅限于生殖细胞.

（2）有丝分裂是DNA复制1次细胞分裂1次，染色体数由2n→2n,DNA量由4C→2C；减数分裂是DNA复制1次，细胞分裂2次,染色体数由2n→1n，DNA量由4C变为1C.

（3）有丝分裂前，在S期进行DNA合成，经过G2期进入有丝分裂期；减数分裂前DNA的合成时间长（减数分裂前DNA合成），合成后立即进入减数分裂，G2期很短或没有.

（4）有丝分裂时每1条染色体独立活动，遗传物质不变；减数分裂中染色体要发生联会、交叉和交换等，产生了遗传物质的多样性.

（5）有丝分裂进行的时间短,一般为1~2小时。

减数分裂进行的时间长,可达数月甚至数年。

26影响细胞周期调控的因素：

生长因子及其受体

癌基因和抑癌基因

细胞的信使系统

27细胞骨架分类

28内质网形态

完整细胞内的内质网在细胞核周围形成了网状的三维结构，在细胞质内铺展成树枝状，形成了复杂的网络。

光面内质网：

无核糖体附着，表面光滑，多为小管或小囊状;广泛存在于合成类固醇的细胞中

糙面内质网：

胞质面附着有核糖体，表面粗糙，多为扁囊状;广泛存在于合成蛋白质的细胞中

29简述MAP激酶转导信号跨越核膜的三种方式

激酶自身易位

磷酸化易位因子

磷酸化抑制因子使一个因子产生易位

30细胞质膜进行的主动运输有哪些特点？

质膜大多数生物学功能都是由膜蛋白来执行的：

作为运输蛋白，转运特定的物质进出细胞

作为酶，催化相关代谢反应

作为连接蛋白，起连接作用

作为受体，起信号接收与传递作用

31将少量为分裂的细胞质注入蛙受精的卵母细胞中，课进入M期……解释这一现象

蛙卵母细胞中含有非活化形式的MPF，一旦注入到新的卵母细胞中，一小部分活化的MPF通过酶活性调节而使非活化的MPF分子相应位点发生磷酸化和去磷酸化反应，从而激活一个或更多的非活化MPF分子，此时已处于M期的第二卵母细胞提取物，含有原来细胞提取物一样多的活化MPF，以此类推……

32在减数分裂前期发生染色体联会的意义

同源联会是为了进行减数分裂，在四分体时期有可能会发生同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换，因此发生了基因重组，为生物提供了更多种类的基因型，同时，也为了同源染色体能均等的分离到两个子细胞中，为的是保证在次级性母细胞没有同源的出现，保证了每个配子都是单倍体，为精卵结合后得到二倍体或多倍体做了保障，因此生物的后代能正常生长发育，也不至于使染色体数目紊乱，使得在配子中获得的染色体数目相同，为繁殖后代做准备。

联会异常可能会发生染色体数目变异，导致得到异常的配子，因此在受精后会得到畸形的后代。

33为什么说近亲结婚是悲剧婚姻？

有些人可能携带某些遗传性疾病的基因，但外观上并不表现出该疾病的症状，我们称之为“隐性遗传病携带者”。

而相同血缘的近亲有很大的可能是携带同一种疾病的基因，如果携带同种遗传性疾病的基因的两个近亲结合，那么他们的后代就会将父母隐性遗传病外显出来而成为显性（隐性基因纯和），从而表现出疾病的症状和体征，所以患遗传性疾病的机会就增加了；如果与不是相同血缘的其他人结合，携带同一种遗传性疾病基因的的机会就很小，那么他们的后代患遗传性疾病的机会就大大地减少了。

有统计表明，近亲结婚后他们的下一代儿童死亡率比非近亲结婚的高出3倍，其后代遗传性疾病的发病率比非近亲结婚的高出150倍

34简述细胞间相互作用及环境对分化的影响

胚胎诱导：

动物在一定的发育时期，一部分细胞影响相邻细胞分化方向的作用。

细胞数量效应：

细胞分化必须有一定数量的细胞为基础

激素作用

环境对细胞分化的影响：

环境中梨花银子，以提供信号方式影响机体的细胞分化

35一切活细胞都从一个共同的祖先进化而来，证据是什么？

想象地球上生命进化的很早时期，可否假设那个原始的祖先细胞所形成的第一个仅有的细胞

关于一个共同祖先的假说有很多方面的证据。

对活细胞的分析显示出其基本组分有着惊人的相似程度，例如：

各种细胞的许多新陈代谢途径是保守的，在一切活细胞中，组成核酸与蛋白质的化合物是一样的。

同样，在原核与真核细胞中发现的一些重要蛋白质有很相似的精细结构，最重要的过程仅被“发明”了一次，然后再进化中加以精细调控去配合特化细胞的特定需要。

35细胞外基质与细胞外被区别

多细胞生物体的组织中在细胞之间存在有精密有序的细胞间结构网络，由一些蛋白质和多糖大分子构成

动物细胞表面存在着一层厚约10~20nm的富含糖类物质的结构，称为细胞外被或糖萼

实验设计

1在进行细胞组分的分离时，试验方案设计的一般原则是什么？

答：

根据不同的细胞器或分子具有不同的体积与密度，通过离心力场的作用加以分离。

根据这两个主要因素可设计不同的离心分离方法：

速度离心、等密度离心等。

2凝胶过滤层析依据分子大小来分离不同分子。

在溶液中小分子扩散快于大分子，而小分子通过层析柱却比大分子慢，为什么？

若以特别快的流速过柱，将会出现什么情况？

答：

在通过凝胶层析柱时，小的分子移动较慢时由于小的分子在到达柱内装填的多孔小球时，在足够的时间内可扩散到凝胶空隙内部，比大分子要经过更多的空间。

如果流速很快，所有的分子都将快速地从小柱间隙移动，而不进入内部，因此大分子和小分子倾向于一起从柱中流出。

3解决下列问题可分别采取何种技术？

1）证明在犯罪现场找到的头发中的DNA与被告犯罪嫌疑人的DNA是吻合的；

答：

进行PCR反应后用限制性内切核酸酶处理，经过凝胶电泳，进行限制性长度多态性检测；

2）坚定分泌到细胞外的糖蛋白激素，其糖基是在细胞的哪一部分被加上去的；

答：

用放射性标记糖类示踪，结合放射自显影；

3）寻找新的、便宜的而且丰富的人类生长激素来源，以便用于治疗生长激素缺乏症患者；

答：

分离生长激素基因，重组并克隆，然后从表达该激素的转基因细胞中纯化该激素；

4）确定酶蛋白中关键氨基酸的方法；

答：

定点突变，然后进行酶促动力学分析。

4用什么办法追踪活细胞中蛋白质合成与分泌过程？

包括几个步骤？

答：

追踪活细胞中某种蛋白质合成与分泌的过程一般采用同位素示踪技术。

其基本步骤是：

1）将放射性同位素标记的氨基酸加到细胞培养基中，在很短的时间内使这些与为标记的响应氨基酸化学性质相同的标记分子进入细胞；

2）出去培养液并洗涤细胞，再换已含为标记氨基酸的培养基培养细胞，已进入细胞的标记氨基酸将被蛋白质合成系统作为原料加以利用，掺入到某种新合成的蛋白质中；

3）每隔一定时间取出一定数量的细胞，利用电竞放射自显影技术探查被标记的特定蛋白质在不同时间所处的位置。

具体说，将每次取样所得的细胞经固定、包埋后制备成细胞的超薄切片，放到支持膜的载网上，涂上核乳胶，放到暗处曝光一段时间，即让细胞内带有放射性同位素的蛋白质发出的射线使乳胶感光。

然后将核乳胶显影、定影便得到电镜显微放射自显影的标本。

在电镜下观察该标本中银粒的分布、相关蛋白质在细胞中的位置以及数量的多少。

通过比较不同时间取样细胞的电镜照片就可了解细胞中蛋白质合成及分泌的动态过程。

5在水中构建含Na+/K+泵作为唯一膜蛋白的人工脂质体小泡，并假设每一个泵反向转运Na+和K+。

所有Na+/K+泵分子原来面向胞质的部分现在朝向小泡外面。

分析在下列试验条件下会发生什么情况？

1）将小泡悬浮在含Na+和K+的溶液中，并且小泡内溶液有同样的离子组成；

因为Na+/K+泵工作时需要ATP，而此时缺少ATP，故不会工作。

2）将ATP加到

（1）所描述的悬浮液内；

Na+被泵入小泡，产生跨膜Na+离子梯度；同时K+被泵出脂质体，产生相反极性的K+浓度梯度。

当全部K+被泵出脂质体或ATP水解消耗完时，该泵将停止工作。

3）加入ATP，但小泡内外的溶液中只含有Na+而不含K+；

在缺乏K+的情况下，不能发生去磷酸化反应和构象改变。

因此，Na+/K+泵将一直处于磷酸化状态，持续的等待K+。

由于没有K+,被转运的Na+数目将会很少，因为每个泵分子只能转运一次K+。

4）每一个小泡膜内的泵分子有一半得取向相反，然后加ATP到悬浮液中；

在这种情况下，取反方向插入膜内泵分子将完全失效，因为ATP无法接近原本暴露于胞质面的磷酸化部位。

同时ATP没有载体蛋白的协助不能穿膜通过。

5）在

（1）所描述的悬浮液中加ATP，但是小泡膜除了含有Na+/K+泵以外，还含有K+渗漏通道；

通过K+渗漏通道，K+可顺着Na+/K+泵作用形成的浓度梯度流回脂质体腔，建立起脂质体内侧为正值的膜电位。

最终，当膜电位平衡浓度梯度时，K+将停止渗漏。

6如果将一个具有经济价值的蛋白质精确地定位在质膜的内层，则会更有效率。

设计一个能实现这个目标的方案。

答：

可以采取以下的实验方案：

1如果将蛋白质具有疏水区则可以直接与膜融合；2）通过静电作用与膜脂中掉电的头部基团或其他膜蛋白相互作用；3）为了使膜蛋白能准确定位在膜上。

可以在翻译肽链的氨基末端机上一段信号肽，将表达的蛋白质进行修饰，使目的蛋白质通过诸如酯化等作用与天然的膜蛋白共价结合。

7设计一个实验，鉴定分析与组蛋白核心颗粒紧密结合的DNA的量。

答：

为了研究紧密结合与核心部分的DNA的量，可采用剂量逐渐增加的微球菌核酸酶消化DNA，然后通过凝胶电泳分析消化产物。

在低浓度核酸酶作用下，可得到染色体切割所形成的梯度条带。

随着酶浓度的增高，梯度带中的各条带将聚合成一条带，代表剪切过的核小体DNA。

进一步的消化将使条带的长度减少，这是位于核小体部分紧密结合的DNA。

8设计一个研究DNA复制过程中组蛋白分离的实验。

在DNA辅助后核小体是如何重建的？

答：

先将细胞培养在含有碳、氮重同位素的培养基中，在DNA复制前将细胞转移到含有轻同位素的培养基中。

从细胞中分离染色质及交联八聚体，通过密度梯度离心确定交联的组蛋白八聚体的密度。

结果表明：

交联