XSSOP.docx

XSSOP.docx

《XSSOP.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《XSSOP.docx（11页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

XSSOP

XS800i/1000i血液分析仪SOP文件

1．检验方法：

SYSMEXAUTOMATEDMEMATOLOGYANALYZER（XS800i/1000i）

2．原理：

参数

原理

红细胞计数（RBC）

电阻抗法+流式细胞技术

血红蛋白浓度（HGB）

SLS无氰化物血红蛋白检测法

血细胞压积（HCT）

红细胞脉冲高度累积法

平均红细胞体积（MCV）

由RBC和HCT计算

平均红细胞血红蛋白含量（MCH）

由RBC和HGB计算

平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）

由HGB和HCT计算

血小板计数（PLT）

电阻抗法+流式细胞技术

红细胞体积分布宽度-标准差（RDW-SD）

分析红细胞的大小分布状况得来

红细胞体积分布宽度-变异系数（RDW-CV）

血小板体积分布宽度（PDW）

分析血小板的大小分布状况得来

平均血小板体积（MPV）

大血小板比率（P-LCR）

血小板压积（PCT）

血小板脉冲高度累积法

白细胞计数（WBC）

半导体激光+流式细胞技术+核酸荧光染色（前向散射光代表细胞大小，侧向散射光代表细胞内容物复杂程度，侧向荧光代表白细胞核酸含量，白细胞分类：

由侧向散射光和侧向荧光组成二维散点图作白细胞五分类分析，白细胞总数在CBC模式时用前向散射光检测，在CBC+DIFF模式时，用二维散点图分析得出）

中性粒细胞百分数（NEUT%）

淋巴细胞百分数（LYMPH%）

单核细胞百分数（MONO%）

嗜酸性粒细胞百分数（EO%）

嗜碱性粒细胞百分数（BASO%）

中性粒细胞计数（NEUT#）

淋巴细胞计数（LYMPH#）

单核细胞计数（MONO#）

嗜酸性粒细胞计数（EO#）

嗜碱性粒细胞计数（BASO#）

幼稚粒细胞百分数（IG%）*

幼稚粒细胞计数（IG#）*

其它白细胞百分数（OTHER%）*

其它白细胞计数（OTHER#）*

*研究参数

3．仪器：

SYSMEXXS800i/1000i自动血液分析仪

4．试剂：

4.1.稀释液：

CELLPACK（PK-30L）

氯化钠6.38g/L

硼酸1.0g/L

四硼酸钠0.2g/L

EDTA-2K0.2g/L

4.2.Hb溶血素：

SULFOLYSER（SLS-210A）

月桂洗硫酸钠1.7g/L

4.3.WBC分类溶血素：

STORMATOLYSER4DL（FFD-200A）

非离子表面活性剂0.18%

有机季铵盐0.08%

4.4.WBC分类染液：

STORMATOLYSER4DS（FFS-800A）

聚次甲基染料0.002%

甲醇3.0%

1,2-亚乙基二醇96.9%

5.操作步骤：

5.1．打开电脑

5.2．双击“IPU”图标，出现IPU窗口和登陆对话框。

输入用户名和密码。

点击确认进入IPU。

5.3检查废液是否已满，并倒空。

打开主机电源，IPU与主机通信连接

5.4．主机初始化，然后做本底。

5.5本底通过后，主机指示灯变绿，表示仪器处于待机状态，可以开始检测质控标本了。

5.6．质控检测：

点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，在“手工样本号”对话框再点击“质控”按钮，出现“选择质控文件”对话框，选择好质控文件后，点击确认打开所选质控文件，混匀质控标本，按“开始”键开始分析质控样本，分析完后跳出质控样本分析结果，观察结果是否在控，若在控按“接受”按钮退出，开始检测病人样本，若失控按“取消”退出，查找原因，继续检测质控样本，直到质控结果在控。

5.7．样本分析：

点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，在“手工样本号”对话框输入样本号，选择分析模式“CBC”或“CBC+DIFF”，样本预稀释模式“是”或“否”。

点击确认，混匀样本，按“开始”键开始分析样本。

分析结束后在“浏览器”下的“主屏”界面，观看结果、直方图和散点图，判断是否需要复片。

5.8．关机：

双击“菜单”下的“关机”按钮，跳出“关机”对话框，点击“执行”按钮，主机自动冲洗2分钟，之后提示关闭主机电源，然后关IPU窗口退出程序，最后关闭电脑。

5.9．每日维护：

每天关机自动清洗，如24小时待机，则执行一次“菜单”下的“自动清洗”。

5.10．每月维护：

每月或每1200次分析之后开展一次每月维护，在“控制器”“维护”“每月清洗”下执行。

6.参考范围：

6.1.1.白细胞（WBC）计数：

成人（4–10）×109/L

儿童（5-12）×109/L

新生儿（15-20）×109/L

6.1.2.白细胞分类（成人）：

中性粒细胞（50-70）%

淋巴细胞（20-40）%

嗜酸性粒细胞（0.5-5）%

嗜碱性粒细胞（0-1）%

单核细胞（3-12）%

6.2．红细胞（RBC）：

男（4-5.5）×1012/L

女（3.5-5）×1012/L

新生儿（6-7）×1012/L

6.3血红蛋白（HGB）：

男（120-160）g/L

女（110-150）g/L

新生儿（170-200）g/L

6.4．血小板（PLT）：

（100-300）×109/L

6.5．血球压积（HCT）：

男0.42-0.49

女0.37-0.43

6.6．平均红细胞体积（MCV）：

（82-95）fl

6.7．平均红细胞血红蛋白含量（MCH）：

（27-31）pg

6.8．平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）：

（320-360）g/L

6.9．红细胞体积分布宽度变异系数（RDW-CV）：

（11.6-14.0）%；

6.10．红细胞体积分布宽度标准差（RDW-SD）：

（39.0-46.0）fL。

6.11．血小板体积分布宽度（PDW）：

（15.5-18.1）%

6.12．平均血小板体积（MPV）：

（9.4-12.5）fl；

6.13．大血小板比率（P-LCR）：

（13-43）％。

（建议各实验室建立自己的参考范围）

7.临床意义：

7.1．白细胞

7.1.1.白细胞计数（WBC）

7.1.1.1生理性增加新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。

7.1.1.2.病理性增加类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。

7.1.1.3.减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。

恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Che^diak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。

7.1.2白细胞分类计数：

见下表各种白细胞增多、减少的临床意义

细胞类别

增多

减少

中性粒细胞

类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。

伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗等。

淋巴细胞

百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病

急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷

单核细胞

单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染

使用皮质类固醇激素、再生障碍性贫血、多毛细胞白血病

嗜碱性粒细胞

慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等。

嗜酸性粒细胞

参见嗜酸性粒细胞

7.2．红细胞（RBC）：

7.2.1.生理性减少：

见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。

7.2.2.病理性减少：

造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。

7.2.3.相对性增多：

主要因血浆容量减少所致，见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。

7.2.4.代偿性增多主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。

7.2.5.绝对性增多克隆性真性红细胞增多；与促红细胞生成素产生过多有关，见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。

7.3血红蛋白（HCG）：

生理性增加：

新生儿、高原居住者。

病理性增加：

真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症（如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水）。

减少：

各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。

7.4红细胞比积（HCT）：

与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同。

7.5血小板（PLT）：

7.5.1.生理性正常人血小板在一天内可有6%-10%变化；表现为早晨低，午后较高；春季低，冬季略高；平原较低，高原较高；静脉血比毛细血管血高10%；月经前低，后升高；妊娠中晚期升高，分娩后减低；运动后升高，休息后恢复。

7.5.2病理性

减少：

除创伤之外，血小板减少是引起出血的常见原因。

常见疾病有：

①、血小板生成障碍，如急性白血病、再生障碍性贫血；②、血小板破坏过多，如ITP、脾功能亢进，系统性红斑狼疮；③、血小板消耗过多，如DIC、血栓性血小板减少性紫癜。

增多（血小板大于400×109/L）：

①、骨髓增生性疾病：

慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症；②、原发性血小板增多症；③、急性大出血，急性溶血，急性化脓性感染；④、脾切除手术后。

7.6．MCV、MCH、MCHC

主要用于贫血的形态学分类，见下表

贫血的形态学分类

MCV（fL）MCH（pg）MCHC（g/L）

大红细胞性贫血100-16035-50310-370

正红细胞性贫血80-10027-35310-370

单纯小细胞性贫血72-8021-26300-370

小细胞低色素性贫血50-8012-30240-300

7.7．RDW-CV、RDW-SD：

7.7.1.用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW增大，经治疗后可恢复正常。

7.7.2.用于小细胞低色素性贫血的鉴别，缺铁性贫血时RDW增大，而轻型珠蛋白生成障碍性贫血时RDW正常。

7.7.3.RDW与MCV结合可将贫血分为6种。

①小细胞均一性：

MCV下降，RDW正常，如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。

②小细胞不均一性：

MCV下降，RDW增大，如缺铁性贫血。

③正常细胞均一性：

MCV、RDW均正常，如某些慢性疾病。

7.7.4.正常细胞不均一性：

MCV正常，RDW增大，如早期缺铁性贫血。

⑤大细胞均一性：

MCV增大，RDW正常，如再生障碍性贫血。

⑥大细胞不均一性：

MCV、RDW均增大，如巨幼细胞性贫血。

7.8．MPV、PDW、P-LCR

7.8.1.MPV其临床意义要结合PLT的变化才二价值。

①、鉴别血小板减少的原因：

当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少；当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；血小板分布异常致血小板减少时，MPC正常。

②、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：

骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，MPV越小；当造血功能恢复时，MPV增大常先于PLT升高。

③、其它：

MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血；MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。

7.8.2.PDW是反映血小板体积大小的异质性参数，增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等；可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症，前者PDW增加，后者PDW正常。

7.8.3.P-LCR代表血小板计数中体积>12fL的血小板的比值或数量，有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片，并可监测骨髓的造血功能。

8.标本采集：

静脉全血：

用40g/LEDTA-K2抗凝（50ul抗凝1ml血，相当于2mgEDTAK2/1ml血）。

末梢全血：

用80ul的毛细管大约采集80ul手指血，加入子弹头（预先加入3ul浓度为5%EDTA-K2抗凝剂的）混匀

预稀释模式：

在子弹头中先加入120ul稀释液，用20ul毛细管准确采集20ul手指血，加入稀释液，混匀。

9.注意事项：

9.1.采集后在室温中贮存不应超出6h；如需制用血涂片应在2h内完成。

9.2.测定前抗凝血应充混匀，任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。

9.3.注意病理因素对血液分析仪使用的影响，特别是各系统的报警提示。

如是否有大血小板对血小板计数的影响；有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。

9.4.如有冷凝集现象，将血置37℃水浴箱10min后立即测试。

10.质量控制：

10.1.每日工作开始应先做E-CHECK的全血质控品。

10.2.出现失控，应校正后并重做质控，直至符合质控要求。

10.3.按要求做好仪器校正和仪器对比工作。

10.4.做好质控、失控和校正登记。

11.报告复查：

对以下情况的样本进行复查（仪器及手工）；

11.1.首次检测白细胞低于3.0×109/L，血小板低于50×109/L。

11.2.白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板结果与历史结果有明显差异。

11.3.红细胞数与血红蛋白明显不符。

11.4.显微镜复检：

（1）临床要求手工镜检或申请外周血查异常细胞的标本。

（2）仪器不报白细胞分类结果。

（3）白细胞分类出现以下警号：

原始细胞、幼稚粒细胞、异常淋巴细胞，

有核红细胞。

（建议实验室建立符合自己的复片规则）

12.复检方法

12.1.白细胞计数:

原理：

血液经稀酸溶液稀释后，红细胞被破坏，放入血细胞计数池内，置显微镜下计数，求得每微升中的白细胞数。

试剂：

冰醋酸　　10ml

蒸馏水　　　　加至500ml

10g/L美蓝3滴

器材：

20微升吸管，血细胞计数板，显微镜。

操作：

加计数试剂0.38ml于小试管内，取血20微升吹入试剂，混匀。

静置1-2分钟。

低倍计数，计数4角得4大方格，计数总数乘以50即为白细胞/微升。

12.2.血小板计数:

原理：

血液用血小板计数试剂稀释后，在显微镜下计数。

试剂：

1.草酸铵稀释液草酸铵1.0g，乙二胺四乙酸二钠0.014g,40%甲醛

溶液0.1ml加水至100ml，加亚甲蓝少许，过滤后置冰箱备用。

2.许汝和稀释液尿素9g，乙二胺四乙酸二钠0.5g，巴比妥钠0.3g，

加蒸馏水水至100ml，过滤后置冰箱备用。

3.Barr稀释液白皂素0.25g，枸橼酸钠3.5g，煌焦油蓝0.1g，40%

甲醛溶液1.0ml，加水至100ml，过滤后置冰箱备用。

操作：

1.选上述任一试剂，每管加0.38ml，加入全血20微升，充分混匀。

2.用改良牛鲍计数板，将血液稀释液充池后，置于有滤纸得培养皿

内，放置至少10min，待血小板沉降后计数。

3.计数中央大方格内5个中方格得血小板数，其结果乘1000，即得

每微升血液中血小板数。

12.3.红细胞计数

原理：

血液经等渗液稀释后，放入血细胞计数池内，置显微镜下计数，求得每升血液中的红细胞数。

方法：

试管法。

试剂：

氯化钠　　　　　1.0g，

结晶硫酸钠　　　0.5g，

氯化高汞　　　　0.5，

蒸馏水　　　　200ml。

操作方法：

1．用血红细胞吸管吸取血液10μl，吹入含有2ml红细胞稀释液试管中，反复吸取上层液数次。

2．用毛细吸管吸取稀释的血液，滴入计数池内，要一次完成，静止2分钟，待红细胞完全下沉后，移入显微镜下用高倍镜计数，计数一个大方格内四周四个中方格和中间一个大方格内的红细胞数。

3．将五个中方格中的红细胞数除以100即为每升血液中的红细胞数。

12.4.手工白细胞分类计数:

原理：

把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用瑞吉染液染色，根据各类白细胞形态特征予以分类计数，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。

试剂：

瑞姬氏复合染色液

Ⅰ液：

取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加少量甲醇（分析纯），研磨片刻，吸出上层染液。

再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上液。

如此连续几次，共用甲醇500ml。

收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3分钟，共5天，以后存放一周即能使用。

Ⅱ液：

pH6.4-6.8磷酸盐缓冲液

磷酸二氢钾（无水）6.64g

磷酸二氢钠（无水）2.56g

加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml

操作：

1.采血后推制厚薄适宜的血膜片应呈舌状，头、体、尾清晰可分。

2.推好的血膜在空气中晃动，以促使快干。

天气寒冷或潮湿时，应

于37℃温箱中促干，以免细胞变形缩小。

3.染色。

平置玻片于染色架上，滴加染液3-5滴，使其迅速盖满血

膜，约1分钟后，滴加缓冲液5-10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混合，5-1分钟后用冲去染液，待干。

4.选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白

细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比值（百分率）。

13.参考文献：

1、叶应妩、王毓三主编，《全国临床检验操作规程》第二版，1997.1

2、上海市卫生局、中华医学会上海分会编著.实验室诊断与基础治疗常规.上海科学技术出版社,1998.10

3、SYSMEXXS1000I操作手册

4、寇丽筠，陈宏础主编.临床基础检验学.第二版.人民卫生出版社,2001.1

5、庄威远主编.临床血液学检验,吉林医学院科研处,1998

6、陈允硕,周华文等主编.实用检验医学指南.上海科学普及出版社,2000.12

7、熊立凡、金大鸣、胡晓波主编，《现代一般检验与临床实践》1，98.12