生化试剂SOP标准操作程序魅力1800.docx

生化试剂SOP标准操作程序魅力1800.docx

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生化试剂SOP标准操作程序魅力1800

ALT/GPT丙氨酸氨基转移酶试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。

临床上，有许多疾病会导致血清中丙氨酸氨基转移酶活力增高。

如肝胆类疾病：

包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎；心血管疾病：

包括心肌梗塞、心肌炎、脑出血等。

一些药物和毒物也可以引起ALT活性升高：

如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。

因此，血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定可用于这些致病的诊断和监测，特别是用于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1（国际临床化学委员会）推荐法为基础设计，采用两步法测定：

丙氨酸氨基转移酶

L-丙氨酸+α-酮戊二酸-----------------------→丙酮酸+L-谷氨酸

乳酸脱氢酶

丙酮酸+β-NADH+H+---------------→L-乳酸+H2O+NAD+

底物L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,生成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.

在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中丙氨酸氨基转移酶活力成正比。

样本：

病人准备：

应空腹取血。

样本类型：

新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。

最少样品量：

0.2ml。

样本稳定性：

血清中的ALT在2～8℃可稳定7天，不推荐使用冰冻保存的样本2。

仪器与试剂:

仪器：

魅力1800生化分析仪

试剂：

上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒

试剂准备：

丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。

避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位,如仍有不适，应前往医院诊治。

3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数≤5%；

批间相对极差≤6%。

2.准确度：

相对偏差≤15％。

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～1000U/L（37℃）。

4.分析特异性（抗干扰能力）：

本液体试剂以IFCC推荐法为基础设计，采用二步法，可防止胆红素的干扰。

5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。

变质指示：

如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水（蒸馏水）和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

魅力1800开机

1装载试剂

2输入参数

3实施校准

4加载样本

和仪器有关的操作程序请参照魅力1800用户手册。

计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：

8～40U/L（37℃）。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

丙氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L。

样品浓度超过线性上限应稀释重做。

如在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，魅力1800可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.ExpertPanelonEnzyme.ScientificCommittee.InternationalFederationofClinicalChemistry:

IFCCMethodsforalanineaminotransferase（stage2,Draft1979-11-19）.Clin.Chem.Acta.147F-172F（1980）.

2.叶应妩，王毓三；全国临床检验操作规程（第三版）

3.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClincialLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995.

SOP标准操作程序

AST/GOT天门冬氨酸氨基转移酶（紫外-苹果酸脱氢酶法）试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活力。

天门冬氨酸氨基转移酶在心肌细胞内含量较多，当心肌梗塞时，血清中天门冬氨酸氨基转移酶活力增高，48小时内达到高峰。

约在3-5天内恢复正常。

各种肝病也可引起血清天门冬氨酸氨基转移酶升高，中毒性肝炎可更高。

肌炎，胸膜炎，肾炎及肺炎等也可引起其轻度升高。

方法原理：

紫外—苹果酸脱氢酶法（UV-MDH）1~5

AST

L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸------→草酰乙酸+L-谷氨酸

MDH

草酰乙酸+NADH+H+--------→L-苹果酸+NAD++α-酮戊二酸

底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶（AST）作用下生成草酰乙酸，生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH）作用下转化成L-苹果酸，同时伴随着NADH的氧化，引起在波长340nm处吸光度下降，下降速率与血清中AST活力成正比。

样本：

样本类型：

新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。

最少样品量：

0.2ml。

样本稳定性：

血清中的AST在2～8℃可稳定7天。

仪器与试剂:

仪器：

魅力1800生化分析仪

试剂：

上海科华生物工程股份有限公司的天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒

试剂准备：

天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。

避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位。

：

3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数CV≤5%；

批间相对极差≤6%。

2.准确度：

相对偏差≤15％。

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～1000U/L（37℃）。

4.分析特异性（抗干扰能力）：

本液体试剂按IFCC推荐法为基础设计，采用二步法，可防止胆红素的干扰，可防止胆红素的干扰。

5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。

变质指示：

如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水（蒸馏水）和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

魅力1800开机

装载试剂

输入参数

实施校准

加载样本

和仪器有关的操作程序请参照魅力1800用户手册。

计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：

5～40U/L（37℃）；3～24U/L（30℃）；

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L。

样品浓度超过线性上限应稀释重做。

如在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，魅力1800可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.Bergmeyer，H，U.MethodsofEnzymaticAnalysis.Vol.1.101（1974）.

2.IFCCMethodforAspartateaminotransferase.Clin.Chim.Acta.70：

F-19（1976）

3.RevisedIFCCMethodforAspartareaminotransferase.Clin.Chim.Acta.80:

F-21（1997）.

4.ProvisionalRecommendation（1974）onIFCCMethodsforMeasurementofCatalyticconcentrationofEnzymes.Clin.Chim.Acta.61:

F-11（1975）.

5.Approvedrecommendation（1978）onIFCCMethodsforMeasurementofCatalyticconcentrationofEnzymes.Clin.Chim.Acta.98:

F-163（1979）.

6.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClincialLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995.

SOP标准操作程序

碱性磷酸酶（ALP）

临床意义：

碱性磷酸酶试剂盒适用于定量测定人血清中碱性磷酸酶的活力。

血清碱性磷酸酶（ALP）（EC3.1.3.1）的测量用在由于成骨细胞活性增加而引起的骨病和肝胆疾病的诊断中。

某些条件下，如何杰金病，充血性心力衰竭和溃疡性结肠炎会引起碱性磷酸酶中等水平的升高，它的非病理性升高可在妊娠末三个月观察到。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶的测定采用AMP法。

在AMP的缓冲环境下，磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下，可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。

在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升，其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。

碱性磷酸酶

磷酸对硝基苯+H2O-----------------------→磷酸盐+对硝基苯酚

标本：

病人准备：

无特殊要求。

类型：

标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。

血清应在收集后两小时内分离出来。

避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。

标本稳定性：

血清中的ALP在15～25℃可稳定3天，如果分析延迟8小时以上，最好把血清冷冻。

冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。

它的活性恢复到初始值的速率依赖于时间和温度。

仪器与材料:

仪器：

魅力1800生化分析仪

材料：

上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶试剂

试剂准备：

上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

3.如试剂空白吸光度值大于0.6或变混浊，请勿使用。

4.试剂使用后，及时旋紧瓶盖以防空气中的CO2对试剂的影响。

性能参数：

1.试剂空白：

在波长405nm处，试剂空白吸光度应≤0.70A（光径1.0cm）。

2.精密度：

批内变异cv≤4%；批间相对极差≤6%。

3.准确度：

相对偏差≤10%。

4.试剂空白吸光值变化：

ΔA/5分钟≤0.010A。

5.线性范围：

要求试剂盒在样本浓度0~700U/L范围内，整个反应仍呈线性，r2≥0.995。

6.最低检测限：

最低检测浓度至少应达到2U/L。

试剂的贮存：

1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。

校准：

标准液的准备：

这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）：

魅力1800开机

装载试剂

输入参数

实施校准

加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在魅力1800用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

温度

30℃（U/L）

37℃（U/L）

女性

男性

37-90

40-110

42-128

53-140

每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶试剂盒的线性范围是0～700U/L。

样品浓度超过线性上限应稀释重做。

样品浓度超过线性上限应稀释重做。

在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Clin.Chem.21,（1975）1988.

2.J.Clin.Chem.Biochem.21,（1983）731.

SOP标准操作程序

γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）

临床意义：

γ-谷氨酰转移酶试剂盒适用于定量测定人血清γ-谷氨酰转移酶的活力。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的γ-谷氨酰转移酶试剂测定采用L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺法。

L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺和双苷肽在γ-谷氨酰转移酶催化作用下,生成γ-谷氨酰双苷肽和5-氨基-2-硝基苯甲酸盐，其中5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的生成会引起405nm处吸光度的上升。

在一定底物浓度范围内,γ-谷氨酰转移酶的催化产物5-氨基-2-硝基苯甲酸盐会引起405nm处吸光度的上升,同时其上升速率与血清中γ-谷氨酰转移酶活力成正比。

γ-谷氨酰转移酶

L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+双苷肽-----------→γ-谷氨酰双苷肽+5-氨基-2-硝基苯甲酸盐

标本：

病人准备：

无特殊要求。

类型：

血清、EDTA血浆，避免溶血。

标本稳定性：

标本在2-8℃保存γ-谷氨酰转移酶活力可稳定7天。

仪器与材料:

仪器：

魅力1800生化分析仪

材料：

上海科华生物工程股份有限公司的γ-谷氨酰转移酶试剂盒

试剂准备：

γ-谷氨酰转移酶试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

3.如试剂空白吸光度值大于0.7或试剂混浊，请勿使用。

性能参数：

1.试剂空白：

在波长405nm处，试剂空白吸光度应≤0.80A（光径1.0cm）。

2.精密度：

批内变异cv≤4%；批间相对极差≤6%。

3.准确度：

相对偏差≤10%。

4.试剂空白吸光值变化：

ΔA/5分钟≤0.010A。

5.线性范围：

要求试剂盒在样本浓度0~450U/L范围内,整个反应仍呈线性,r2≥0.995。

6.最低检测限：

最低检测浓度至少应达到2U/L。

试剂的贮存：

1.试剂在2-8避光保存，有效期1年。

变质指示：

如试剂空白吸光度值大于0.7或试剂混浊，请勿使用。

校准：

标准液的准备：

这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）：

魅力1800开机

装载试剂

输入参数

实施校准

加载样本

和仪器有关的操作程序请参照魅力1800用户手册。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

温度

25℃

30℃

37℃

男性

女性

6-28U/L

4-18U/L

6-43U/L

7-28U/L

8-58U/L

8-30U/L

每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

上海科华生物工程股份有限公司γ-谷氨酰转移酶试剂盒的线性范围是0～450U/L。

样品浓度超过线性上限应稀释重做。

在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Persijin,J.P.&vanderSlik,W.,Clin.Chim.Clin.141976）,421.

2.BulletinSGKC,Suppl.Vol.27/1（1986）.

SOP标准操作程序

α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）

临床意义：

上海科华生物工程股份有限公司生产的α-羟丁酸脱氢酶试剂盒（DGKC）用以测定人血清α-羟丁酸脱氢酶的活力。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的α-羟丁酸脱氢酶试剂盒采用DGKC法。

底物α-酮丁酸和β-NADH在α-羟丁酸脱氢酶的氧化脱氢作用下，生成α-羧丁酸和NAD。

整个氧化反应会引起340nm处吸光度的下降。

在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化会引起340nm处吸光度的下降,同时其下降速率与血清中α-羟丁酸脱氢酶活力成正比。

α-羟丁酸脱氢酶

α-酮丁酸+β-NADH+H+-----------------------→α-羧丁酸+NAD+

标本：

病人准备：

无特殊要求。

类型：

新鲜无溶血血清。

标本稳定性：

样本保存在2～8℃下，稳定3天。

仪器与材料:

仪器：

魅力1800生化分析仪

材料：

上海科华生物工程股份有限公司生产的α-羟丁酸脱氢酶试剂盒

试剂准备：

α-羟丁酸脱氢酶试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意：

1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

性能参数：

1.试剂空白：

在波长340nm处，试剂空白吸光度应≥1.0A（光径1.0cm）。

2.精密度：

批内变异：

CV≤4%；批间相对极差≤6%。

3.准确度：

相对偏差≤15%。

4.试剂空白吸光值变化：

ΔA/5分钟≤0.010A。

5.线性范围：

要求试剂盒在样本浓度0~1000U/L范围内,整个反应仍呈线性,r2≥0.995。

6.最低检测限：

最低检测浓度至少应达到15U/L。

试剂的贮存：

1.当保存于2～8℃，不开盖情况下失效期1年。

变质指示：

试剂混浊，或以蒸馏水作空白，试剂在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

标准液的准备：

这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）：

魅力1800开机

装载试剂

输入参数

实施校准

加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在魅力1800用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

72～182U/L

每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

上海科华生物工程股份有限公司α-羟丁酸脱氢酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L，样品浓度超过线性上限应稀释重做。

在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Z.KlinChem.u.KLIN.Biochem,8,658,1970.

2.Bergmeyer,H,U.MethodsofEnzymaticAnalysis.Vol.3.150.

SOP标准操作程序

乳酸脱氢酶（LDH）

临床意义：

乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒适用于在生化分析仪上定量测定人血清乳酸脱氢酶（LDH）的活力。

乳酸脱氢酶增高主要见于心机梗塞、肝炎、肺梗塞、某些恶性肿瘤、白血病等。

某些肿瘤转移所致的胸腹水中的乳酸脱氢酶活力往往升高。

目前，常用于心机梗塞、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒采用乳酸法。

乳酸氧化成丙酮酸（L→P），辅酶Ⅰ（NAD+）还原成还原辅酶Ⅰ（NADH）生成，其反应产生的NADH引起340nm处吸光度的上升，吸光度上升的速率与LDH的活力呈正比关系。

L-乳酸+NAD+LDH丙酮酸+NADH+H+

标本：

病人准备：

无特殊要求。

类型：

血清或肝素血浆。

标本稳定性：

血清中总LDH活力在室温保存可稳定7天。

仪器与材料:

仪器：

魅力1800生化分析仪

材料：

上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒

试剂准备：

乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意：

1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

3.保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数：

1.试剂空白吸光度与变化值：

在试剂盒有效期内，光径1cm,波长340nm处吸光度≤0.50A，吸光度变化值ΔA/5min≤0.010A。

2..精密度：

批内变异CV≤5%；批间相对极差≤10%。

3.准确度：

采用Roche的c.a.f.s作为标本测定，实测值介于标示值的70~100%。

4.线性范围：

要求试剂盒在样本浓度为0~1000U/L时，整个反应呈线性，r2≥0.99。

试剂的贮存：

1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。

校准：

标准液的准备：

这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）：

魅力1800开机

装载试剂

输入参数

实施校准

加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在魅力1800用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

115-220U/L

每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L，样品浓度超过线性上限应稀释重做。

在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Wroblewski,F