正确认识毛泽东和毛泽东思想.docx
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正确认识毛泽东和毛泽东思想
附录表
1标准缓冲液pH值与温度对照表
温度/℃
0.05mol/L
四草酸氢钾
0.05mol/L
邻苯二甲酸氢钾
0.025mol/L
混合磷酸盐
0.01mol/L
硼砂
5
1.67
4.00
6.95
9.39
10
1.67
4.00
6.02
9.33
15
1.67
4.00
6.90
9.28
20
1.68
4.00
6.88
9.23
25
1.68
4.00
6.86
9.18
30
1.68
4.01
6.85
9.14
35
1.69
4.02
6.84
9.11
2常用蛋白质分子质量标准参照物
高分子质量标准参照中分子质量标准参照低分子质量标准参照
蛋白质
Mr
蛋白质
Mr
蛋白质
Mr
肌球蛋白
β－半乳糖苷酶
磷酸化酶B
牛血清清蛋白
过氧化氢酶
醛缩酶
212000
116000
97400
66200
57000
40000
磷酸化酶B
牛血清清蛋白
谷氨酸脱氢酶
卵清蛋白
醛缩酶
碳酸酐酶
大豆胰蛋白酶抑制剂
溶菌酶
97400
66200
55000
42700
40000
31000
21500
14400
碳酸酐酶
大豆胰蛋白酶制剂
马心肌球蛋白
溶菌酶
肌球蛋白（F1）
肌球蛋白（F2）
肌球蛋白（F3）
31000
21500
16900
14400
8100
6200
2500
3层析法常用数据表及性质
3.1离子交换纤维素
DEAE-
纤维素
形状
长度/μm
交换容量/（mg/g）
蛋白吸附容量/（mg/g）
胰岛素（pH8.5）
蛋白吸附容量/（mg/g）
牛血清
清蛋白（pH8.5）
床体积/（ml/g）
pH6.0
床体积/（ml/g）
pH7.5
DE-22
DE-23
DE-32
DE-52
改良纤维性*
同上（除细粒）
微粒性（干粉）
同上（溶胀）
12~400
18~400
24~63
24~63
1.0±0.1
1.0±0.1
1.0±0.1
1.0±0.1
750
750
850
850
450
450
660
660
7.7
8.3
6.0
6.0
7.7
9.1
6.3
6.3
CM-
纤维素
形状
长度
/μm
交换容量
/（mg/g）
蛋白吸附容量
/（mg/g）
溶菌酶
（pH5.0）
蛋白吸附容量
/（mg/g）
7S－
γ球蛋白（pH3.5）
床体积/（ml/g）
pH5.0
床体积/（ml/g）
pH7.5
CM-22
CM-23
CM-32
CM-52
改良纤维性
同上（除细粒）
微粒性（干粉）
同上（溶胀）
12~400
18~400
24~63
24~63
0.6±0.06
0.6±0.06
1.0±0.1
1.0±0.1
600
600
1,260
1,260
150
150
400
400
7.7
9.1
6.8
6.8
7.7
9.1
6.7
6.7
*：
英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000μm。
还有DE-11，
纤维性，50～250μm，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130mg/g。
3.2聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
型号
排阻的下限
（Mr）
分级分离的范围/Mr
膨胀后的床体积
/（mL/g干凝胶）
膨胀所需
最少时间
/h（室温）
Bio-gel-P-2
Bio-gel-P-4
Bio-gel-P-6
Bio-gel-P-10
Bio-gel-P-30
Bio-gel-P-60
Bio-gel-P-100
Bio-gel-P-150
Bio-gel-P-200
Bio-gel-P-300
1600
3600
4600
10000
30000
60000
100000
150000
200000
300000
200~2000
500~4000
1000~5000
5000~17000
20000~50000
30000~70000
40000~100000
50000~150000
80000~300000
100000~400000
3.8
5.8
8.8
12.4
14.9
19.0
19.0
24.0
34.0
40.0
2~4
2~4
2~4
2~4
10~12
10~12
24
24
48
48
注：
上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，
生产厂为Bio-RadLaboratories,Rich-mond,California,U.S.A.
（一）琼脂糖凝胶的技术数据
3.3琼脂糖凝胶的技术数据
名称、型号
凝胶内琼脂糖
百分含量
（质量分数）
排阻的下限（Mr）
分级分离的范围/Mr
生产厂商
Sagavac10
Sagavac8
Sagavac6
Sagavac4
Sagavac2
10
8
6
4
2
2.5×105
7×105
2×106
15×106
150×106
1×104~2.5×105
2.5×104~7×105
5×104~2×106
2×105~15×106
5×105~15×107
SeravacLaboratories,
Maidenhead,England
Bio-GelA-0.5M
Bio-GelA-1.5M
Bio-GelA-5M
Bio-GelA-15M
Bio-GelA-50M
Bio-GelA-150M
10
8
6
4
2
1
0.5×105
1.5×106
5×106
15×105
50×106
150×106
<1×104~2.5×106
<1×104~1.5×106
1×104~5×106
4×104~15×106
1×105~50×106
1×106~150×106
Bio-RadLaboratories,
California,U.S.A.
（琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0~4℃，pH4~9范围内是稳定的。
）
3.4凝胶过滤层析介质的技术数据之一
凝胶过滤
介质名称
分离范围
颗粒
大小
/μm
特性/应用
pH
稳定性
（工作）
耐压/Mpa
最快
流速
/（cm/h）
Superdex30
Superdex75
Superdex200
Superose6
Superose12
Sephacryl
S-100HR
Sephacryl
S-200HR
Sephacryl
S-300HR
Sephacryl
S-400HR
Sepharose6
（FastFlow）
Sepharose4
（FastFlow）
Sepharose2B
Sepharose4B
Sepharose6B
Sepharose
CL-2B
Sepharose
CL-4B
Sepharose
CL-6B
<10000
3000~70000
300010000~600000
5000~5×106
1000~300000
1000~100000
5000~250000
10000~1.5×106
20000~8×106
10000~4×106
60000~20×106
70000~40×106
60000~20×106
10000~4×106
70000~40×106
60000~20×105
10000~4×106
24~44
24~44
24~44
20~40
20~40
25~75
25~75
25~75
25~75
平均90
平均90
60~200
45~165
45~165
60~200
45~165
45~165
肽类、寡糖、小蛋白
重组蛋白、细胞色素
单抗、大蛋白
蛋白、肽类、多糖、核酸
蛋白、肽类、寡糖、多糖
肽类、小蛋白
蛋白，如清蛋白
蛋白、抗体
多糖、具延伸结构的大分子如蛋白多糖、脂质体
巨大分子
巨大分子如重组乙型肝炎表面抗原
蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子
蛋白、多糖
蛋白、多糖
蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子
蛋白、多糖
蛋白、多糖
3~12
3~12
3~12
3~12
3~12
3~11
3~11
3~11
3~11
2~12
2~12
4~9
4~9
4~9
3~13
3~13
3~13
0.3
0.3
0.3
0.4
0.7
0.2
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.004
0.008
0.02
0.005
0.012
0.02
100
100
100
30
30
20~39
20~39
20~39
20~39
300
250
10
11.5
14
15
26
30
3.5凝胶过滤层析介质的技术数据之二
凝胶过滤
介质名称
分离
范围
颗粒
大小
/μm
特性/应用
pH
稳定性
（工作）
干凝胶
溶胀体积
/（mL/g）
溶胀最少
平衡时间/h
最快
流速
/（cm/h）
室温
沸水
SephadexG-10
SephadexG-15
SephadexG-25Coarse
SephadexG-25Medium
SephadexG-25Fine
SephadexG-25Superfine
SephadexG-50
Coarse
SephadexG-50Medium
SephadexG-50Fine
SephadexG-50Superfine
SephadexG-75
SephadexG-75Superfine
SephadexG-100
SephadexG-100
Superfine
SephadexG-150
SephadexG-150
Superfine
SephadexG-200
SephadexG-200
Superfine
<700
<1500
1000~
5000
1000~
5000
1000~
5000
1000~
5000
1500~
30000
1500~
30000
1500~
30000
1500~
30000
3000~
80000
3000~
70000
4000~
1.5×105
4000~
1×105
5000~
3×105
5000~
1.5×105
5000~
6×105
5000~
2.5×105
干粉40~120
干粉40~120
干粉100~300
干粉50~150
干粉20~80
干粉10~40
干粉100~300
干粉50~150
干粉20~80
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
干粉40~120
干粉10~40
脱盐及交换缓冲液用
脱盐及交换缓冲液用
脱盐及交换缓冲液用
脱盐及交换缓冲液用
小分子蛋白质分离
小分子蛋白质分离
小分子蛋白质分离
小分子蛋白质分离
中等蛋白质分离
中等蛋白质分离
中等蛋白质分离
中等蛋白质分离
稍大蛋白质分离
稍大蛋白质分离
较大蛋白质分离
较大蛋白质分离
2~13
2~13
2~13
2~13
2~13
2~13
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~10
2~3
2.5~3.5
4~6
4~6
4~6
4~6
9~11
9~11
9~11
9~11
12~15
12~15
15~20
15~20
20~30
18~22
30~40
20~25
3
3
6
6
6
6
6
6
6
6
24
24
48
48
72
72
72
72
1
1
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
5
5
5
5
5
5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
2~5
72
续表
16
47
11
21
5.6
11
2.8
SephadexLH20
（嗜脂性）
100~
4000
干粉
25~106
特别为使用有机溶剂而设计。
适合分离脂类、胆固醇、脂肪酸、激素、维生素及其他小生物分子。
此分离范围指以酒精为溶剂的分离
3.6离子交换层析介质的技术数据
离子交换
介质名称
最高
载量
颗粒
大小
/μm
特性/应用
pH稳定性
（工作）
耐压
/MPa
最快
流速
/（cm/h）
SOURCE15Q
25mg蛋白质
15
2～12
4
1800
SOURCE15S
25mg蛋白质
15
2～12
4
1800
QSepharose
H.P.
70mgBSA
24～44
2～12
0.3
150
SPSepharose
H.P.
55mg
核糖核酸酶
24～44
3～12
0.3
150
QSepharose
F.F.
120mgHSA
45～165
2～12
0.2
400
SPSepharose
F.F.
75mgBSA
45～165
4～13
0.2
400
DEAESepharose
F.F.
110mgHSA
45～165
2～9
0.2
300
CMSepharose
F.F.
50mg
核糖核酸酶
45～165
6～13
0.2
300
QSepharose
BigBeads
100～300
2～12
0.3
1200～
1800
SPSepharose
BigBeads
60mgBSA
100～300
4～12
0.3
1200～
1800
QAESephadex
A-25
1.5mg甲状腺球蛋白,
80mgHSA
干粉
40～120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷及巨大分子（Mr>200000）,工业传统应用上具重要作用
2～10
0.11
475
QAESephadex
A-50
1.2mg甲状腺球蛋白,
80mgHSA
干粉
40～120
批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子
（30000～200000）
2～11
0.01
45
离子交换
介质名称
最高
载量
颗粒
大小
/μm
特性/应用
pH稳定性
（工作）
续表
耐压
/MPa
最快
流速
/（cm/h）
SPSephadex
C-25
1.1mgIgG,
70mg牛羰合血红蛋白,
230mg核糖核酸酶
干粉
40～120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷及巨大分子（Mr>200000）,工业传统应用上具重要作用
2～10
0.13
475
SPSephadex
C-50
8mgIgG,
110mg牛羰合血红蛋白
干粉
40～120
批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子
（30000～
200000）
2～10
0.01
45
DEAESephadex
A-25
1mg甲状腺球蛋白,
30mgHAS,
140mga-乳清蛋白
干粉
40～120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子（Mr>200000）,在工业传统应用上具有重要作用
2～9
0.11
475
DEAESephadex
A-50
2mg甲状腺球蛋白,
110mgHSA
干粉
40～120
批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子
（30000～200000）
2～9
0.01
45
CMSephadex
C-25
1.6mgIgG,
70mg牛羰合血红蛋白,
190mg
核糖核酸酶
干粉
40～120
纯化低分子量蛋白、多肽、核苷及巨大分子（Mr>200000），工业传统应用上具重要作用
6～13
0.13
475
CMSephadex
C-50
7mgIgG,
140mg牛羰合血红蛋白,
120mg
核糖核酸酶
干粉
40～120
批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子
（30000～200000）
6～10
0.01
45
4常用缓冲溶液的配制方法
4.1甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L甘氨酸+Y毫升0.2mol/L，再加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
2.0
2.4
2.6
2.8
50
50
50
50
44.0
32.4
24.2
16.8
3.0
3.2
3.4
3.6
50
50
50
50
11.4
8.2
6.4
5.0
甘氨酸分子质量=75.07，
0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
4.2邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾+0.2mol/LHCl，再加水稀释到20毫升
pH（20℃）
X
Y
pH（20℃）
X
Y
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
5
5
5
5
5
4.070
3.960
3.295
2.642
2.022
3.2
3.4
3.6
3.8
5
5
5
5
1.470
0.990
0.597
0.263
邻苯二甲酸氢钾分子质量=204.23，
0.2mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升
4.3磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH
0.2mol/LNa2HPO4
（毫升）
0.1mol/L
柠檬酸
（毫升）
pH
0.2mol/LNa2HPO4
（毫升）
0.1mol/L柠檬酸
（毫升）
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
8.28
8.82
9.35
9.86
10.30
10.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子质量=14.98，0.2mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子质量=178.05，0.2mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子质量=210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。
4.4柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度（mol/L）
柠檬酸（克）
C6H8O7·H2O
氢氧化钠（克）
NaOH
盐酸（毫升）
HCl（浓）
最终体积（升）①
2.2
3.1
3.3
4.3
5.3
5.8
6.5
0.20
0.20
0.20
0.20
0.35
0.45
0.38
210
210
210
210
245
285
266
84
83
83
83
144
186
156
160
116
106
45
68
105
126
10
10
10
10
10
10
10
1使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%（质量分数）
氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
4.5柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）
pH
1.1mol/L
柠檬酸
（毫升）
1.1mol/L
柠檬酸钠
（毫升）
pH
1.1mol/L
柠檬酸
（毫升）
1.1mol/L
柠檬酸钠
（毫升）
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
11.4
10.3
9.2
1.4
2.8
4.0
5.1
6.0
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
8.2
7.3
6.4
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