正确认识毛泽东和毛泽东思想.docx

1、正确认识毛泽东和毛泽东思想附 录 表1 标准缓冲液pH值与温度对照表温度 / 0.05mol/L四草酸氢钾0.05 mol/L邻苯二甲酸氢钾0.025 mol/L混合磷酸盐0.01 mol/L硼砂51.674.006.959.39101.674.006.029.33151.674.006.909.28201.684.006.889.23251.684.006.869.18301.684.016.859.14351.694.026.849.112 常用蛋白质分子质量标准参照物高分子质量标准参照 中分子质量标准参照 低分子质量标准参照蛋白质Mr蛋白质Mr蛋白质Mr肌球蛋白半乳糖苷酶磷酸化酶B牛血清

2、清蛋白过氧化氢酶醛缩酶212 000116 00097 40066 20057 00040 000磷酸化酶B牛血清清蛋白谷氨酸脱氢酶卵清蛋白醛缩酶碳酸酐酶大豆胰蛋白酶抑制剂溶菌酶97 40066 20055 00042 70040 00031 00021 50014 400碳酸酐酶大豆胰蛋白酶制剂马心肌球蛋白溶菌酶肌球蛋白（F1）肌球蛋白（F2）肌球蛋白（F3）31 00021 50016 90014 4008 1006 2002 5003 层析法常用数据表及性质3.1 离子交换纤维素DEAE-纤维素形状长度/m交换容量/(mg/g)蛋白吸附容量/(mg/g)胰岛素(pH8.5)蛋白吸附容量/

3、(mg/g)牛血清清蛋白(pH8.5)床体积/(ml/g)pH6.0床体积/(ml/g)pH7.5DE-22DE-23DE-32DE-52改良纤维性 *同上(除细粒)微粒性(干粉)同上(溶胀)1240018400246324631.00.11.00.11.00.11.00.17507508508504504506606607.78.36.06.07.79.16.36.3CM-纤维素形状长度/m交换容量/(mg/g)蛋白吸附容量/(mg/g)溶菌酶(pH5.0)蛋白吸附容量/(mg/g)7S球蛋白(pH3.5)床体积/(ml/g)pH5.0床体积/(ml/g)pH7.5CM-22CM-23CM-

4、32CM-52改良纤维性同上（除细粒）微粒性（干粉）同上（溶胀）1240018400246324630.60.060.60.061.00.11.00.16006001,2601,2601501504004007.79.16.86.87.79.16.76.7*：英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000 m。还有DE-11，纤维性，50250 m，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130 mg/g。3.2 聚丙烯酰胺凝胶的技术数据型号排阻的下限（Mr）分级分离的范围/Mr膨胀后的床体积/(mL/g干凝胶)膨胀所需最少时间/h (室温)Bio-gel-P-2Bio-ge

5、l-P-4Bio-gel-P-6Bio-gel-P-10Bio-gel-P-30Bio-gel-P-60Bio-gel-P-100Bio-gel-P-150Bio-gel-P-200Bio-gel-P-3001 6003 6004 60010 00030 00060 000100 000150 000200 000300 0002002 0005004 0001 0005 0005 00017 00020 00050 00030 00070 00040 000100 00050 000150 00080 000300 000100 000400 0003.85.88.812.414.919.0

6、19.024.034.040.0242424241012101224244848注：上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.（一） 琼脂糖凝胶的技术数据3.3 琼脂糖凝胶的技术数据名称、型号凝胶内琼脂糖百分含量(质量分数)排阻的下限（Mr）分级分离的范围/Mr生产厂商Sagavac 10Sagavac 8Sagavac6Sagavac4Sagavac21086422.5105710521061510615010611042.51052.5104710551

7、042106210515106510515107Seravac Laboratories,Maidenhead, EnglandBio-GelA-0.5MBio-GelA-1.5MBio-GelA-5MBio-GelA-15MBio-GelA-50MBio-GelA-150M10864210.51051.51065106151055010615010611042.510611041.5106110451064104151061105501061106150106Bio-Rad Laboratories,California,U.S.A.（琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0 4 ，pH 49范

8、围内是稳定的。）3.4 凝胶过滤层析介质的技术数据之一凝胶过滤介质名称分离范围颗粒大小/m特性/应用pH稳定性(工作)耐压/Mpa最 快流 速/(cm/h)Superdex 30 Superdex 75 Superdex200 Superose 6 Superose 12 SephacrylS-100 HRSephacrylS-200 HRSephacrylS-300 HRSephacrylS-400 HRSepharose 6(Fast Flow)Sepharose 4(Fast Flow)Sepharose 2BSepharose 4BSepharose 6BSepharoseCL-2BS

9、epharoseCL-4BSepharoseCL-6B10 0003 00070 0003 000 10 000600 0005 00051061 000300 0001 000 100 0005 000250 00010 0001.510620 000810610 000410660 0002010670 0004010660 0002010610 000410670 0004010660 0002010510 0004106244424442444204020402575257525752575平均90平均90602004516545165602004516545165肽类、寡糖、小蛋白重

10、组蛋白、细胞色素单抗、大蛋白蛋白、肽类、多糖、核酸蛋白、肽类、寡糖、多糖肽类、小蛋白蛋白，如清蛋白蛋白、抗体多糖、具延伸结构的大分子如蛋白多糖、脂质体巨大分子巨大分子如重组乙型肝炎表面抗原蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子蛋白、多糖 蛋白、多糖蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子蛋白、多糖蛋白、多糖312312312312312311311311 3112122124949493133133130.30.30.30.40.70.20.20.20.20.10.10.0040.0080.020.0050.0120.02100100100303020392039203920393002501011

11、.5141526303.5 凝胶过滤层析介质的技术数据之二凝胶过滤介质名称分离范围颗粒大小/m特性/应用pH稳定性(工作)干凝胶溶胀体积/（mL/g）溶胀最少平衡时间/h最快流速/(cm/h)室温沸水SephadexG-10SephadexG-15SephadexG-25 CoarseSephadexG-25MediumSephadexG-25 FineSephadexG-25 SuperfineSephadexG-50 CoarseSephadexG-50 MediumSephadexG-50 FineSephadexG-50 SuperfineSephadexG-75SephadexG-7

12、5 SuperfineSephadexG-100SephadexG-100SuperfineSephadexG-150SephadexG-150SuperfineSephadexG-200SephadexG-200Superfine700200 000),工业传统应用上具重要作用2100.11475QAE SephadexA-501.2mg甲状腺球蛋白,80mg HSA干粉40120批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子(30 000200 000）211 0.0145离子交换介质名称 最高 载量颗粒大小/m特性/应用pH稳定性(工作)续表耐压/MPa最快流速/（cm/h）SP Sepha

13、dexC-251.1mg IgG,70mg牛羰合血红蛋白,230mg核糖核酸酶干粉40120纯化低分子量蛋白、多肽、核苷及巨大分子（Mr200 000）,工业传统应用上具重要作用2100.13475SP SephadexC-508mg IgG,110mg牛羰合血红蛋白干粉40120批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子（30 000200 000）2100.0145DEAE SephadexA-251mg甲状腺球蛋白,30mg HAS,140mg a-乳清蛋白干粉40120纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子（Mr200 000）,在工业传统应用上具有重要作用290.11475DEAE

14、 SephadexA-502mg 甲状腺球蛋白,110mg HSA干粉40120批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子（30 000200 000）290.0145CM SephadexC-251.6mg IgG ,70mg牛羰合血红蛋白,190mg核糖核酸酶干粉40120纯化低分子量蛋白、多肽、核苷及巨大分子（Mr200 000），工业传统应用上具重要作用6130.13475CM SephadexC-507mg IgG,140mg牛羰合血红蛋白,120mg核糖核酸酶干粉40120批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子（30 00020 0000）6100.01454 常用缓冲溶液的配

15、制方法4.1 甘氨酸盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L 甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L，再加水稀释至200毫升pHXYpHXY2.02.42.62.85050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子质量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。4.2 邻苯二甲酸盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH (20 )XYpH (20 )XY2.22.42.62.83.0555554.07

16、03.9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子质量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升4.3 磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液pH0.2 mol/L Na2HPO4（毫升）0.1 mol/L柠檬酸（毫升）pH0.2 mol/L Na2HPO4 （毫升）0.1 mol/L 柠檬酸（毫升）2.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.85.00.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.86

17、10.3010.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子质量 = 14.98，0.2 mol/L 溶液为28.40克/升

18、。Na2HPO4-2H2O分子质量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7H2O分子质量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。4.4 柠檬酸氢氧化钠-盐酸缓冲液pH钠离子浓度（mol/L）柠檬酸（克）C6H8O7H2O氢氧化钠(克)NaOH 盐酸（毫升）HCl（浓）最终体积（升）2.23.13.34.35.35.86.50.200.200.200.200.350.450.38210210210210245285266848383831441861561601161064568105126101010101010101 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%(质量分数)氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。4.5 柠檬酸柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）pH1.1 mol/L柠檬酸（毫升）1.1 mol/L柠檬酸钠（毫升）pH1.1 mol/L柠檬酸（毫升）1.1 mol/L柠檬酸钠（毫升）3.03.23.43.63.84.04.24.44.64.818.617.216.014.914.013.112.311.410.39.21.42.84.05.16.06.97.78.69.710.85.05.25.45.65.86.06.26.46.68.27.36.4