苦参与甘草的配伍的工艺研究毕业设计论文.docx

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苦参与甘草的配伍的工艺研究毕业设计论文

毕业设计（论文）

设计（论文）题目

苦参与甘草配伍的工艺研究

摘要

目的：

通过甘草和苦参配伍工艺研究，观察甘草和苦参在不同比例下（1:

1、1:

2、2:

1）主要成分苦参碱的变化。

方法:

对甘草粗粉采用水提法进行煎煮，煎煮液浓缩，甘草酸水提浓缩液中加入200mL无水乙醇，静置1h，离心，将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状，加1％稀氨水200mL使之复溶，再加6％稀盐酸100mL，静置20h离心，0℃冰水洗至pH5-6，冷冻干燥，得甘草酸粗品，称重计算甘草酸粗品得率，并用大孔吸附树脂法进行精制甘草酸。

对苦参粗粉采用水提法进行煎煮，煎煮液浓缩，精确苦参碱浓缩液2mL，加5mLpH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿，密塞，振摇2min，移入50mL分液漏斗中，静置30min，分出氯仿层于具塞比塞管中。

在波长410nm处测定苦参碱的A值。

重复3次，取其平均值。

根据标准曲线方程求出提取物中苦参碱的含量，计算出苦参碱得率。

最后将苦参碱和甘草酸按照1:

1、2:

1、1:

2三种不同的比例进行煎煮20分钟，通过紫外分光光度法研究配伍之后的苦参碱的变化。

结果：

苦参碱和甘草酸按照1:

1、2:

1、1:

2三种不同的比例进行煎煮1h，提取苦参碱，经紫外分光光度法测定，苦参碱的含量为2.563%、4.239%、4.206%。

结论：

苦参碱和甘草酸按照1:

1、2:

1、1:

2三种不同的比例进行煎煮1h，表明苦参与甘草配伍之后，主要成分苦参碱发生了变化，含量较配伍前呈上升趋势，且苦参碱与甘草酸配比2:

1时，得率最高。

苦参和甘草分别对乙肝病毒都有很好的疗效，但是单独使用效果不理想，因为配伍使用含量呈上升趋势，故配伍使用将成为苦参碱的使用趋势。

【关键词】苦参甘草配伍紫外分光光度法

ABSTRACT

Objective:

licoriceandSophoracompatibilitytechnologyresearch,licoriceandSophoraobservedindifferentproportions（1:

1,1:

2,2:

1）themaincomponentofmatrinechanges.

Methods:

formulationsoflicoricewithwaterdecoctionofcoarse,decoctionconcentratedacidhydrolysislicoriceextractconcentratewasadded200mLofethanol,allowedtostandfor1h,centrifuged,andthesupernatantwasconcentratedbyrotaryevaporationtoathickpaste,plus1%diluteaqueousammoniatomake200mLreconstitution,dilutehydrochloricacidwascoupledwith6%100mL,standing20hcentrifugation,0℃icewateruntilpH5-6,andlyophilizedtoobtaincrudeglycyrrhizicacid,glycyrrhizicacid,thecrudeproductweighedcalculatedyieldandwithmacroporousresinmethodforpurificationofglycyrrhizin.Sophoramealtobeusingboilingwaterextraction,boilingliquidconcentrate,concentrateaccuratelymatrine2mL,add5mLpH=bromophenolbluemuskgrassbuffersolution7.6and10mLchloroform,Mesa,shaking2min,clocked50mLseparatoryfunnelandallowedtostand30min,thechloroformlayerwasseparatedinaSeBisaitube.Avaluemeasuredatawavelengthof410nmatmatrine.Repeatthreetimesandaveraged.Accordingtothestandardcurveequation,Matrineextract,matrinecalculatedyield.Finally,accordingto1:

1,2:

1,1:

2matrineglycyrrhizinthreedifferentproportionsboilingfor20minutes,byUVspectrophotometrychangeaftermatrinecompatibilitystudies.

Results:

Matrineandlicoriceacidaccordingtothreedifferentproportions1:

1,2:

1,1:

2boiling1h,extractingmatrinebyUVspectrophotometry,matrinecontentof2.563%,4.239%,4.206%.

Conclusion:

Matrine1:

1,2:

1,1:

2andglycyrrhizicacidafterboilinginthreedifferentproportions1h,showinvolvementLicoriceaccordingbitter,matrinemaincomponentchanges,thecompatibilityofcontentthanbeforewhenanupwardtrend,andmatrineandlicoriceacidratioof2:

1,thehighestyield.SophoraandlicoricearehepatitisBvirushasagoodeffect,butaloneisnotsatisfactory,becausethecompatibilityoftheuseofthecontentontherise,itwillbecometheusagetrendsusingcompatibilitymatrine.

【Keywords】SophoraLicoriceCompatibilityUVspectrophotometry

一、甘草的主要药理作用概述………………………………………….....……………….....7

第三节苦参和甘草配伍研究的意义……………….....……………….....………………..........9

第四节本章小结……………….....……………….....……………….....……………….............9

第二章苦参碱和甘草酸的制备方法学研究……….....……………….....……………….............9

七、二次沉淀法精制甘草酸….....……………….....……………….....…............................11

八、静态吸附法….....……………..…................….....………….....…..................................11

第二节苦参碱的提取、精制方法学研究….....……………….....………………...................11

一、溶剂提取法……….....……………….....……………….....….........................................11

二、离子交换法……….....……………….....……………….....….........................................12

三、树脂吸附法……….....……………….....……………….....….........................................12

第三节本章小结………….....….................................................................................................13

第三节苦参碱的提取………….....….........................................................................................16

第四节苦参与甘草配伍研究（1:

1、2:

1、1:

2）………….....…..............................................17

第五节本章小结………….....….................................................................................................17

第四章实验结果………….....….....................................................................................................18

第一节甘草酸的提取………….....….........................................................................................18

第二节苦参碱标准品曲线………….....….................................................................................18

一、苦参碱的最大吸收波长选择………….....…....................................................................18

二、标准曲线绘制………….....….............................................................................................19

三、苦参碱样品的测定………….....…....................................................................................20

第三节苦参与甘草配伍研（1:

1、2:

1、1:

2）………….....................….......................................20

前言

生物碱是指从植物中分离出的一类含氮杂环的有机物，具有碱性和显著的生理活性。

目前从植物中分离出的生物碱有5000-6000种，一些生物碱因其具有K抗病毒等作用，被开发为植物源药产品，并成为近年来研究的热点。

苦参，别名野槐根、山槐根、干人参、苦骨。

双子叶植物纲，豆科。

落叶亚港灌木。

根黄色、奇数羽状复叶，夏季开花，碟形花冠，淡黄色。

中医学上以根入药。

根呈圆柱形，微扭曲，外表棕黄色，粗糙，有明显的纵皱纹，皮孔突出，皮薄易脱落，多破碎向外反卷，断面黄色，显纤维，有粉质，中心部微菊花心，味极苦。

主产于西昌、德昌、甘洛等县市，年产量10万多公斤，功能清热燥湿，杀虫利尿，主治各种传染性皮肤病和痢疾，痔血、湿热黄痘、是配制各种治疗皮肤药品的主要原料，可根据其药用价值、进一步开发加工增值。

甘草一般指豆科植物乌拉尔甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根及根茎。

它主要分布在西北、华北、东北地区。

甘草历来享有“中草药之王”的美誉，具有广泛的生理活性。

主要用作抗炎、抗病毒、保肝解毒及增强免疫功能等作用。

近年来临床上还用于治疗各种急慢性肝炎、肝纤维化、支气管炎和艾滋病等疾病。

第一章绪论

第一节苦参

苦参碱

苦参（学名：

Sophoraflavescensvar.flavescens）为豆科苦参属的变种。

分布于俄罗斯、日本、印度、朝鲜以及中国大陆等地，生长于海拔1,500米的地区，多生在山坡、沙地草坡灌木林中及田野附近，目前尚未由人工引种栽培，用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风；外治滴虫性阴道炎。

一、苦参的主要药理作用概述　　

1、美容护肤作用

苦参性寒，有清热燥湿，杀虫的功效，苦参浴能够清除下焦湿热，并且杀虫止痒，对皮肤瘙痒有很好的缓解作用，植物中草药能够平衡油脂分泌，疏通并收敛毛孔，清除皮肤内毒素杂质，丰富的本草营养，促进受损血管神经细胞的生长和修复，恢复皮下毛细血管细胞活力，肌肤重现紧致细滑，起到美容护肤的作用。

2、抗菌作用

苦参醚提物及醇提物对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用；苦参水浸剂对堇色毛癣菌、同心性毛癣菌、许兰毛癣菌、奥杜盎小芽孢癣菌等有抑制作用。

3、抗肿瘤作用

苦参碱具有抗癌活性，小鼠腹腔注射500μg.d组2mo存活率为40%，而对照组在23天内全部死亡。

氧化苦参碱则对此无作用。

苦参碱在体外具有降低小鼠腹腔巨噬细胞抑制P815肿瘤细胞增殖的效应。

槐果碱（Sophocarpine）亦有抗癌活性，在实验小鼠体内对S-180、U-14.ECA、L等瘤株均表现明显的抑制作用。

苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱及其不同比例混合的A、B、C碱对S-180实体瘤均有不同程度的抑制作用，各单体生物碱的抑瘤率均在35%以上，经不同比例混合的C碱剂量在113mg/（kg·d）时，连续腹腔注射给药10天抑瘤率达61.38%，比总碱提高23.5%，与单纯苦参碱相比，有显着差异（P<0.01）。

苦参碱对慢性粒细胞白血病外周多向造血祖细胞集落产生率有显着的抑制作用，抑制率达0.76，最佳抑制浓度为100mg/L。

苦参水煎液作用于体外培养的人早幼粒白血病细胞，在剂量为8mg/ml时，可显着地诱导白血病细胞向单核巨噬细胞方向分化。

4、升白作用

氧化苦参碱可防止小鼠因MMC、环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症，静脉注射或肌肉注射30mg/kg苦参总碱和100mg/kg氧化苦参碱对正常家兔外周血白细胞数有明显的升高作用，而且氧化苦参碱对正常家兔升白作用的显效时间、维持时间和白细胞计数峰值与苦参总碱相比，在给药后的18天内基本是一致的，升白效果优于鲨肝醇。

在苦参总碱、氧化苦参碱、苦参碱对家兔X线600伦照射后引起的白细胞减少症的治疗实验中，苦参总碱组从给药5天后到第19天，白细胞计数基本保持在6000/mm3以上，而对照组直到22天才恢复上述水平；氧化苦参碱的升白效价不高于总碱，苦参碱则未见治疗效果。

氧化苦参碱对家兔经60钴r-射线500伦全身照射后引起的白细胞减少症，剂量率为31伦/min，显示一定防治作用，在剂量率为120伦/min无防治作用。

5、抗炎作用

苦参碱对小鼠巴豆油引起的耳廓肿胀、醋酸引起的小鼠腹腔渗出增加、大鼠角叉菜胶性足垫肿胀，均有抑制作用。

6、抗心律不齐作用

苦参碱能对抗氯仿-肾上腺素诱发的猫室性纤颤；也对抗乌头碱诱发的大鼠心律失常及哇巴因诱发的豚鼠室性纤颤．对氯仿吸入所致的小鼠心室纤颤、乌头碱诱发的大鼠心律失常、氯仿-肾上腺素诱发的兔心律失常有明显对抗作用；苦参总黄酮并能对抗心肌细胞团自发及哇巴因诱发的搏动节律失常．此外，苦参有明显的利尿作用；苦参生物碱尚有安定、平喘、免疫抑制作用。

7、平喘祛痰作用

苦参碱主要是通过兴奋β受体，尤其是兴奋中枢的β受体，解除支气管痉挛及抑制抗体和慢反应物质的释放而产生平喘作用的。

苦参碱在有钙或无钙克氏营养液中，均能对抗乙酰胆碱氯化钡兴奋离体豚鼠、大鼠气管和肠管的作用。

苦参总碱、氧化苦参碱对组胺致喘豚鼠的平喘效果与氨茶碱基本相似，1小时平喘率都在90%以上，而对照组在15%左右；平喘时间上，氨茶碱在6小时平喘率是55%，苦参总碱则在80%以上。

槐果碱Ach的致喘作用比氨茶碱强，其平喘作用可能是通过兴奋中脑的β-受体而起作用。

酚红排泌法证明、小鼠灌胃苦参总碱、黄酮0.8g/kg，有明显祛谈作用。

8、安定作用

　　苦参总碱50-100mg/kg能明显抑制小鼠的自由活动；400mg/kg对小鼠被动活动明显抑制；100-200mg/kg能抑制孤独小鼠的欧斗攻击行为；苦参总碱25-40mg/kg与冬眠灵（5mg/kg）合用，可致小鼠翻正反射消失，100-200mg/kg苦参总碱能明显加强0.5mg/kg利血平对小鼠自发活动的抑制作用；苦参总碱50-200mg/kg与腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠20-25mg/kg合用，可致小鼠入睡；分别与硫喷妥钠（腹腔注射，40mg/kg）、水合氯醛（腹腔注射，200mg/kg）合用，能显着加强其中枢抑制作用。

亦能明显对抗中枢兴奋剂苯丙胺（腹腔注射，4-6mg/kg）及咖啡因（50mg/kg）所致的精神运动性兴奋；苦参总碱对士的宁及戊四氮所致的惊厥不但无对抗作用，反而使其惊厥增强和增加其动物死亡数；苦参总碱单独使用有轻度的镇痛作用，与阈剂量吗啡合用，可显着增加其镇痛百分率。

9、抗过敏作用

　　苦参碱可降低过敏介质的释放，为免疫抑制剂，其抑制50%T细胞增殖的浓度为0.55-0.56mg/ml；抑制IL-2产量的浓度为0.1mg/kg。

10、免疫抑制作用

　　苦参碱、氧化苦参碱在1/5LD50剂量下对小鼠免疫功能均有抑制作用。

兔、大鼠肌肉注射氧化苦参碱150mg/kg或100mg/kg对被动或主动皮肤过敏反应均有明显抑制作用，并对兔血清IgE抗体形成有明显抑制作用。

腹腔注射氧化苦参碱200mg/kg·d，共21天，对小鼠速发型变态反应引起的死亡有保护作用。

11、其它作用

　　肌肉注射氧化苦参碱能明显对抗巴豆油、角叉菜胶（大鼠）和冰醋酸（小鼠）诱发的渗出性炎症。

兔灌胃、皮下注射、静脉注射、腹腔注射和肌肉注射苦参煎剂、苦参注射液及苦参碱均有利尿作用，尿中氯化钠量有显着增加。

苦参50%甲醇浸膏具有抗盐酸乙醇所致的溃疡作用，其活性成分为苦参酮（Kurarinone）。

此外，苦参碱体内外均有抗菌作用，体内作用强度与氯霉素相当，醇浸膏体外有抗滴虫作用，其强度与蛇麻子相近。

二、苦参的主要成分、结构及生药材鉴定概述

1、苦参的主要成分、结构

国外早在30年代初苏联开始研究，国内开始于1972年，国内外研究的重点均放在生物碱上，目前国内自苦参植物中提取、分离、鉴定的生物碱主要有氧化苦参碱（oxymatrine,C15H24N2O2）,苦参碱（Matrine,C15H24N2O），异苦参碱（Iosmatrine,C15H24N2O），羟基苦参碱（sophor-anol），槐果碱（Sophocarpine,C15H22N2O）、氧化槐果碱（N-oxysophocarpine,C15H22N2O2）,槐胺碱、槐啶碱（Sophoridine,C15H24N2O）、苦豆碱（Aloperine）,金雀花碱（sparteine）,N-甲基金雀花碱（N－methylcytisine）,安那吉碱（anagyrine）,膺靛叶碱（bap-iifoline）、脱氢苦参碱（sophocarpine）,d-苦参碱（d-Matrine）,d-异苦参碱（d－isomatrine）,d-氧化苦参碱（d-Oxymatrine）,l-臭豆碱（l-Anagyrine）,l-甲基金花碱（l-Methyleytisine）,l-穿叶赝靛碱（Baptifoline）,苦参啶（kurarid-in）,槐醇（Sophoranol,C15H24N2O2）,氧化槐醇碱（SophoranholN-oxide,C15H24N2O3）,N甲基野靛碱（N-methylcytisine,C12H16N2O）,等生物碱。

黄酮类化合物：

苦参所含黄酮类化合物多为二氢黄酮及二氢黄酮醇类，亦有黄酮，异黄酮，查尔酮等，从总黄酮分离的黄酮类化合物见下表：

去甲苦参酮（降苦参酮,norkurarinone,C25H28O6）、苦参啶醇（kuraridinol）,苦参醇（kurarinol）,新苦参醇（neo－kurarinol）,去甲苦参醇（norkurarinol）,异苦参酮（isokurarinon,C26H30O6）；高丽槐素（maackiain，C16H12O5）；4-甲氧基高丽槐素（4-methoxy-maackiain,C17H14O6）；三叶豆紫檀甙（trifolirhizin,C22H22O10）；降脱水淫羊藿素（nor-anhydroicaritin,C20H18O6）；槐属二氢黄酮B（sophoraflavanoneB,C20H20O5）；芒柄花素（formoronetin,C16H12O4）；黄腐醇（Xanthohumol），异黄腐醇（Isoxanthohunol），3，4`5-三羟-7-甲氧-8-异戊烯基山柰酚（3，4`5-Tri-7-Meth-8-prenylkeamferol；）等。

茎、叶含木犀草素－7－葡萄糖甙（Luteolin-7-glucoside）.

脂肪酸和挥发油：

从苦参中已鉴定出20种脂肪酸成份，主要为不饱和脂肪酸，其含量占脂肪酸总量的72.79%，其中亚油酸相对含量为48.95%，苦参挥发油已鉴定出47个成份。

2、苦参的药材鉴定

取该品横切片，加氢氧化钠试液数滴，栓皮即呈橙红色，渐变为血红色，久置不消失．木质部不呈现颜色反应．

取该品粗粉1g,加含0.5%盐酸乙醇溶液20ml,加热回流1小时，滤过，滤液加氨试液使呈中性，蒸干，残渣加1%盐酸溶液1Oml使溶解，滤过，取滤液分置三支试管中，一管中加碘化铋钾试液，生成红棕色沉淀；一管中加碘化汞钾试液，生成黄白色沉淀；另一管中加碘化钾碘试液，生成棕褐色沉淀．

取该品粉末0.5g,加甲醇10ml,加热回流10分钟，滤过．取滤液lml,置试管中，加镁粉少量与盐酸3～4滴，加热，显红色；另取滤液点于滤纸上，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（254nm）下观察，显黄绿色荧光．

取该品粉末0.5g,加氯仿25ml、浓氨试液0.3ml,放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5ml使溶解，作为供试品溶液．另取氧化苦参碱和槐定碱对照品，加乙醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液，作为对照品溶液．吸取上述两种溶液各4μ1,分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以本一丙酮一甲醇（8:

3:

0．5）为展开剂，展开，展距约8cm,取出，晾干，再以甲苯一醋酸乙酷一甲醇一水（2:

4:

2:

1）10℃以下放置后的上层溶液为展开剂，展开，展距同上，取出，晾干，依次