血液循环系统药物实验doc.docx

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第五章　血液循环系统药物实验

实验三十八强心药对离体蛙心作用观察

目的观察强心苷、咖啡因、肾上腺素对离体蛙心的作用，并掌握每种药物的作用特点。

实验材料

器材——生物机能实验系统、蛙心套管、试管夹、蛙板、大头针、蛙心夹、长滴管、铁支架、烧杯、长剌针、手术刀、眼科剪、虹膜镊、丝线等。

药品一一任氏液、0.04mg/mL毒毛旋花子苷K溶液、0.1%盐酸肾上腺素溶液、2%安钠咖溶液。

动物——青蛙（或蟾蜍）。

实验方法

将已插好蛙心套的离体蛙心（离体蛙心制作见后“附”）安装到生物机能实验系统上，记录一段正常曲线。

然后用下列药物逐次滴入套管内，每试完一种药物，即行吸出，更换任氏液，并反复用任氏液冲洗数次。

1．2%安钠咖液2~3滴。

2．0.1%盐酸肾上腺素溶液2~3滴。

3．0.04mg/mL毒毛旋花子苷溶液2~3滴。

注意事项

若有条件的话，可制成三个离体蛙心，分别连于生物机能实验系统上，然后向甲、乙、丙三个离体蛙心内分别加入上述三种药液，再进行记录。

实验记录

药物反应

描绘曲线图

用药前

安钠咖

盐酸肾上腺素

毒毛旋花子苷K

讨论题

1．根据描绘的曲线图（幅度、频率等），谈谈这三种药物对心脏的作用特点。

2．强心苷、咖啡因、肾上腺素对心脏的作用为何有差别。

附离体蛙心的制备：

1．斯氏离体蛙心的制备

取蛙一只，用探针由枕骨大孔插入，破坏大脑和脊髓后仰位固定在蛙板上，开胸并充剪开心包膜，分别结扎左、右主动脉，并在左主动脉下穿线打一松结备用。

在左主动脉靠心脏处剪一V形切口，将装有任民液的蛙心套管从主动脉经动脉球插入心室内（图38-1，套管从切口处插入，沿箭头所示方向前进，通过主动脉球后，套管转向左后方，此时用镊子将动脉球向套管移动的相反方向轻轻提起即可使套管通过房室瓣膜孔顺利进入心室，进入心室后，可见套管内液体会随心室搏动而上下移动）然后扎紧松结，并固定在套管小钩上，以免心脏滑脱。

并用吸管吸去套管内的血浆，换上任氏液。

剪断左、右主动脉，轻提起心脏，在静脉窦以下把其余血管一起结扎，在线结以下剪断，即成斯氏离体心脏标本。

图38-1斯氏离体蛙心制备

2．八木氏离体蛙心制备

取大蛙一只，破坏大脑及脊髓后，仰位固定在蛙板上，剪开胸部和心包，暴露心脏（图38–2）。

按以下顺序进行操作：

于两侧肺门处，找出左右前（上）腔静脉，分别结扎之；结扎右主动脉；于左主动脉及后（下）腔静脉下各穿一丝备用；将静脉套管朝心脏方向插入后腔静脉，并结扎之，将动脉套管朝心脏方向插入左主动脉并结扎之，此时即构成一个人工循环系统，由动脉套管流出的滴数即可以代表心搏出量；仔细地将心脏剪下以试管夹夹住套管，固定在万能支柱上，备用。

图38-2蛙心及其所连附的血管

左一腹面观右一背面观

1.心室2.左心耳3.右心耳4.主动脉干1.静脉窦2.窦耳孔3.左心耳4.右心耳

5.颈动脉弓6.体动脉弓7.肺皮动脉弓5.右前腔静脉6.后腔静脉7.右颈动脉弓

8.左前腔静脉8.右体动脉弓9.右肺皮动脉弓10.肺静脉

实验三十九强心药对在体蛙心脏的作用

目的熟悉在体蛙心实验操作，观察强心药对在体蛙心的作用。

实验材料

器材——蛙板、探针、外科剪、线、蛙心夹、眼科镊、生物机能实验系统、蛙心插管、保温瓶、滴管。

药品——1﹕1000氯化乙酰胆碱溶液、1﹕1000盐酸肾上腺素溶液（或1:

500硫酸阿托品溶液。

）

动物——青蛙（或蟾蜍）。

实验方法

用探针从枕骨大孔刺入将脑和脊髓破坏，然后将蛙仰卧于蛙板上，四肢蛙蹼用大头针固定，在胸骨沿正中线切开皮肤，用镊子和剪刀除掉胸骨的中间区，作成一小窗（以能暴露出心脏即可，胸骨毁坏过大会使内脏翻出，反而不佳），将心脏剥出胸骨外，再用小剪刀剪开心包膜，露出心脏，把蛙心夹轻轻家在蛙心夹上，连于生物机能实验系统上。

实验过程中要时时滴几滴任氏液于心脏，以防心脏干燥。

记录心脏的正常跳动曲线，并注意观察心室和心房收缩期的收缩及其协调性，房室间传导情况（心房率／心室率）；观察心率（次／分），收缩力强度（以振幅高度表示）。

然后用滴管将氯化乙酰胆碱溶液（1:

1000）滴加于心脏上1~2滴。

注意心脏收缩强度和心率受到某种程度的抑制。

再用滴管将盐酸肾上腺素溶液（1:

1000）或硫酸阿托品溶液（1:

500）滴加于心脏上1~2滴。

注意少时心脏收缩即增强和心率加快。

也可向下肢淋巴囊内注射毒毛旋花子苷K0.25mg，或铃兰酊0.5mL，或毒毛旋花子酊0.5mL。

将各药描记的曲线结果打印出来做为记录。

讨论题

1．讨论利用在体心脏和离体心脏观察强心药的作用各有何优缺点。

2．药物对在体心脏和离体心脏的作用有何差别？

为什么？

实验四十强心苷对离体衰竭蛙心的作用

目的通过实验了解强心苷对离体的衰竭蛙心的作用。

实验材料

器材一一蛙板、探针、外科剪、线、蛙心夹、眼科镊、生物机能实验系统、蛙心插管、保温瓶、滴管。

药品——3×10-4M哇巴因、低钙任氏液（含钙量为正常任氏液的10%）。

动物一一青蛙。

实验方法

制备斯氏离体蛙心。

蛙心套管内灌入任氏液1~2mL，记录正常心跳曲线，然后换入同量的低钙任氏液，观察心跳的变化。

待心跳减弱趋于恒定时，给3×10－4M哇巴因0.2~0.3mL，观察心跳曲线，与低钙所致心跳减弱情况曲线比较，观察哇巴因对衰竭的离体蛙心的作用。

在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变。

注意事项

本实验最好用蛙。

因蟾蜍对强心的作用不敏感。

原因是蟾蜍体内有一种蟾蜍毒素，亦是一种苷类，使蟾蜍对强心苷具备相当大的耐受性。

不过对洋地黄制剂粗品（如洋地黄酊或浸剂）比对纯制剂敏感，对低钙造制的心衰，能起到强心作用。

20%洋地黄溶液的用量为0.3~0.6mL。

讨论题

强心苷对离体的衰竭蛙心的作用如何？

实验四十一离体兔心灌流实验

目的了解强心药对离体兔心的作用。

实验材料

器材一一下口瓶、恒压管、氧气瓶、铁支架、双凹夹、冷凝管夹、铁环、螺丝夹、滑轮、电热恒温水浴锅、蛇形管、兔心插管、蛙心夹、生物机能实验系统、烧杯、量杯、手术刀、剪、解剖镊子、木制管夹、温度计、石棉板、自动恒温装置一套、注射器。

药品——0.01%肾上腺素溶液、洋地黄毒苷溶液（稀释20倍、1mL含0.01mg）、5%氨茶碱溶液、任氏液。

动物——兔。

实验方法

取健康兔一只，击头部致死后，于胸正中线切开胸腔，暴露心脏。

切断肺根及上下腔静脉，在无名动脉之上切断主动脉，取出心脏，立即将心脏放在事先冰过的任氏液中，由于心脏自动收缩，将心脏内的血液洗出（亦可轻轻挤压心脏），再将套管由主动脉弓外向心插入、结扎。

然后用恒温（37℃）、恒压（50~60cm汞柱）的充分氧饱和的任氏液灌注兔心。

灌流液自主动脉注入冠状动脉，由下腔静脉流出。

将蛙心夹夹住心尖与生物机能实验系统相连，记录心收缩曲线。

由心内滴出的液体量，即为冠状动脉流量。

然后依次由心插管的侧方，皮管内注入下述药物。

1．0.01%盐酸肾上腺素溶液0.1mL（10µg）。

2．25%氨茶碱溶液0.2mL（5mg）。

3．洋地黄毒苷溶液（20倍稀释）0.1mL。

注意事项

1．灌流液必须有充分饱和的氧气，温度与体温相同，温度过高易致心室颤动反应。

2．插主动脉套管时，套管的管口应在冠状动脉开口的上面，不要插得太深，以免影响脉灌流。

讨论题

比较强心药对离体蛙心和离体兔心的作用。

实验四十二强心苷对温血动物在体衰竭心脏的影响

目的通过此实验加深对强心苷作用的理解，以便更好的用药于临床。

实验材料

器材——生物机能实验系统、兔手术台、气管插管、手术剪子、手术刀、注射器、针头、止血钳、腰椎穿刺针、骨剪、拉胸钩、细缝合针、肌力换能器。

药品——20%乌拉坦、20%戊巴比妥、毒毛旋花子苷K、生理盐水。

动物一一兔（或猫）。

实验方法

取兔一只称重，由腹腔注射20%乌拉坦（5mL/kg）进行麻醉。

见兔全身瘫软后，把它仰位固定在手术台上，剪开颈部正中皮肤，在甲状软骨下方分离出气管，做T字形切口，插入气管套管，以备连接人工呼吸器。

在右侧腹股沟处分离股静脉并插入静脉套管，结扎固定，以备给药或输液。

沿胸部正中线切开皮肤，用电烧灼器或刀背离断附着于胸骨上的肌肉，暴露胸骨（此时把气管套管与人工呼吸器相连接，进行人工呼吸）。

然后在剑突处用止血钳戳一小孔，用骨剪由小孔插入，沿中线将胸骨剪开，用拉胸钩将胸壁挂开，充分暴露心脏。

将心包膜作“十”字形切开缝于胸壁上，使心脏平悬于胸腔正中。

从此开始，要经常用温生理盐水润湿心脏。

用较细的缝针，迅速在心尖部穿一细线，连接肌力换能器，连于生物机能实验系统上，以记录心脏曲线。

先记录一段心脏正常活动曲线，然后用20%戊巴比妥钠2mL静脉注射，反复给药约5~7次，直至出现心衰为止（心脏收缩幅度明显变小）。

然后由股静脉注入毒毛旋子苷K60µg左右。

经1~3分钟强心苷可发挥正性肌力作用，心脏收缩幅度明显增大。

注意事项

1．术中应避免出血，尤其开胸骨时，且勿偏离正中线，以免损伤肋间动脉及乳内静脉。

2．呼吸道要保持通畅，要及时清理分泌物。

人工呼吸器的各种数据要调节适当，以保证通气量正常。

讨论题

强心苷对衰竭心脏与正常心脏的作用有何特点。

实验四十三强心苷对心脏活动的影响

目的通过心电图描记，观察和分析强心苷对心脏活动的影响，从而说明强心苷的治疗作用和毒性作用。

实验材料

器材一一心电图机及其全部附件、心电示波器、毛剪、兔手术台、细绳、注射器、针头。

药品一一毒毛旋花子苷K、L注射液。

动物一一兔。

实验方法

取兔一只，称重，不需麻醉（如用豚鼠，则须以20%乌拉坦5~6mL/kg腹腔注射麻醉），仰位固定于手术台上，分别在四肢皮下扎入一针头，并与心电图机的引导电极相连（红色-右前肢，黄色-左前肢，蓝色-左后肢，黑色-右后肢）。

调整心电图机标准电压1mv=10mm，纸速50mm/秒（因为动物心率较快，为使波形记录清楚，故可用50mm/秒速度记录为好），直接记录Ⅱ号导联心电图；或与心电示波器连接，在荧光屏上观察清晰的心电波。

先描记正常心电图波型，然后自耳静脉注入毒毛旋花子苷K0.20mg/kg，观察其心电图变化。

（要注意心率，P-R间期，T波及RT段变化等）。

追加毒毛旋花子苷K0.4mg/kg后，其心电图是否有改变。

实验记录

心电变化

用药前

iv0.20mg/kg毒毛K

iv0.40mg/kg毒毛K

心电

图型

P

P-R

Q-T

T

S-T

附1.兔正常心电参考数值（标准Ⅱ导联）

波型

间期（妙）

波幅电压（毫伏）

P波

0.031

向上0.075向下0.135

P-R波

0.068

QRS综合波

0.042

Q0.120R0.160（标准导联）S0.130

Q-T波

0.140

T波

0.065

向上0.210向下0.180

心率（次/分）

214-272（247）

2.兔正常及注射毒毛旋花子苷K后的心电图型

兔正常及注射毒毛旋花子苷K后的心电图型见图43-1，43-2。

图43-1兔正常心电图

图43-2注射0.2mg/kg毒毛K后，心电变化

讨论题

心电图波变化说明了什么问题。

强心苷在临床应用时应注意哪些问题。

实验四十四药物对大鼠左心功能与血流动力学的影响

目的学习血流动力学实验方法和大鼠左心室插管技术。

了解各种血流动力学参数及其评价药物对心功能影响的作用。

实验材料

器材一一多道生理记录仅（4~8道）、双线示波器（