3M快速测试片.docx
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3M快速测试片
3MTMPetrifilmTM细菌总数测试卡产品简介：
红色指示剂使读数更方便准群；48H确认菌落数；亦适用乳酸菌检测。
编号：
6046规格：
50片/包，20包/箱
3MTMPetrifilmTM霉菌和酵母菌测试片
产品简介：
测试片中添加抗生素，可抑制细菌生长；含酵母菌指示剂，使酵母菌更容易计数；3－5天确认霉菌酵母数。
编号：
6417规格：
50片/包，20包/箱
3MTMPetrifilmTM大肠菌群测试片
产品简介：
含改良VRB培养基；目的菌落显示为红色气泡;24H即可确认菌落数，节省检验时间2天。
编号：
6416规格：
25片/包，40包/箱
3MTMPetrifilmTM高灵敏度大肠菌群测试片
产品简介：
灵敏度高达1cfu/5ml或1cfu/5g；目的菌落显示为红色带气泡，粉红色菌晕辅助计数；24h即可确认菌落数。
编号：
6415规格：
25片/包，20包/箱
3MTMPetrifilmTM快速大肠菌落群测试片
产品简介：
培养基中含有特定的PH指示剂；6--14h可估计大肠菌落数；24h培养可获得准确的大肠菌群数。
编号：
6046规格：
25片/包，20包/箱
3MTMPetrifilmTM肠杆菌科测试片
产品简介：
同时检测乳糖发酵型的大肠菌群和非乳糖发酵型的沙门氏菌。
志贺氏菌、耶尔森氏菌等；24h确认肠杆菌科菌落数；加工环境
和加工后无染的优良指示。
编号：
6421规格：
25片/包，40包/箱
3MTMPetrifilmTM大肠菌群/大肠杆菌测试片
产品简介：
一个测试片同时检测大肠杆菌和大肠菌群；24—48h确认大肠杆菌数，节省时间2－3天；大肠菌群显示为蓝色带气泡。
编号：
6414规格：
25片/包，20包/箱
3MTMPetrifilmTM金黄色葡萄球菌测试片
22—29h内确
产品简介：
一次检测等于三个Baird—Parker琼脂平板和凝固酶实验的效果；适用脱氧核糖核酸酶反应系统，特异性更强;
认为金黄色葡萄球菌数；确认反应片并非必须。
编号：
6491规格：
25片/包，20包/箱
3MTMPetrifilmTM环境李斯特菌属测试片
产品简介：
培养时间仅为28±2h;无需增菌培养；紫红色菌落便于计数；可作定性、半定性和定量判读；便于室内操作。
编号：
6448规格：
25片/包，8包/箱
3MTMPetrifilmTM免疫富集法李斯特菌快速检测试剂盒
产品简介：
样品经过增菌后，无需其他试剂，仅需适用本检测试剂盒就可以完成后续步骤，灵敏度达到1cfu/25g;对于部分食品，可在
不到32h得到推测的阳性结果。
编号：
6448规格：
20〜40个/盒
3M细菌测试纸片系列均原产自美国，确认各类细菌菌落12〜24H就可出结果，快速、简单、便捷！
！
！
3M细菌总数测试片操作以及判读
一、测试细菌总数操作方法
1、未开封时，冷藏于w8C
（W46T），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。
2、已开封的，将封口以胶带封紧。
3、保存再封的袋于w25C
（<77F）和湿度<50%，不要冷藏已开启的包装袋，并于一个月内使用完。
4、制备1：
10和更大稀释的食物样品稀释液，称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器内，如均质袋、稀释瓶、WhirlPakbag或者
其他灭菌容器内
5、加入适量的无菌稀释液，包括
BufferedpeptoneBuffer起缓冲
作用的蛋白胨缓冲液（IDF
phopsphatebuffer,用0.0425g/L
6、搅拌或均质样品。
样品的稀释液调PH6.5—7.2对酸
性样品的稀释液用INNaOH
对碱性样品用INHCL调PH
的KH2PO4调PH7.2）、0.1%的蛋
白胶水（ISO方法6887）、缓冲蛋白胶水（ISO方法6579）、盐溶液
（0.85-0.90%）、bisulfite-freeletheenbroth或蒸馏水.不可使
能抑止菌生长。
于圆形的培养面积上，切勿扭转压
8、使用吸管将1mL样液垂直滴加
在测试片的中央处。
10、使用压板隆起面底朝下，放置
在上层膜中央处。
至20片，对有一定湿度养箱能保
板。
持最少份损失是需要的。
13、测试片的透明面朝上，可堆叠
15、可以分离菌落作进一步鉴定，
即掀起上层膜，由培养胶上挑取单
个菌落。
二、测试细菌总数判读方法
Count=0
在petrifilmAC
测试片上，很容易
解释,图2测试片
上没有任何菌落
生长.
Aerobic
bacteriacount=152
测试片中含有一
种红色指示染剂
可使菌落着色，计
算所有红色菌落
（不论其大小和颜
色深浅均计算
之）.
*
Count=16
图3示有不多的
菌落.
Count=143
PetrifilmAC测
试片菌落数适宜
计数范围是
25-250,见图4
以20可得到整个测试片上的菌落数
Count=tntc（estimatedcount=103）
图6所示
petrifilmAC测
试片上菌落太多
而无法计数
（tntc）
count=tntc（Esti
mated
count=105）
有很多咼数量菌
落,使整个生长区
变粉色,如图7所
示,你仅可在生长
区边缘现观察到
单个菌落，应计录
为菌落太多无法
计数（TNTC）
count=tntc（Estimatedcount=103）
有时菌落分布出
现不均衡，如图8所示,这也记录为
TNTC.
7■-*
«*+■单
■.**■;'”
Count=tntc（Esti
mated
count=107）
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在图9中
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petrifilmAC测
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试片上的菌落，最
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先粗略一看是可
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计数的,然而,你
:
**■
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密切注意到生长
9
区边缘,能看到高
1〔■:
■
密度的菌落，应记录为TNTC
Estimated
count=160
很少数菌种会液
化petrifilmAC
测试片上的培养
基，如图10所示.
若有这种现象发生，可选择没有液
化区的几个有代
表性菌落的小方
格（1cm2）,计算平均菌落数.不要计数液化区内的红点
Count=83
因为在petrifilm
AC测试片上菌落是红色的，你会和不透明的不规则形状的事物颗粒区分开,见圆圈1和2.
3M乳酸菌测试片操作以及判读2*MRS的操作步骤
1、按说明书要
求的2倍用量
制备2XMRS肉
泳例如：
如
2、用标准稀释液制备1:
10样品稀释液，该样品稀释液可用于检测其
他微生物。
果说明书要求
1L水中加入55gMRS＞则2XMRS则为1L水中加入
110gMRS.
3、用1mL3M
电子加样器将
1:
10样品稀释
液做1:
2稀释。
先取0.5mL肉
4、接种：
在PAC
检测片上接种
1mL1:
20样品稀
释液（0.5mL1:
10标准稀释液
2XMRS肉汤，然后再吸取0.5mL1:
10样品稀释
+0.5mL2XMRS肉汤=1:
20含单倍MRS的样品稀释
液，混匀后即可获得含单倍MRS的1:
20样品液）
稀释液。
5、培养：
厌氧培养测试片。
将检测片透明膜一面朝上放入厌氧罐中，叠放数量不得超过20片。
如果检测片超过20片,可在同一罐中用一个坚硬的分隔器将检测片分开培养。
将厌氧罐放入30C〜35C（86C〜95T）培养箱中培养48+3h.
6、判读：
PAC测试片可在标准菌
■*
落计数器或其他放大光源下计数。
测试片赏的菌落
数X稀释倍数（20）即为每毫升样品中酸乳菌数。
详见判读手册。
4*MRS肉汤的操作程序
1、按说明书要求的4倍用量制备4*MRS肉汤
2、用标准稀释液制备1:
10样品稀释液（11g/99mL或25g/225mL）。
取8mL供其它种类的微生物检测用。
3、将4*MRS肉汤加入1:
10标准样品稀释液中，将获得含0.5MRS的样品稀释液。
如果稀释液中含有
11g样品、99mL标准稀释液，接种其它微生物测试片后，再加入
18mL4*MRS肉
PAC测试片上生长的菌落数乘以
11即为最终结果（个/g）
1、制备至少1:
10或更高稀释
度的样品稀释
液。
称量食品
样品于WirPak
2、加入适当的肉汤稀释液，稀释液的配置方法根据说明书制备。
如果使用一种1：
10
取样袋、均质袋、稀释瓶或其它适合的消容器中
稀释液检测多种微生物，3M公司提供了更为简便的
汤
PAC测试片上生长的菌落数乘以
11即为最终结果（个/g）。
*如果稀释液中含有25g样品、
255mL标准稀释液，接种其它微生物检测片后，再加入41mL4*MRS
肉汤
多种菌检测程序（见前页）
3、如果需要进
4、接种：
按操作
行多倍稀释，
说明接种1.0mL
肉汤稀释液只
__j_
样品稀释液于
能用于最终稀
Petrifilm
释步骤。
初始
稀释可使用标准稀释液，包括磷酸盐缓冲液（ID）
F磷酸盐缓冲液，0.0425g/LKH2POI4Ph7.2）、
0.1%蛋白胶水，蛋白胶盐稀释液（ISO方法
6887）、蛋白胶水缓冲液（ISO方法6579）、生理盐水（0.85〜0.90%），不含亚硫酸氢盐的Letheen肉汤或蒸馏水，每步稀释都应充分混匀。
5、培养：
厌氧培养测试片。
将测试片透明面朝上放入
GASPak厌氧罐
中，叠放数量不得超过20片。
如果检测片超过
20片，可在同一罐中用一个坚硬的分隔器将检测片分开培养。
将厌氧罐放入30C〜35C
（867-95?
）培养箱中培养48+3h.
6、判读：
—■—-
Petrifilm:
PAC
测试片可在标准
菌落计数器或其
他放大光源下计
数。
测试片赏的菌落数乘以稀释倍数，可获得每毫
升样品中酸乳菌落数。
详见判读手册。
判读手册
O
2
■
■■
*G
■
Count=238
Count=30
使用PAC测试片，用MRS肉汤稀释样品和厌养，
测试片中有导型发家哦的乳酸菌（产气）和同型发酵
可促进同型发酵的乳酸菌生长.
的乳酸菌.用MRS肉汤稀释，使异型发酵的乳酸菌
图1为同型发酵的乳酸菌落（不带气泡）的例子.
在暗影背景下有明显气泡产生（见黑圈1）
生长区边缘的异型发酵乳酸菌菌落大约在1/4英寸
时，可能不产生可视的气泡（见黑圈2）.
*审
一T…-■
J■
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:
-
■
Count=O
Count=60
图3是用MRS内汤为稀释液接种PAC测试片作为
测试片最适宜计数范围是25-250个菌落，计数所有
对照，以MRS为稀释液及厌氧培养将在测试片上
菌落,不管其大小和颜色深浅.
产生一个稍显暗色的浅色圆形生长区域.
匚■
.1■
■
Estimatedcount=440
Count二TNTC（Estimatedcount=106）
测试片面积约为20cm2.当菌落数超过250个（如
当菌落数多不可计（tntc）时，整个生长区可能变为
图5所示）时，可估算菌落数.选择其中一个或数
粉红色，如图6所示.将测试片与以MRS肉汤作对照
个有代表性菌落的小方格（1cm2）,计算平均菌
的测试片做比较，因为测试片的颜色变化是微小的
*
*
O':
1’
«
1―祐
Count=TNTC
Count=52
Count=TNTC（Estimatedcount=106）
Conut=TNTC（Estimatedcount=108）
仔细观察,在测试片生长区中心和边缘处可见针尖大小的菌落，计录为TNTC结果.
当菌落数很多时，许多针尖大小的菌落会环绕在生长区边缘，记录为TNTC.
图9是TNTC的又一个例子.同型发酵乳酸菌菌落
（无气泡产生）（黑圈1）与异型发酵乳酸菌菌落
（有气泡产生）（黑圈2）同时出现.
人为的气泡可能是不适当的接种所致，他们形状不
规则,且不与菌落相连接
3M大肠杆菌/大肠菌群快速检验测试片操作以及判读
一、测试大肠杆菌/大肠菌群操作方法
1、未开封时，冷藏于w8C（＜46?
）,并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。
2、已开封的，将封口以胶带封紧。
3、保存再封的袋于w25C（W77?
）
和温度＜50%，不要冷藏已开启的包装
袋，并于一个月内使用完。
4、制备1:
10和更大稀释的食物样品稀释液，称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器内，如均质袋、稀释瓶、
WhirlPakbag或者其他灭菌
5、加入适量的无菌稀释液
BufferedpeptoneBuffer（IDF
包括
6、搅拌或均质样品
酸性样品的稀释液用INNaoH
调PH6.5-7.5，对碱性样品的稀释液用INHCL调PH6.5—7.5。
phopsphatebuffer,用0.0425g/L
KH2PO4调PH7.2）、0.1%的蛋白胶水（ISO方法6887）、缓冲蛋白胶水
（ISO方法6579）、盐溶液（0.85-0.90%）、bisulfite-freeletheenbroth
或蒸馏水.
但不可用含有枸橼酸盐、bisulfiteorthiosulfate的缓冲液.因为它
能抑止菌生长。
7、将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。
10、使用压板（平面底朝下）放置在上层膜中央处。
12、拿起压板，静置至少分钟以使培养基凝固。
14、可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数，并可参考判读卡计算菌落数。
11、轻轻的压下，使样液均匀覆盖于
圆形的培养面积上，切勿扭转压板。
13、测试片的透明面朝上，可堆叠至20片，对有一定湿度养箱能保持最少份损失是需要的。
15、可以分离菌落作进一步鉴定，即掀起上层膜，由培养胶上挑取单个菌落。
二、测试大肠杆菌/大肠菌群判读方法
PetrifilmColiformTMColiform测试片含有VRB培养剂（VioletRedBile），一种冷水可溶性的凝胶剂和四唑翁（tetrazoIlium）指示剂,
可增强菌落计数效果。
绝大多数E.coli（约占97%能产生-葡萄糖甘酸酶与培养基中的指示剂反应，产生蓝色沉淀环绕在大肠杆菌菌
落周围，表面覆盖的胶膜，可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体，约有95%勺大肠杆菌产生，形成蓝色或深蓝上菌落并有气泡相连接,
气泡大小约为1个菌落直径。
PetrifilmCC测试片上生长
AOAC和FDA细菌学分析手册（RAM规定大肠菌群为革兰氏阴性杆菌，发酵乳糖产酸产气。
大肠菌群菌落在
产酸，PH指示剂使培养基颜色变深，在红色菌落周围有气泡者，为大肠菌群细菌。
大肠杆菌鉴定，在不同国家可以有变更（见培养时间
和温度部分指示）
该测试片不能单独测
E.coliO157,像大
多数其他
E.conliform培养基
一样,它没有专门指
示是否有任何0157菌
QAC确认的方法：
E.coli=49（蓝色菌落
带有气泡）
Nogrowth=0
注意图2到8培养基颜色的变化，随着
E.coliform
菌数增多，培养基颜色变成暗红色或蓝紫色，背景的泡（沫）为
Totalcoliform=87（红色和蓝色菌落带有气泡）
培养基现象，不是大肠杆菌或大肠菌群生长结果，见方框1.
E.coliconnt=13
Totalcoliform
count=28
PetrifilmEc测试片
菌落数适宜计数范围
是15-150,不要计算
圆形培养基外的菌
落，因为泡棉上已不
含选择性培养基.见
圆圈！
1示为背面光照的红蓝菌落
E.coli
count=3
任何蓝色菌
落（蓝色到红蓝色）表明有
E.coli存
在,正面照明
增强形成蓝
色沉淀菌落的测定,圆圈
圆圈2示为同一菌落的正面光照蓝
色沉淀更明显些
E.colicount=17
Estimatedtotal
coliformcount=150
测试片面积约为
20cm2,当菌落数超过
150个,为了估计菌
落数可选择其中一个
或数个有代表性菌落
的小方格（1cm2）计算
平均菌落数，再乘以
20方可得到整个测试片上的菌落数
Actual
Petrifilm
EC测试片菌
落无法计数
时至少有下
列现象之一：
1.很多小菌
落
2.有许多气
泡
count〜106
3.培养基的颜色变深,由红色到蓝紫色
高数量的大肠杆菌可
以引起长生区变成蓝
紫色.
Actualcount〜108
Presumptive
E.couli
Estimated
total
coliform
当大肠菌群
数＞108时,
count〜8
count〜108
一些大肠杆
菌菌株可能产生少量气体和不明确的蓝色菌落.所有不带气泡
的蓝色菌落和（或）蓝色环带,推定为大肠杆菌需计数，如有必要
当有大量的非大肠菌
群细菌如假单胞菌属
细菌存在
试片培养基颜色呈黄
色.
ctualcount〜108
时,petrifilmEC测
需挑取不带气泡的蓝色菌落，进行确认试验.
Total
coliform
count=3
食物颗粒为
不规则形状，
且不带气泡.
count=78
气泡可有不同形状，气泡可使菌落撑散，使菌落轮廓似气泡,见圆圈1和2.人为气泡可能是不当的操作所致,或是来自样品内的气体,它们成不规则形状，且
示为不同形状气泡与菌落连接情况，所有菌落应记
3.已启开的包装袋不要冷藏并于一个月内使用完
4.制备食物样品稀释液，称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器
内，如均质袋、稀
释瓶、WhirlPakbag或者其他灭菌容器内
不与菌落相连接.见圆圈3
3M高灵敏度大肠菌群测试片操作以及判读
一、高灵敏度大肠菌群测试片操作方法
1.未开封时，冷藏于w8C（w467），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。
6、搅拌或均质样
品.
5.力卩入适量的无菌稀释液，包括Bufferedpeptone
Buffer（IDFphopsphatebuffer,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2）、0.1%的旦白胶水（ISO方法6887）、缓冲旦白胶水（ISO方法6579）、盐溶液（0.85-0.90%）、
bisulfite-freeletheenbroth
或蒸馏水.但不可用含
有枸橼酸盐、bisulfiteorthiosulfate
的缓冲液.因为它能抑止菌生长。
样品的稀释液调PH6.6-7.2对酸性样用INNaOH碱
性样用INHCI调PH
7、将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。
8、使用吸管将1ml
样液垂直滴加在测
试片的中央处。
10、使用压板（平面底朝下）放置在上层膜中央处。
9、细心将上层膜缓慢盖下，避免有气光泡产生，切勿使上层膜直接落下。
11、轻轻的压下,切勿扭转压板。
使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上,
12、拿起压板，静置至少1分钟以使培养基凝固。
15、可以分离菌落作进一步鉴定，即掀起上层膜，由培养胶上挑取单个菌
可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计
并可参考判读卡计算菌落数。
13、测试片的透明面朝上，可堆叠至20片。
培养时间和
温度因方法而有不同，最通用的认可方法是：
总大肠菌群
•AOAC官方方法986.33和989.10（乳/生乳和其它乳制品）
大肠菌群：
32C土1C培养24±2h
•AOAC官方方法991.14（食品类）
大肠菌群：
35C土1C培养24±2h
•NMKL方法（147.1993）
大肠菌群：
37C土1C培养24±2h
•AFNOR认可方法3M01/2-09/89A和B（除水生贝壳类动物外的所有食品）
大肠菌群：
30C土1C培养24±2h
耐热的（粪）大肠菌群
•AFNOR认可方法，3M01/2-09/89C（所有食品）44C土1C培养24±2h。
当提高培养
温度时，培养箱应有一定的湿度是需要的。
二、高灵敏度大肠菌群计数测试片判读方法
Coliformcount=4
Coliformcount=13
在PetrifilmTM高灵敏度检验测试片上菌落计数相当容易。
测试片中的指示剂使革兰氏阴性菌染成红色，上层膜能截留大肠菌群产生的气泡，当
大肠菌群大量产酸时，菌落周围会产生粉红色的菌晕。
所以，计数红色带有气泡的菌落为大肠菌群，菌落周围的粉红色菌晕使计数更加方便。
2
Coliformcount=30
圆圈1,2和3中的气泡形状有所不同。
圆圈1中的气泡和菌落相邻；圆圈2中的
气泡撑破了菌落，使菌落看似气泡的“轮
*
if
廓”；圆圈3中的菌落被3个小气泡围住。
1”*
细菌学手册上规定，红色不带有气泡的菌
*■-
F-
落不计作大肠菌群。
Q1
3
4
Coliformcount=0
注意图4至图9中培养基颜色的变化。
随着大肠菌群数和产酸的增加，培养基的颜色由淡桔黄色（图4）逐
渐向明显的粉红色（图9）转变。
同时做阴性对照有助于区分培养基的颜色。
Coliformcount=90
6
Estimatedcoliformcount=320
圆形的生长面积约为60
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