最新浙江大学考研生物化学真题含详细解析汇编.docx

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最新浙江大学考研生物化学真题含详细解析汇编

浙江大学2003—2007考研生物化学真题（含解析）

2003、真题解析

1、简述SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得基本原理，你使用该技术分离和检测过何种物质？

主要操作步骤有哪些？

该题是实验操作中的常考题

SDS－PAGE：

当SDS与蛋白质结合后，蛋白质分子即带有大量的负电荷，从而掩盖了天然蛋白质分子间的电荷差别。

与此同时蛋白质在SDS的作用下结构变得松散，形状趋向一致，所以各种SDS-蛋白质复合物在电泳时产生的泳动率差异，只反映了分子量的差异，即纯利用分子筛效应，按蛋白质分子量大小进行分离，分子量越大移动越慢。

●应用

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳还可以用于未知蛋白分子量的测定，在同一凝胶上对一系列已知分子量的标准蛋白及未知蛋白进行电泳，测定各个的标准蛋白的电泳距离（或迁移率），并对各自分子量的对数（logMr）作图，即得到标准曲线。

测定未知蛋白质的电泳距离（或迁移率），通过标准曲线就可以求出未知蛋白的分子量。

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测，纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带，但如果蛋白质是由不同的亚基组成的，它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度，一般只需要不到微克量级的蛋白质，而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况，这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于单链ＤＮＡ、寡核苷酸片断以及蛋白质亚基，膜蛋白、肽类等物质的分析，还可以用于研究大分子的折叠结构等方面。

●基本操作

SDS-PAGE的基本操作和聚丙烯酰胺凝胶电泳相近，其支持介质都是聚丙烯酰胺凝胶，因此在制胶、加样和电泳仪器都都相同或相近，区别的是SDS-PAGE需要有标准蛋白溶液及供试品溶液的制备，样品预先需要用SDS处理。

一般采用取标准蛋白，加水制成每1ml中含2～5mg的溶液，与水解液（取尿素21.6g和十二烷基硫酸钠0.04g，溶于40ml水中）1∶3混合，置冰箱中过夜。

供试品照上述方法配制。

此外，在电泳结束以后，需要对相对迁移率和分子量进行计算将电泳脱色后的区带用卡尺或用扫描定位法测量染料移动的距离、染色前胶条长度、蛋白移动距离和脱色后的胶条长度。

2、质粒是基因工程中最常用得载体，为获得某种质粒（如pUC18）DNA，请你设计一个简单得实验过程（步骤）。

大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法）

此方法适用于小量质粒DNA的提取提取的质粒DNA可直接用于酶切PCR扩增。

1.     取1.5ml细菌培养物于EP管中，4000rpm离心1分钟，弃上清液，使细菌沉淀尽量干燥；

2.     将细菌沉淀重悬于用冰预冷的100µl溶液I（50mmol/L葡萄糖，10mmol/LEDTApH8.0，25mmol/LTris-HClpH8.0）中，剧烈振荡；

3.     加入200µl新配制的溶液II（0.2mol/LNaOH，1％SDS（m/v）），盖紧EP管口，快速颠倒离心管5次，以混合混合物，确保离心管的整个内表面与溶液II接触，不要涡旋，置于冰浴中；

4.     加入150µl预冷溶液III（每100ml的溶液III中含60ml5mol/L乙酸钾，11.5ml冰乙酸，28.5mlH2O），盖紧EP管口，反复颠倒数次，使溶液III在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上3~5分钟；

5.     在最大转速下离心5min，取上清液于另一新EP管；

6.     用两倍体积的乙醇室温沉淀双链DNA，振荡混合于室温放置2分钟，最大转速离心5分钟；

7.     小心吸去上清液，将离心管倒置于滤纸上，以使所有液体都流出，在将附于管壁的液滴除尽；

8.     加1ml70％乙醇洗涤沉淀，振荡混合，用12,000g离心2分钟，弃上清，将开口的EP管置于室温使乙醇挥发，直至EP管中内没有可见的液体存在（5～10分钟），用适量的ddH2O溶解；

9.     用0.5µl的RNase37℃温育5~10分钟；

10. 电泳鉴定。

3、谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展。

自己发挥，比如：

蛋白质结构与功能，RNA领域（RNA干扰），酶工程，分子病和遗传病的研究等等。

没有再出过，相当于送分题

4、DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的？

请简述其基本内容。

为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑，具有划时代的贡献？

DNA的双螺旋结构模型是在1953年由Watson和Crick两个人提出的。

按Watson-Crick模型，DNA的结构特点有：

两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。

两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10对碱基组成；碱基按A=T，G≡C配对互补，彼此以氢键相连系。

维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。

DNA双螺旋结构的提出开始,标志着生物科学的发展进入了分子生物学阶段.分子生物学使生物大分子的研究进入一个新的阶段,使遗传的研究深入到分子层次,"生命之谜"被打开,人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径.在以后的近50年里,分子遗传学,分子免疫学,细胞生物学等新学科如雨后春笋般出现,一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明,DNA重组技术更是为利用生物工程手段的研究和应用开辟了广阔的前景.在人类最终全面揭开生命奥秘的进程中,化学已经并将更进一步地为之提供理论指导和技术支持.

该题太小，以后不大会再出

5、何谓变性？

哪些因素可以引起蛋白质的变性？

何谓别构（变构）？

举一例说明之。

蛋白质受到某些物理或化学因素作用时，引起生物活性的丧失，溶解度的降低以及其它性质的改变，这种现象称为蛋白质的变性作用。

变性作用的实质是由于维持蛋白质高级结构的次级键遭到破坏而造成天然构象的解体，但未涉及共价键的断裂。

有些变性是可逆的，有些变性是不可逆的。

引起蛋白质的变性的因素有：

热、紫外线照射、高压和表面张力等物理因素，及有机溶剂、脲、胍、酸、碱等化学因素。

别构效应（allostericeffect）某种不直接涉及蛋白质活性的物质，结合于蛋白质活性部位以外的其他部位（别构部位），引起蛋白质分子的构象变化，而导致蛋白质活性改变的现象。

可分为同促效应和异促效应两类。

以氧与血红蛋白的结合为例。

该题出现多次，应引起重视。

6、试述三羧酸循环是如何沟通糖类、脂类、以及蛋白质三大有机物的代谢的？

一方面，TCA是糖、脂肪、氨基酸等彻底氧化分解的共同末端途径，另一方面，循环中生成的草酰乙酸、α-酮戊二酸、柠檬酸、琥珀酰CoA和延胡索酸等又是合成糖、氨基酸、脂肪酸、卟啉等的原料，因而TCA将各种有机物的代谢联系起来。

TCA是联系体内三大物质代谢的中心环节，为合成其它物质提供C架。

重要，会是大题中的一个知识点

2004、真题解析

1、名词解释

1）埃德曼降解：

埃德曼降解是一种蛋白质或肽的氨基末端分析法,也是一种氨基酸序列测定法。

其原理是在弱碱性条件下使N末端游离的α-氨基与苯异硫氰酸酯（PITC）偶联反应，然后用酸处理，经环化断裂、转化从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸的苯基乙内酰硫脲衍生物（PTH-氨基酸）的形态从肽链上断裂下来，然后进行分析。

2）抗体：

抗体是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白，是一种可溶性的血清糖蛋白。

其具有高度特异性和庞大的多样性两个特点。

对保护人类和脊椎动物的抗御外来物种入侵的重要武器。

3）诱导契合学说：

诱导契合学说是一种解释酶催化活性的假说。

它是指酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补的，而是在酶和底物结合的过程中，底物分子或酶分子，有时两者的构象同时发生了一定的变化后才互补的，这时催化基团的位置也正好在所催化底物键的断裂和即将生成新键的合适位置。

4）热力学第二定律：

热力学第二定律指出，热的传导只能由高温物体传至低温物体，热的自发逆向传导是不可能的。

它表明热力学体系的运动有一定的方向性，即自高温物体流向低温物体，如果要使热量从低温传向高温就必须做功。

5）补救途径：

补救途径是核苷酸合成的一种方式，它是由预先形成的碱基和核苷形成核苷酸的过程。

它包括a、碱基＋1－磷酸核糖在核苷磷酸化酶的作用下生成核苷，再在核苷磷酸激酶的作用下生成核苷酸；b、嘌呤碱与5－磷酸核糖焦磷酸在磷酸核糖转移酶作用下生成嘌呤核苷酸，这种方式更为重要。

6）荷尔蒙：

荷尔蒙又成激素，是生物体内特殊组织或腺体产生的，直接分泌到体液中，通过体液运送到特定作用部位，从而产生特殊激动效应——调节控制各种物质代谢或生理功能的一类微量的有机化合物。

它在机体的生命活动中起着重要的作用，有利于多细胞有机体的细胞及组织器官既分工又合作，形成统一的整体。

7）竞争性抑制：

竞争性抑制是酶催化活性的一种可逆抑制作用，在竞争性抑制中，抑制剂会于酶相结合，从而干扰了底物与酶的结合，其使酶促反应动力学常数Km增大Vmax不变。

由于底物或抑制剂与酶的结合都是可逆的，通过增加底物浓度可以消除竞争性抑制。

8）细胞膜：

任何细胞表面都以一层薄膜将其内含物与环境分开，这层膜成为细胞膜。

其主要由磷脂双分子层，膜蛋白和糖类组成，还有水、金属离子等。

它具有多种生物功能，起着物质运输，信号识别与传递，保护细胞等作用。

9）DNA聚合酶：

DNA聚合酶对DNA复制以及损伤修复起着重要作用。

生物体中有多种DNA聚合酶。

DNA聚合酶能催化脱氧核糖核苷酸加到DNA链末端的反应。

它以四种脱氧核糖核苷三磷酸为底物，在模板链的指导和引物3’-羟基的引导下,沿着5’→3’方向合成与模板相同性质的DNA链。

10）基因表达：

基因表达即是遗传信息的转录和翻译过程。

是指生物体通过转录将遗传信息由DNA传递到信使RNA，再由信使RNA通过翻译指导蛋白质的合成，从而将生物体储存在基因里的遗传信息通过蛋白质的形式得以表达，体现该生物体的生物学特性。

2、回答

1）根据国际分类法将酶分成哪几大类，分别叙述它们的酶反应特征。

答：

酶可以分为氧化还原酶类，转移酶类，水解酶类，裂合酶类，异构酶类，连接酶类六大类。

a）氧化还原酶类：

催化氧化还原反应。

包括a、氧化酶类：

催化底物脱氢，并氧化生成H2O2或H2O。

b、脱氢酶类：

催化直接从底物上脱氢的反应。

b）转移酶类：

催化化合物某些基团的转移，即将一种分子上的某一些基团转移到另一种分子上的反应。

c）水解酶类：

催化水解反应。

d）裂合酶类：

催化从底物移去一个基团而形成双键的反应或其逆反应。

e）异构酶类：

催化各种同分异构体之间的相互转变，即分子内部基团的重新排列。

f）连接酶类：

催化有ATP（或相应核苷三磷酸）参加的合成反应，即由两种物质合成一种新物质的反应。

2）对生物体转录和复制的特征进行说明比较。

答：

DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的，体现在：

①这两种合成的直接前体是核苷三磷酸，从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；②两种合成都是一个酶为四种核苷酸工作；③两种合成都是以DNA为模板；④合成前都必须将双链DNA解旋成单链；⑤合成的方向都是5’→3’。

DNA复制和RNA转录的不同点体现在：

①复制和转录所用的酶是不同的，复制用的是DNA聚合酶，而转录用的是RNA聚合酶；②所用前体核苷三磷酸种类不同，DNA复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即dATP、dGTP、dCTP、dTTP，而RNA转录用四种核糖核苷三磷酸，即ATP、GTP、CrP、UTP做前体底物；③在DNA复制时是A与T配对，而RNA转录是A与U配对；④DNA复制时两条链均做模板，而RNA转录时只以其中一条链为模板；⑤DNA复制是半不连续的，可产生冈崎片段，而RNA转录是连续的；⑥DNA复制时需RNA做引物，而RNA转录无需引物；⑦DNA复制时需连接酶的参与，而RNA转录时不需要。

3）叙述基因文库和cDNA文库的制作步骤并进行它们的特征比较。

答：

基因文库是指生物染色体基因组各DNA片段的克隆总体。

基因文库构建的简单步骤：

①从组织或细胞提取基因组DNA；②用限制性酶部分水解或机械剪切成适当长度的DNA片段，经分级分离选出一定大小合适克隆的DNA片段；③通常采用λ噬菌体或柯斯质粒载体等容载量较大的克隆载体，在适当位点将载体切开；④将基因组DNA片段与载体进行体外连接；⑤重组体DNA直接转化细菌或用体外包装的重组λ噬菌体颗粒感染敏感细菌细胞。

最后得到携带重组DNA的细菌群体或噬菌体群体即构成基因文库。

cDNA文库是指生物体全部mRNA的cDNA克隆总体。

构建cDNA文库的主要步骤：

①从生物体或细胞中提取mRNA；②利用逆转录酶以寡聚（dT）或随机寡聚核苷酸为引物合成cDNA的和一条链；③利用DNA聚合酶I，以cDNA第一条链作为模板，用适当引物合成cDNA第二条链，常用RNA酶H在杂交分子的mRNA链上造成切口和缺口，产生一系列RNA引物，或是除去杂交分子的mRNA后，加入随机引物，即可合成第二条链；④cDNA与载体的体外连接；⑤噬菌体的体外包装及感染或质粒的转化。

由于cDNA不含基因的启动子和内含子，因而序列比基因短，其克隆载体可选用质粒或病毒载体。

特征比较：

①包含的遗传信息不同：

基因文库中的每一个克隆只含基因组中某一特定的DNA片段。

一个理想的基因文库应包括该生物染色体基因组全部遗传信息即全部DNA序列。

cDNA文库中的每一个克隆只含一种mRNA信息。

②容量大小不同：

由于细胞中的mRNA分子数要比基因组的基因数小得多（通常大约仅有15%左右基因被表达），因而若由mRNA逆转录为cDNA，那么所构建的cDNA文库的库容量相应较基因文库小。

4）用图表来说明生物体内三羧酸循环ATP产生的经路和它们的调控机理。

异柠檬酸脱氢酶　

顺乌头酸酶

柠檬酸合成酶

答：

草酰乙酸＋乙酰辅酶A-------→柠檬酸-------→异柠檬酸-------→α-酮戊二酸

NAD+NADH＋H+

延胡索酸酶

琥珀酸脱氢酶

琥珀酰CoA合成酶

α-酮戊二酸脱氢酶

复合体

-------→琥珀酰CoA-------→琥珀酸-------→延胡索酸-------→苹果酸

FAD　FADH2　

GDP　　GTP

NAD+NADH＋H+

　-------→　　草酰乙酸

每轮循环有2个C原子以乙酰CoA形式进入，有2个C原子完全氧化成CO2放出，分别发生1次底物水平的磷酸化（琥珀酰COA转变成琥珀酸，生成GTP）、2次脱羧反应，4次氧化脱氢。

乙酰-CoA+3NAD++FAD+GDP+ Pi+2H2O → 3（NADH+H+）+FADH2+GTP+2CO2+CoASH

三羧酸循环的调控酶是柠檬酸合酶、柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶。

柠檬酸合酶是关键反应的限速酶，其活性受ATP、NADH、琥珀酰CoA及脂酰CoA的抑制，受乙酰CoA、草酰乙酸激活。

异柠檬酸脱氢酶受NADH、ATP的抑制，ADP的激活。

α-酮戊二酸脱氢酶受NADH和琥珀酰CoA抑制。

5）比较说明SDS－PAGE和琼脂糖凝胶电泳的物质分离原理和特点。

答：

分离原理：

SDS－PAGE：

当SDS与蛋白质结合后，蛋白质分子即带有大量的负电荷，从而掩盖了天然蛋白质分子间的电荷差别。

与此同时蛋白质在SDS的作用下结构变得松散，形状趋向一致，所以各种SDS-蛋白质复合物在电泳时产生的泳动率差异，只反映了分子量的差异，即纯利用分子筛效应，按蛋白质分子量大小进行分离，分子量越大移动越慢。

琼脂糖凝胶电泳：

利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性，其密度取决于琼脂糖的浓度。

在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下带负电的核酸分子就可以向阳极迁移。

琼脂糖凝的浓度影响给定大小的线状DNA的迁移率，因此采用不同浓度的凝胶可以分离不同大小范围的DNA片段。

DNA通过琼脂糖凝胶的迁移率取决于：

DNA分子的大小：

越大越慢；琼脂糖浓度：

浓度越大越慢；DNA构型：

相同分子量的DNA迁移率闭环>线状>开环；应用的电压：

低压时迁移率与电压成正比，一般不超过5V/cm。

特点:

①适用对象：

两者都可以用来分离生物大分子如蛋白质和核酸。

但SDS－PAGE主要用于分离蛋白质，SDS－PAGE可以分离的蛋白质对象要求内径基本一致，核质比均一，不含二硫键的可溶性蛋白，而琼脂糖凝胶电泳常用于分离核酸，主要是分离鉴定DNA。

②操作方法：

SDS－PAGE常采用垂直板电泳，而琼脂糖凝胶电泳常采用水平板电泳。

③应用：

SDS－PAGE可以应用于分离纯化、测定分子量、纯度检测等，琼脂糖凝胶电泳可以分离蛋白质和同工酶，还可以与双向免疫扩散结合进行免疫电泳，也常用于核酸的分离鉴定，是基因工程的常用实验方法。

④注意事项：

电泳会产生大量的热量，会造成生物分子变性，改变胶的性质，从而改变电泳行为，应当通过冷凝槽加以避免；分离RNA是要防治RNase的干扰，加入蛋白质变性剂，如甲醛等，同时对缓冲液和容器进行处理以确保不含有RNase；在电泳之前需要对样品进行预处理，如脱盐、除去有机溶剂；进行预电泳，去除加样孔中的杂离子，使分子筛达到均一。

2005、真题解析

1、简单描述蛋白质的超二级结构和结构域的概念。

答:

通常我们将蛋白质结构分为4个组织层次，但如果细分还可以在二级结构和三级结构之间增加两个层次：

超二级结构和结构域。

它们是蛋白质高级结构的重要组成部分，对蛋白质的功能起着重要的作用。

超二级结构:

在蛋白质分子中特别是在球状蛋白质分子中由若干相邻的二级结构元件（主要是α螺旋和β折叠）组合在一起，彼此相互作用，形成种类不多的、有规则的二级结构组合或二级结构串，在多种蛋白质中充当三级结构的构件。

其有3中基本的组合形式:

αα、βαβ、ββ。

结构域:

多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的部分折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，是球状蛋白质的独立折叠单位。

大体可以分为4类：

全α－结构，α,β-结构，全β－结构，不规则小蛋白结构。

2、简单描述蛋白质及核酸的变性。

答:

变性是指蛋白质及核酸生物活性丧失的现象。

其实质是维持蛋白质和核酸高级结构的次级键被破坏，引起天然构象的解体。

它不涉及共价键的断裂，并不改变蛋白质及核酸的一级结构。

变性不超过一定的限度，当恢复到原有条件时，又可以复性，即恢复到原来的空间构象和生物活性。

引起蛋白质变性的因素主要有物理因素如热、紫外线、高压和表面张力等；化学因素如

有机溶剂、重金属离子、酸、碱等。

其现象主要有生物活性丧失，溶解度下降，粘性增加（不对称性增大），及其他物理化学性质的改变。

核酸的变性指双螺旋区的氢键断裂，变成单链。

引起核酸变性的因素很多，有高温、酸碱度、有机溶剂如尿素、甲醛等。

其现象主要有紫外吸收值增高（增色效应），浮力密度增高，比旋降低，粘度降低等。

3、在功能上RNA可以分为几种？

描述生物体内蛋白质合成过程及各种RNA在这个过程中的作用是什么？

答:

生物体内含有各种功能RNA，几乎涉及细胞功能的各个方面。

我们按照功能主要将RNA分为信使RNA（mRNA）、转运RNA（tRNA）、核糖体RNA（rRNA）三类，它们都是参与蛋白质的合成的。

此外还有具有催化活性的核酶、反义RNA等等。

蛋白质的合成过程主要包括氨基酸活化、肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放以及翻译后的折叠修饰五个阶段。

在蛋白质合成过程中，mRNA作为蛋白质合成的模板，rRNA作为蛋白质合成的场所，tRNA搬运蛋白质合成所需的活化氨基酸。

4、描述生物膜的机构特征及其生物学功能。

答：

细胞是生物的基本结构和功能单位，而生物膜结构是细胞结构的基本形式。

生物膜包括细胞的外周膜和细胞内各个细胞器的膜结构组成的内膜系统。

生物膜主要是由蛋白质（包括酶）、脂质（主要是磷脂）和糖类组成，还有水、金属离子等。

生物膜通常呈脂双层结构，膜蛋白镶嵌、覆盖或贯穿其中，糖基附着在表面,大多与膜蛋白结合，少量与膜脂结合。

生物膜中分子之间主要作用力是静电力、疏水作用和范德华力。

生物膜结构的主要特征有：

生物膜的主要组分在膜两侧的分布不均匀；生物膜具有流动性，既包括膜脂，也包括膜蛋白的运动状态。

生物膜主要的生物学功能有：

能量转换、物质运输、信号识别与传递、神经传导和代谢调控等。

能量代谢如线粒体膜上的氧化磷酸化作用；物质运输包括被动运输和主动运输，是细胞获取营养物质，排除废物的主要途径；信号识别与传递主要由细胞表明的受体蛋白完成。

5、简单描述柠檬酸循环的反应机制。

答：

柠檬酸循环是生物体重要的生物化学反应，它在细胞的线粒体中进行，它不但为生命活动提供大量的能量，而且是沟通糖类、脂类、蛋白质、核酸四种物质代谢的反应枢纽。

柠檬酸循环是这四类物质的最终代谢途径，其中间代谢产物也为其他物质提供C骨架。

乙酰-CoA+3NAD++FAD+GDP+ Pi+2H2O → 3（NADH+H+）+FADH2+GTP+2CO2+CoASH

反应过程有：

1）草酰乙酸与乙酰-CoA在柠檬酸合成酶的作用下缩合形成柠檬酸。

2）柠檬酸在乌头酸酶的作用下异构化异柠檬酸。

3）异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下氧化脱羧形成α-酮戊二酸。

同时1分子NAD+（或NADP+）还原成NADH++H（或NADPH+H+）。

4）α-酮戊二酸在α-酮戊二酸脱氢酶的作用下氧化脱羧形成琥珀酰-CoA。

同时1分子NAD+还原成NADH++H。

5）琥珀酰-CoA在琥珀酰-CoA合成酶的作用下释放CoASH形成琥珀酸，并生成1分子GTP。

6）琥珀酸在琥珀酸脱氢酶的作用下脱氢形成延胡索酸，同时1分子FAD被还原FANDH2。

7）延胡索酸在延胡索酸酶的作用下水合生成L-苹果酸。

8）L-苹果酸在苹果酸脱氢酶的作用下脱氢形成草酰乙酸。

同时1分子NAD+还原成NADH++H。

6、DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆转录酶是生物体内重要的核酸合成酶，通过触媒反应机理，描述它们的相同点和不同点。

答：

相同点：

都需要以核酸（DNA或RNA）作为模板；需要四种三磷酸核苷（dNTP或rNTP）作为底物；新链合成的方向都是5’→3’。

不同点：

三种酶的结构、催化性质和核酸的结合位点等都不相同。

DNA聚合酶是以整条DNA链作为模板，不能自发催化DNA新链的合成，必须要一段多核苷酸链（DNA或RNA）作为引物；RNA聚合酶是以DNA的一个转录区作为模板，能自动催化RNA新链的合成，不需要引物；逆转录酶是以整条RNA链为模板合成DNA新链。

7、什么是抗原和抗体？

什么是单克隆抗体和多克隆抗体？

基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫印记测定（WesternBlot）及抗体芯片等，描述其中一种的作用原理。

答：

抗原是指能刺激机体免疫系统产生免疫应答而生成抗体并与之发生特异性结合的物质,它可以是一种病毒、细菌细胞壁或蛋白质或其他大分子。

抗体是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白，是一种可溶性的血清糖蛋白。

我们把只针对一个抗原决定簇起作用的由