16^6*跃迁
所需能量最大；6电子只有吸收远紫外光的能量才能发生跃迁；
饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区；
吸收波长入＜200nm;
例：
甲烷的入max为125nm,乙烷入max为135nm。
只能被真空紫外分光光度计检测到；
作为溶剂使用；
2nt6*跃迁
所需能量较大。
吸收波长为150〜250nm,大部分在远紫外区，近紫外区仍不易观察到。
含非键电子的饱和烃衍生物（含N、0、S和卤素等杂原子）均呈现nt6*跃迁。
3ntn*跃迁
所需能量较小，吸收波长处于远紫外区的近紫外端或近紫外区，emax一般在104L•mol
—1•cm—1以上，属于强吸收。
（1）不饱和烃nTn*跃迁
乙烯nTn*跃迁的入max为171nm,emax为：
1x104L•mol-1•cm—1。
（2）共轭烯烃中的ntn*
具G曰诩键的化介物，和「H］的键丐键和九作乩牛.成人键。
由丁人键各能级的距离较近电子容易激发，所以吸收峰的波长就增加，生色作用加强发生深色移动。
K带一—共轭非封闭体系的ntn*跃迁产生的吸收带。
nTn**跃迁吸收峰位置可由伍德沃德一一菲泽规则
估算。
人max=入基+Eni入i
（3）羰基化合物共轭烯烃中的ntn*
（4）芳香烃及其杂环化合物
选择溶剂的原则：
（1）在溶解度允许的范围内，应尽量选用极性较小的溶剂；
（2）对试样有良好的溶解能力和选择性，并且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定
性；
（3）在测定光谱区域，溶剂本身无明显吸收。
4.
1）
吸光度测量的条件选择:
测量波长的选择：
㈠
max
左右
max^
ax测定灵敏度高
较小的A
须在max下测定
E=—
Cl
吸光度读数范围的选择：
3）参比溶液（空白溶液）的选择：
空白溶液・配制样品的溶剂
参比池•光学性质和厚度相同，样品池
空白溶液参比池调节光路＞a参^0，TTO0%
样品溶液+样品池--一TA羊
化学因素
以重铬酸钾水溶液为例，
CrO42-,HCrO4和Cr2O72-均能吸收辐射，三种组分的相对量决定于Cr（W）的总浓度和pH（在高浓度时，还有Cr3O102-和Cr4O132-形式，不过，在通常的紫外-可见分光光度法测定的浓度范围内，可不考虑）。
第四章
一、分子光谱仪的基本部件
1.光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、
较长的使用寿命。
可见光区：
钨灯作为光源，其辐射波长范围在320〜2500nm。
紫外区：
氢、氘灯。
发射185〜400nm的连续光谱。
2.单色器
将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。
1入射狭缝：
光源的光由此进入单色器；
2准光装置：
透镜或返射镜使入射光成为平行光束；
3色散元件：
将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；
4聚焦装置：
透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；
5出射狭缝。
3•样品室
样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。
吸收池主要有石英池和玻璃池两种。
在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。
4•检测器
利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光
电倍增管。
5.结果显示记录系统
检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理
二、分光光度计的类型
1.单光束
简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。
2.双光束
自动记录，快速全波段扫描。
可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。
仪器复杂，价格较高
3.双波长
将不同波长的两束单色光（入1、入2）快束交替通过同一吸收池而后到达检测器，产生交
流信号，无需参比池。
=1〜2nm。
两波长同时扫描即可获得导数光谱
3）.对比吸光度或吸光系数的比值例：
药典规定VB12定性鉴别:
550三处最大吸收
2.纯度检查和杂质限量测定
（1）.纯度检查（杂质检查）
1）峰位不重叠：
找入t使主成分无吸收，杂质有吸收t直接考察杂质含量
2）峰位重叠：
主成分强吸收，杂质无吸收/弱吸收t与纯品比较，EJ
杂质强吸收>>主成分吸收t与纯品比较，Ef,光谱变形
1）.解线性方程组法
步骤:
厂测定E1a和E1b；A；b
2-测定E；和E2；A：
b
步骤:
tbtbtb
Ai=AiA^EiCTCb
AT-atb一L（at一A：
r（AbAbYAT
消除a的影响测b
选a的等吸收点“和，2
二也Aa+b'=
AaA
（E；-El）
CaCb=
Aab
Aab
EaCa
Eb
消去b的影响测a
选b的等吸收点!
'和'
选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点
Ab=Ab
1'2'
2=
选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大
练习11.取咖啡酸，在165C干燥至恒重，精密称取lO.OOmg,加少量
乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶
液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL4mL，力口
水至刻度线。
取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸光度为0.463,已知该波长处的E1%1cm=927.9，求咖啡酸百分含量。
2•精密称取0.0500g样品，置于250mL容量瓶中，加入0.02mol/LHCL溶解，稀释至刻度。
准确吸取2mL，稀释至
100mL。
以0.02mol/LHCL为空白，在263nm处用1cm吸收池
测定透光率为41.7%，其摩尔吸光系数为12000，被测物分
子量为100.0，试计算263nm处E1%1cm和样品的百分含量。
二、有机化合物结构辅助解析
1.可获得的结构信息
（1）200-400nm无吸收峰。
饱和化合物，单烯。
（2）270-350nm有吸收峰（£=10-100）醛酮mn*跃迁产生的R带。
（3）250-300nm有中等强度的吸收峰（£=200-2000）,芳环的特征吸收（具有精细解构的B带）。
（4）200-250nm有强吸收峰（£104）,表明含有一个共轭体系（K）带。
共轭二烯：
K
TT（230nm';兀呱和岸；比：
K忙230nm,R半310-330nm
（5）260nm,300nm,330nm有强吸收峰，3,4,5个双键的共轭体系。
2.光谱解析注意事项
（1）也认max，并算出吨£，初步估计属于何种吸收带；
（2）观察主要吸收带的范围，判断属于何种共轭体系；
（3）乙酰化位移
B带：
262nm（£302）274nm（£2040）261nm（£300）
（4）pH值的影响
加NaOH红移t酚类化合物，烯醇。
加HCI兰移t苯胺类化合物。
3.分子不饱和度的计算
定义：
不饱和度是指分子结构中达到饱和所缺一价元素的对”数。
女口：
乙烯变成饱和烷烃需要两个氢原子，不饱和度为1。
计算：
若分子中仅含一，二，三，四价元素（H,O,N,C），则可按下式进行不
饱和度的计算：
Q-（2+2n4+n3-n1）/2
n4,n3,n1分别为分子中四价，三价，一价元素数目。
作用：
由分子的不饱和度可以推断分子中含有双键，三键，环，芳环的数目，
验证谱图解析的正确性。
例：
C9H8O2
1.分子能级与跃迁
分子能级比原子能级复杂；
在每个电子能级上，都存在振动、转动能级；
基态（SO）T激发态（S1、S2、激发态振动能级）：
吸收特定频率的辐射；量子化；跃迁一次到位；
激发态t基态：
多种途径和方式；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势；
第一、第二、…电子激发单重态S1、S2…；
第一、第二、…电子激发三重态T1、T2…；
2.电子激发态的多重性：
3.激发态t基态的能量传递途径
电子处于激发态是不稳定状态，返回基态时，通过辐射跃迁（发光）和无辐射跃迁等方式失
去能量；
激发态停留时间短、返回速度快的途径，发生的几率大，发光强度相对大；
荧光：
10-7〜10-9s,第一激发单重态的最低振动能级t基态；
磷光：
10-4〜10s,第一激发三重态的最低振动能级t基态；
二、荧光的产生与分子结构的关系
1.分子产生荧光必须具备的条件
（1）具有合适的结构；
（2^
…发射的光量子数吸收的光量子数
如外转换过程速度快，不出现荧光
荧光量子产率与激发态能量释放各过程的速率常数有关，发射。
2.化合物的结构与荧光
要使分子产生荧光，则分子结构应能吸收
UV-Vis辐射，且要有较高的荧光效率。
（1）分子吸收UV-Vis辐射的能力越强，发光越强；
（2）能强烈发光的分子几乎都是经过n^n*
跃迁，具有共轭双键、刚性较强的平面和多环结构的分子易于发光。
3）取代基对分子发光有显著影响：
给电子基团常使荧光增强
如—NH2,-OH
吸电子基团使荧光减弱或熄灭
如—COOH,—NO2,—N=N—
（4）刚性强的分子①f大
小结:
汇熹叫*t的養儿敘荊九嗓间跨述雹疋皿坐带耳致卜［审」吠光的
产生；
（2）共轭效应：
提高共轭度有利于增加荧光效率并产生红移
（3）刚性平面结构：
可降低分子振动，减少与溶剂的相互作用，故具有很强的荧光。
如荧光素和酚酞有相似结构，荧光素有很强的荧光，酚酞却没有。
（4）取代基效应：
芳环上有供电基，使荧光增强。
三、激发光谱与荧光（磷光）光谱
荧光（磷光）:
光致发光，照射光波长如何选择？
荧光的激发光谱和发射光谱一一荧光分析法进行定量和定性分析的基本参数和依据。
任何荧光物质都具有两个特征光谱，即激发光谱和荧光光谱。
激发光谱：
如果将激发光的光源用单色器分光，测定不同波长激发光照射下荧光强度的变化，以激发波长（入）为横坐标，荧光强度（IF）为纵坐标作图，便可得到荧光物质的激发光谱。
它反映了不同波长激发光引起荧光的相对效率。
激发光谱可供鉴别荧光物质，在进行荧光测定时，供选择适宜的激发波长。
一.分子结构影响荧光发光分子产生荧光的条件：
1物质必须具有能吸收一定频率紫外光的特定结构；
2物质分子在吸收了一定频率的紫外能之后，必须具有较高的荧光效率$F
荧光效率越高，荧光的发射强度越大，无辐射跃迁的几率就越小。
当荧光效率等于零时就意味着不能发出荧光。
因此荧光物质必须具有较大的荧光效率。
1.具有共轭双键体系的分子：
大多数荧光物质都具有芳香环或杂环，因为这些化合物都具有易发生ntn或
nTn*跃迁的电子共轭结构，n电子的非定域性越大，就越容易被激发，分子的荧光效率
越大，因此凡能提高n电子共轭程度的结构，如对-苯基化、间-苯基化、乙烯化的作用都会增大荧光的强度。
3.具有刚性平面结构的分子:
刚性的不饱和的平面结构具有较高的荧光效率，分子刚性及共平面性越大，荧光效率越高，酚酞和荧光素比较，荧光素中多一个氧桥，使分子的三个环成一个平面，其共平面性增加，使n电子的共轭度增加，因而荧光素有强烈荧光，而酚酞的荧光很弱。
二.环境对荧光的影响：
温度的影响：
荧光强度对温度变化敏感，温度改变并不影响辐射过程，但非辐射去活的效率将随温度升高而增强，因此当温度升高时荧光强度通常会下降如罗丹明B的甘油溶液，但是吸收光谱和吸光能力没有改变。
溶液pH的影响：
当荧光物质是弱酸或弱碱时，溶液的pH对荧光强度有较大影响，需要严格控制。
因为弱酸或弱碱在不同酸度中，分子和离子的电离平衡会发生改变，而荧光物质的荧光强度
会因其离解状态发生改变。
以苯胺为例：
在pH7~12的溶液中会产生蓝色荧光，在pH<2或
pH>13的溶液中都不产生荧光。
接重原子效应
内滤光作用和自吸现象内滤光作用：
溶液中含有能吸收激发光或荧光物质发射的荧光，如色胺酸中的重铬酸钾自吸现象：
化合物的荧光发射光谱的短波长端与其吸收光谱的长波长端重叠，产生自吸收；如蒽化合物
讨论：
1.kf主要取决于分子结构，受环境影响较小。
emax可作为kf的定性度量
emax大，A大，kf大
具有多重共轭双键的分子发射的荧光较强T升高，分子碰撞的几率增加，kc变大
3.kx为内交联的速率常数
kx既受分子结构的影响，也在一定程度上受环境的
影响。
kx:
（1）对n*tn,kx>kf
对n*tn,kx~kf
（2）溶剂的极性影响分子跃迁类型
喹啉在苯中n*tn
在极性Sn*tn
喹啉在苯、乙醇、水中的①f分别为1,30,1000
（1）kx依赖于S*tt的距离：
距离越小，kx越大
（2）重原子效应
在含有n轨道上的分子引入重原子之后，kx变大
氟苯①f0.16
氯苯①f0.05
溴苯①f0.01
碘苯①f0
三.溶液荧光的猝灭（熄灭）
荧光的熄灭广义的包括了任何可使荧光增强度降低的作用。
狭义的仅仅指那些由于荧光物质
分子与溶剂分子或其他溶质分子的相互作用所引起的荧光强度降低的现象，这些会引起荧光
的熄灭的物质称为熄灭剂。
狭义的荧光熄灭的原因是溶液中熄灭剂分子和荧光物质分子之间发生相互作用而引起荧光物质分子的荧光效率降低或荧光物质激发态的寿命缩短，从而导致荧光强度的降低。
卤素离子对于奎宁的荧光有显著的熄灭作用，但对某些物质的荧光并不发生熄灭作用，这表明熄灭剂和荧光物质分子之间的相互是有选择性的。
荧光熄灭作用在荧光分析中有着降低待测物质的荧光强度的不良作用，但另一方面，我
们可以利用某一物质对某一荧光物质的熄灭作用建立对该物质的荧光熄灭法检测，该法常具
有更高的选择性。
卤素离子对于奎宁的荧光有显著的熄灭作用，但对某些物质的荧光并不发生熄灭作用，这表明熄灭剂和荧光物质分子之间的相互是有选择性的。
1.碰撞熄灭
溶液中荧光物质分子M和熄灭剂Q相碰撞而引起荧光熄灭。
比较速率
M+hu~M*（吸光）1
M*M+hu（发生荧光）k1[M*]
M*+QM+Q+热k2[M*][Q]
式中k1k2为相应的反应速率常数，很明显，荧光熄灭程度和k1、k2的相
对大小及熄灭剂的浓度有关。
2.组成化合物的熄灭
某些荧光物质溶液在加入一些熄灭剂之后，溶液的吸收光谱有了显著的改变，溶液的荧光
强度显著降低;随着温度的升高，荧光强度反而增强。
3.转入三重线级的熄灭
含溴、碘化合物、重氮、羰基、羧基及某些杂环化合物容易转变至三线态，因而易使荧光熄
灭。
电子自旋方向的改变系有强烈磁场的诱导作用所引起的，在原子核附近，尤其是在Br
或I这样重的原子核附近，存在着强烈的磁场，所以含溴、碘的化合物容易使溶液荧光熄灭。
几乎所有会发生荧光的有机化合物都会被溶解在溶液中的氧分子熄灭剂熄灭到不同的程度。
消除：
（1）荧光熄灭作用均随着熄灭剂的浓度增大而加大，因此若对solu稀释可消除或减低荧光的熄灭作用；
（2）溶解氧的除去，通入氮气。
出师表
两汉：
诸葛亮
先帝创业未半而中道崩殂，今天下三分，益州疲弊，此诚危急存亡之秋也。
然侍卫之臣不懈于内，忠志之士忘身于外者，盖追先帝之殊遇，欲报之于陛下也。
诚宜开张圣听，以光先帝遗德，恢弘志士之气，不宜妄自菲薄，引喻失义，以塞忠谏之路也。
宫中府中，俱为一体；陟罚臧否，不宜异同。
若有作奸犯科及为忠善者，宜付有司论其刑赏，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使内外异法也。
侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等，此皆良实，志虑忠纯，是以先帝简拔以遗陛下：
愚以为宫中之事，事无大小，悉以咨之，然后施行，必能裨补阙漏，有所广益。
将军向宠，性行淑均，晓畅军事，试用于昔日，先帝称之曰能”，是以众议举宠为督：
愚以为营中之事，悉以咨之，必能使行阵和睦，优劣得所。
亲贤臣，远小人，此先汉所以兴隆也；亲小人，远贤臣，此后汉所以倾颓也。
先帝在时,每与臣论此事，未尝不叹息痛恨于桓、灵也。
侍中、尚书、长史、参军，此悉贞良死节之臣，愿陛下亲之、信之，则汉室之隆，可计日而待也F
臣本布衣，躬耕于南阳，苟全性命于乱世，不求闻达于诸侯。
先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顾臣于草庐之中，咨臣以当世之事，由是感激，遂许先帝以驱驰。
后值倾覆，受任于败军之际，奉命于危难之间，尔来二十有一年矣。
先帝知臣谨慎，故临崩寄臣以大事也。
受命以来，夙夜忧叹，恐托付不效，以伤先帝之明；故五月渡泸，深入不毛。
今南方已定，兵甲已足，当奖率三军，北定中原，庶竭驽钝，攘除奸凶，兴复汉室，还于旧都。
此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。
至于斟酌损益，进尽忠言，则攸之、祎、允之任也。
愿陛下托臣以讨贼兴复之效，不效，则治臣之罪，以告先帝之灵。
若无兴德之言，则责攸之、祎、允等之慢，以彰其咎；陛下亦宜自谋，以咨诹善道，察纳雅言，深追先帝遗诏。
臣不胜受恩感激。
今当远离，临表涕零，不知所言。
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