AKTApurifier操作入门.docx
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AKTApurifier操作入门
AKTApurifier操作入门
AKTApurifier层析系统操作入门
为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍
1系统组件
（1）泵Pump
系统泵：
（systempump）双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。
（2）阀Valve
三通阀：
（SV-903）两个。
分别位于两个系统泵前，用于缓冲液输送管道（A1/A2,B1/B2）切换。
七通阀：
（INV-907）两个。
1.上样阀（samplevalve），用于上样环切换（load/inject）和系统泵清洗时废液管（waste）切换；
pH，由B泵及其三通阀调配梯度。
（2）上样
上样阀上样：
将样品经进样阀3号口注入储存在样品环（Sampleloop）内，再由阀门切换将样品带入层析柱；
系统泵上样：
由三通阀选择进样管道，由系统泵将样品泵入层析柱。
（4）收集
收集器收集：
设置收集体积（Fracsize），可自动按条件收集。
出口阀收集：
按需要选择不同出口管收集。
二开机程序
1开启电脑；
2打开AKTApurifier电源；
3启动UNICORN软件，输入用户名（Username）和密码（Password），默认用户（default）密码为default，待AKTA自检结束后，在systemcontrol窗口中显示系统准备就绪（Instrumentsareready）。
三UUNICORN软件简介
Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：
Main:
1.系统关闭（QuitProgram）和退出、登陆（Logon/off）；
2.系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志等；
3.文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；
4.方法组编辑（MethodQueues），将几个方法组合在一起，依次运行。
MethodEditor:
1.方法编辑；
2.缓冲液配方设置（如配方修改或新增配方等）
SystemControl:
1.系统控制，可以手动控制（Manual）或运行方法（RunMethod）；
2.系统设置，包括Alarms/Special/Monitors/Curves；
3.运行监测，有四个窗口：
Rundata/Curves/Flowscheme/Logbook。
Evaluation:
结果处理，如积分（intergrate）、移动（shift）、计算（Subtract/Add/Multiply/Divide）、平滑（Smooth）、截取（CutCurve）、绘制（CreatCurve）、打印（Print）等
在每个窗口中均有专家建议（Adviser）和帮助信息（Help）。
四系统控制（SystemContral）
1手动操作（Manual）
1.1手动操作命令简介
（1）Pump泵
Flow:
设定系统泵流速
Gradient:
梯度设定
BufferPrep_pH:
使用缓冲液配制功能时，设定pH值
SampleFlow:
设定样品泵流速
PumpWashpurfier:
系统泵清洗
（2）Flowpath流路
PumpAInlet:
A泵入口三通阀切换
PumpBInlet:
B泵入口三通阀切换
InjectionValve:
上样阀切换
OutletValve:
收集出口阀切换
InjectionMark:
插入记号
（3）Alarm&Mon报警、检测
WaveLength:
选择监测波长（1-3个）
AutoZeroUV:
紫外吸收校零
AveragingTime:
计算紫外吸收平均值的间隔时间
SetCondScale0%:
输入0%B时的电导
SetCondScale100%:
输入100%B时的电导
Alarm:
设置压力、紫外、电导、pH等报警限
Watch:
监测参数设置，配合方法编辑中的watch功能
（4）Frac收集：
Peak_Frac_Parameters:
计峰收集参数设定
FracCollect_900:
分布收集每管体积
Frac_Stop_900:
停止分别收集
FeedTube:
换管收集
Peak_Fraction:
计峰收集每管体积
Peak_FracStop:
停止计峰收集
OutletFraction:
出口阀每风分段收集每段体积等设置
ResetFracNumber:
将当前分布收集的管号计为第一管
（5）Others其它
Block:
调用程序块（只在方法运行时可用）
Next_breakpoint:
跳到下一程序块（只在方法运行时可用）
BufferPrepRecipe:
选择缓冲液配方
Set_Mark:
插入提示语
End_Timer:
设定结束运行时间
Recordon/off:
手动运行时开始或结束数据记录
1.2手动操作示例
（1）梯度洗脱
设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。
各命令无先后次序要求。
（2）自动配制缓冲pH及梯度
必须最先设定缓冲液配方，然后设定其它参数如流速、pH、梯度等。
（3）记录图谱
运行“Recordon”命令，开始记录图谱，停止记录则运行“Recordoff”命令。
1.3运行监测（Monitoringarun）
在系统运行过程中，系统控制窗口同步显示系统检测的数据及各部件当前状态，共有四个窗口，显示不同内容，可同时打开：
Rundata:
运行参数
Curves:
数据曲线
Flowscheme:
系统流路图
Logbook:
运行记录
2方法运行（RunMethod）
启动方式
方法一：
从主菜单（main）窗口方法（method）栏中，双击所选方法。
方法二：
从系统（systemcontrol）窗口中，依次点击File、Run，选择运行方法。
方法三：
从系统（systemcontrol）窗口中，点击运行（Run）键，选择运行方法。
五方法编辑
1按照模板编辑新方法
（1）点击方法编辑窗口中File>New,或点击工具栏中”NewMethod”按钮，打开新方法编辑窗口；
（2）
（2）在“Forsystem”栏中选择运行方法的系统，
选择“NoTemplate”则可自行编辑方法；
（3）在“Technique”栏中选择层析技术，可选内容有：
AnionExchange:
阴离子交换
CationExchange:
阳离子交换
RPC:
反相层析
HIC:
疏水层析
SizeExclusion:
分子排阻（凝胶层析）
Affinity:
亲和层析
Any:
通用模板
（4）在“Template”栏中选择模板类别，以离子交换及凝胶过滤为例，有如下选择
IEXTemplates（离子交换模板）:
CIP（在位清洗）
ManualInjectionFPBufferPrep
ManualInjectionFPSegmented
ManualInjectionVBufferPrep
ManualInjectionVSegmented
GFTemplates（凝胶过滤模板）:
ManualInjectionFPIsocratic
ManualInjectionVIsocratic
模板解释：
ManualInjection:
样品由手工（用注射器等）储存在样品环中，再由进样阀将样品注入层析柱
F:
用收集器（Fraction-900）分布收集
P:
使用计峰收集（PeakFraction）功能
V:
用出口阀（OutletValve）分段收集
BufferPrep:
使用自动缓冲液配置
Segmented:
不用自动缓冲液配置，可使用梯度
Isocratic:
单一流动相
（5）在“Forcolumn”栏中，选择所用层析柱型号，若在列单中没有，则选择“Any”
（6）点击“OK”键
（7）若各参数符合要求，则选择“File>Save”，即可完成新方法编辑。
2方法编辑
若按模板编辑的方法不能满足要求，或对已使用过的方法进行调整，可在“MethodEdit”窗口中对方法进行编辑。
编辑可分两类：
1运行参数编辑；2程序编辑。
（1）运行参数编辑（Runsetup）
在菜单中选择“View>Runsetup”，则进入运行参数编辑窗口，各编辑窗口的内容为：
Variables:
控制程序可变参数编辑
Scouting:
筛选条件设定
Question:
开始运行的提问内容设定
Notes:
输入实验记录或提示
Gradient:
显示梯度曲线
BufferPrep:
开启或关闭自动缓冲液配置功能及选择缓冲液配方
Column:
显示层析柱参数
ReferenceCurves:
输入对照曲线
EvaluationProcedures:
数据处理步骤
Methodinformation:
方法信息，含运行体积、时间等
Resultname:
结果保存文件名格式、路径设定
Startprotocol:
开始运行方案选择
（2）程序编辑（Textinstruction）
在菜单中选择“View>Textinstruction”则进入程序编辑窗口。
方法控制程序由数个程序块（Block）组成，程序块则由操作命令（instruction）及可变参数（Var.）组成。
所以，根据需要，可分别增加或删除可变参数、操作命令、程序块等。
六数据处理（Evaluation）
1数据浏览
Evaluation窗口中可查看层析结果（Chromatogram_Layout）和程序档案（Documentation）等。
2数据加工
最常用有曲线的积分、移动、计算（加减乘除）等：
2.1积分（integrate）
（1）选择Integrate>Peakintegrate或点击Peakintegrate按钮，打开积分窗口；
（2）在积分窗口中选择曲线、基线和积分表后，点OK键即可；
（3）如果想优化积分结果，则可在积分窗口中选择基线设定、积分范围和参数。
2.2移动（Shift）
多条曲线重叠比较时，可用移动功能，使每条曲线错开适当距离，便于分析。
移动可以左右移动，也可上下移动。
2.3相除计算（Divide）
将两条UV曲线相除，可判定吸收峰的纯度：
如果一个峰的组分是单一的，则整个峰的相除结果应是恒定值。
根据峰的相除值，还可判定峰的成分，因为不同物质的两个波长相除值应是不同的。
（1）选择Operation>Divide，打开Divide（相除）窗口；
（2）选择两条相除的曲线，点OK键，即可；
（3）若需优化计算结果，可设定极限范围（Threshold），也可在计算前用相减（Subtract）功能，消除基线漂移的影响，还可用平滑（Smooth）功能，减小计算结果的波动。
2.4输出报告（ReportandPrint）
（1）打印当前窗口显示的内容，选择File>Print,出现打印窗口，选择打印格式（Printformat），点OK键，即可。
（2）按报告形式打印，选择File>Report，再选择报告格式（Format），点OK键，即可。
七系统管理
（1）用户设置
在主窗口中，可设置用户、密码、路径及使用权限等。
（2）系统设置
在系统控制窗口中，可设置系统报警、检测、曲线记录等参数。
（3）缓冲体系设定
在方法编辑窗口中，可更改缓冲液配方参数或增加新的缓冲液配方。
（4）报告格式
在数据处理窗口中，可编辑数据浏览格式、打印报告格式等。
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