巨型脂质体制备与收集的微流控芯片探析.docx

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巨型脂质体制备与收集的微流控芯片探析

巨型脂质体制备与收集的微流控芯片探析

内容简介:

脂质膜的情况和电场参数是影响巨型脂质体电形成效果的重要因素,下面是我搜集整理的巨型脂质体制备与收集的微流控芯片探析的论文范文,欢迎阅读查看。

1引言巨型脂质体为粒径大于1#m的脂质体,由于其尺寸巨大,在光学显微

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脂质膜的情况和电场参数是影响巨型脂质体电形成效果的重要因素,下面是我搜集整理的巨型脂质体制备与收集的微流控芯片探析的论文范文,欢迎阅读查看。

1引言巨型脂质体为粒径大于1#m的脂质体,由于其尺寸巨大,在光学显微镜下易于观察和操控;膜结构类似细胞膜,可模拟细胞膜或细胞;具有双亲性,可以包载水溶性和脂溶性物质。

它可用作细胞膜或细胞模型来研究其物理性质等;模拟细胞环境,进行蛋白质表达或者细胞功能等研究;用于运载蛋白质、DNA等,研究基因转移、药物传送等;作为生化反应器,提供超小反应体积等.因此,这一脂质结构可应用于分子生物学、细胞生物学、生物化学、医药等多个领域。

微米级巨型脂质体成型能力和稳定性都较纳米级常规脂质体差,因而更难制备。

现有制备方法主要包括温和水合法、溶剂蒸发法、微流控注入法、电形成法.相较而言,电形成法通过电场作用实现巨型脂质体的制备,具有速度快、可控性高、反应条件温和、环境污染小等优点,得到了越来越多关注.但是,电形成法,特别是各种微型制备装置的研究起步较晚,很不成熟,还有一些问题有待解决。

例如:

制备效率不高、脂质体粒径分布广、制备得到的脂质体缺乏高效收集方法。

现有收集方法常需要复杂的后处理操作,很多脂质体损坏或丢失,对实际制备产率造成了很大影响。

本研究提出一种基于微电极阵列的制备及收集微流控芯片,利用微电极阵列、多微通道结构精确控制巨型脂质体的形成,提高效率和粒径均匀性;通过集成过滤收集模块,可实现巨型脂质体的温和、高效收集,从而实现一种简单、高效的巨型脂质体制备方法。

2实验部分

1微芯片的设计及加工微流控芯片包括制备和分选收集两个部分,之间通过微通道连接。

用函数信号发生器向微电极阵列提供电信号,通过注射泵向微通道注入脂质溶液、收集缓冲液,抽出废液等磷脂酰胆碱、胆固醇购自美国Sigma-Aldrih公司;乙醚、NaCl、蔗糖、葡萄糖购自中国科龙化工公司;PDMS购自美国DoCorning公司。

聚丙烯基板购自中国新涛公司;玻璃片、ITO玻璃、导电胶布购自中国珠海凯为公司。

3结果与讨论

3.1巨型脂质体制备脂质膜的情况和电场参数是影响巨型脂质体电形成效果的重要因素。

其中,脂质膜的形成由脂质溶液的浓度、体积、腔室的形状及尺寸等决定;电场参数涉及电场分布、电压、频率、施加时间等。

在两种微电极阵列中分别开展多种参数的脂质体制备实验。

根据前期研究结果,磷脂酰胆碱和胆固醇浓度比维持在5∶

1.将脂质溶液输入并充满两种微电极阵列所在微通道,真空干燥后,使溶剂完全蒸发形成脂质膜;注入水溶液后,在45℃下施加交流电场,观察巨型脂质体形成情况。

在电形成过程的最初阶段,巨型脂质体形成主要受脂质膜影响。

电极附近的脂质膜较微通道中间厚,更利于巨型脂质体的形成。

当脂质溶液浓度较低时,仅电极附近的脂质膜厚度足以膨胀形成单层巨型脂质体,但是产量很低。

之后,巨型脂质体的电形成产量、比率和速度脂质溶液浓度增加而递增,但其浓度超出了一个阈值后,所形成巨型脂质体互相叠加为不稳定条状结构,巨型球形脂质体产量也不再增加。

当PC和Chol浓度分别为6和

1.2mgmL时,巨型球形脂质体产率较高。

在电形成过程后期,电场分布、幅值、频率、电场施加时间均对巨型脂质体的形成有影响.在电场较强区域,脂质体能更快膨胀形成。

两种不同的微电极阵列中形成的巨型脂质体形状较相似,但交错电极阵列上的形成速率更快。

此外,当脂质浓度逐渐增大时,在平板电极阵列中脂质体形成于整个通道,到后期边缘和中间的脂质体的膨胀会逐渐受到阻碍;而交错电极阵列上的巨型脂质体常形成在电极附近,中间位置的脂质膜就几乎不膨胀。

在电场强的位置,脂质膜的膨胀速度也快于平板电极阵列,所形成巨型脂质体的形态也更好。

这表明电场强度的增加有助于脂质体的快速形成。

随着电场幅值的增加,脂质体膨胀形成速度增加,但由此产生的大粒径球形脂质体稳定性减弱、容易损坏,所以最终收集到的巨型脂质体比例在电压增加后并没有明显增加。

在微电极阵列中,由于较小的电极间距有助于产生更大的场强,很小的电压就足以实现巨型脂质体的快速电形成,实验结果较佳的电压为0.45V.随着频率增加,脂质体膨胀和封闭也更快。

当频率达到1000Hz时,收集到的巨型脂质体较多,而频率继续增高时收集量没有明显的增加;电场施加时间影响巨型脂质体的膨胀和封闭,在时间远小于60min时,巨型脂质体还较少形成,很多巨型脂质体还在膨胀过程中;当时间达到60min后,多数巨型脂质体基本形成;进一步增加电场施加时间,产量没有明显的变化。

因此,就本研究所采用的芯片制备装置,适宜的脂质浓度、电场分布、电压、频率、电场施加时间等参数分别为:

磷脂酰胆碱和胆固醇浓度为

6.0和

1.2mgmL,交错电极、0.45V,1000Hz、60min.此时,稳定的巨型球形脂质体的产率可以达到约60%.采用目前常用的ITO玻璃电极+PDMS垫片搭建的电形成腔室进行对照实验,在相同腔室体积、脂质用量、已报道的实验参数,巨型球形脂质体的产率仅为32%.

3.2巨型脂质体收集制备完成后,向制备腔室中缓慢注入等渗的葡萄糖、NaCl的水溶液,可在一定程度上避免巨型脂质体粒径大、易形变、整体强度较差,在操作时容易破裂等问题。

利用液流运动轻柔地将制备腔室里的巨型脂质体等物质输送到收集腔室。

经重力沉降和微孔滤膜过滤作用,符合要求的巨型脂质体留在收集腔室上层,尺寸较小的物质则通过滤膜进入腔室下层,经微通道流入废液腔室。

多次重复实验表明,在收集腔室中可以收集得到90%以上的巨型脂质体.交错微电极阵列制备的巨型脂质体收集效果优于平板微电极阵列,这也证明交错微电极阵列可以得到更多,更稳定的巨型脂质体。

但仍有少部分尺寸较小的物质由于本身质量太轻,在浮力作用下仍然停留在收集腔室上层。

针对这部分物质,今后可在腔室下层增加轻柔抽吸作用加以去除。

4结论本研究采用了微流控芯片收集方法,获得了更好的巨型脂质体制备效果,并尽量多地收集所需的稳定巨型球形脂质体。

通过构建两种不同微电极阵列结构,进行了多种脂质浓度、电压、频率、电场施加时间的实验研究。

结果表明,交错电极对电场的聚焦作用有利于局部高电场区脂质体的膨胀形成,因此更适合巨型脂质体的制备。

不同脂质浓度和电场参数对巨型脂质体的电形成有明显的影响,多参数探索表明,在微电极阵列芯片中选择磷脂酰胆碱和胆固醇浓度为

6.0mgmL和

1.2mgmL,电场参数为电压0.45V、频率1000Hz、加载时间60min可以得到很好的制备效果。

此时,稳定的巨型球形脂质体的产率可以达到60%,明显优于常规制备方法。

在制备研究基础上开展了收集芯片模块的研究,通过不同组分在收集腔室和废液腔室间的分选操作,可以在收集腔室中大量获得巨型脂质体,为巨型脂质体的进一步应用奠定了良好基础。

参考文献曾昭琼.有机化学实验.第3版。

北京:

高等教育出版社,201X:

24-2

7.尤庆祥.药物有机化学实验教程.成都:

成都科技大学出版社,1998:

29-3

1.石磊.有机化学基本操作实验中容易出现的问题与对策.湖北中医药大学学报,201X,13:

72-7

3.

而这些吸收了有毒气体的油性液体会继续作为一些生产活动的燃料加以燃烧,而在燃烧过程中这些油性液体,例如柴油就会被有效的燃烧掉,而这些油性位置中包含的有机溶剂浓度有限,所以通常燃烧的会很充分,所以会减少不充分燃烧产生的有毒物质。

当然这种方法并不是最安全的,更为环保的办法是直接将柴油吸收的有毒有机溶剂通过沸点的不同分馏区分开来,达到回收的目的。

2冷凝法冷凝法则是主要通过低温让有机溶剂从气体中冷凝下来,直接回收。

对于浓度较高的工业生产中一般采用低温水或冷冻水降温后冷凝,一般能够回收其中约80%的有机溶剂,对于成本控制和环保都很有利。

而对于浓度较低的情况,这种做法困难在于难以创造低温条件,一般采用的液氮蒸发制冷的方法,生产中并不容易实现,当然很多时候也会用一些氟利昂等制冷剂,但是随之而来的问题就是这些制冷剂的挥发依然会危害大气环境,所以有些得不偿失。

不过采用这种方法回收的有机溶剂特点就是纯度很高,让有机溶剂可反复的使用,有非常好的经济价值。

3吸附法固体吸附法其实就是用一些能够有效吸收有毒有机溶剂的固体来吸收它们。

比如我们都比较熟悉的活性炭等固体吸附物体。

当然有些有机溶剂活性炭是吸附不了的,此时就会用一些新的吸附剂,比如纯氮气还有热空气等等。

当然,活性炭吸附法目前还是世界上回收有毒有机溶剂的主流,这也是因为活性炭价格便宜,吸收效果良好,并且很环保。

随着环保形式的日益严峻,工业生产中,特别是医药行业,目前用活性碳纤维吸附各个储罐和真空泵排气中有机溶剂的方法也越来越普遍,而且效果较好,一般能达到95%以上的收率,达到环保要求的同时,回收后的溶剂套用也能在一定程度上降低生产成本。

4膜分离法膜分离法工艺比较复杂,因为这还涉及到膜回收等复杂工艺,但是有时候却不得不采用这种方法。

这是因为一些化学性质奇异的剧毒有机溶剂用之前的方法都不能有效的吸收,那么排放到大气中会比一般都要严重的时候就不得不采用终极办法。

膜分离法之所有非常有效作为有机溶剂回收的釜底抽薪办法是因为通常有些有机溶剂不单单只是一种,有好几种,但是这些有机溶剂的化学性质有千差万别,采用之前的三种方法都是利用其特殊的化学性质才能有效的完成,所以不可能同时将多种有毒的有机溶剂一网打尽,因此就会采用膜分离的方法,这是用于膜分离可以同时使用多种多张膜,不同的膜能够分离掉不同的有毒有机溶剂,因此采用多种膜多层膜之后就能既全面又彻底的将多种有毒有极容易统统回收。

目前运用的膜主要分为有机膜和无机膜,有机膜和无机膜各有特点,能够运用到不同的有毒有机溶剂回收当中。

如今科研人员正在研究改良原来的膜或者研究新型的膜,这些新型的膜具有更好的风力能力并且化学性质也会更加的稳定,比如需要耐高温,耐腐蚀,耐压等等,同时有些膜还将具有吸收多种有机溶剂的作用,相信通过科研人员的不懈努力,或许在不久的将来会产生万能的膜,这也会让化学有机溶剂的回收变得一劳永逸。

3结束语

总之,工业生产中会产生多种且大量的危害人体健康危害环境的有毒有机溶剂,这些有毒有机溶剂虽然化学性质各异,但是都能通过吸收法、冷凝法、吸附法、膜分离法等方法利用不同的化学原理将不同有机物的性质加以回收,将这些有毒有机溶剂对人体和环境的危害降到最低,让工业安全得到有效的保证,让工业生产更加的可持续发展。

参考文献:

郭昊.活性炭吸附回收VOCs的过程研究与工程设计.中国林业科学研究院,201X.杨华,刘石彩.用活性炭回收挥发性有机溶剂的研究进展.生物质化学工程,201X,5:

52-5

8.张志昆.人造革生产尾气中有机溶剂回收工艺研究.河北科技大学,201X.陈长青.溶剂回收技术与实验室环境保护.福建分析测试,201X,1:

37-40.李伟.甲醇-乙酸乙酯混合溶媒的分离回收研究.重庆大学,201X.余国英.国内工业固定源VOCs吸附-冷凝-溶剂回收技术.海峡科学,201X,8:

61-6

4.

分生物技术在环境工程当中的应用

关键词:

地质,雷达,探测

巨型昆虫出没,快绕行!

关键词:

太平洋,霸权,奇观

基因芯片——“生物信息精灵”

关键词:

环保,论文,论文

 

附送:

差生学生的期末评语

差生学生的期末评语

差生学生的期末评语

1、吴晨苗你是个性格极其内向的孩子。

你并不比别人差,只因你老是闭着嘴不说话。

为什么总是那么胆小?

缺乏自信,你已失掉了不少成功的机会。

老师希望你以后大胆些,主动些,你会进步的,能做到吗?

2、翟子豪你是一个很有主见的小男孩,老师知道你的理想是做个“伟人”。

可“伟人”不是每个人都能做到的。

你要实现理想,必须从小事做起,无论做什么事情都必须勤奋努力。

可是,你好好想想,你都做到了吗?

试试吧!

老师期待着你的进步!

3、赵亮你是个让人喜爱的男孩,打扫卫生态度认真,每天坚持最后一个走,老师一直被你的这种精神所感动着。

最近,老师发现你的学习有了不少进步,也能按时完成作业,老师为你高兴。

如果你今后上课时不做小动作,专心听讲,你会进步得更快。

有信心吗?

努力吧!

4、王雪聪你的学习基础是差了一些,但你不要灰心,“世上无难事,只怕有心人”,只要你学习专心些、勤奋些、细心些,不懂就问。

你的成绩会赶上来的。

自信些,老师、家长、同学都在关心你、支持你!

等你的好消息噢!

5、刘宽你在老师的心目中,是个很乖很乖的小男孩。

总是严格要求自己。

上课时,两只小手总是放得平平的。

专心听讲,认真完成作业而且关心集体。

在老师的鼓励下,你也能勇敢地举手发言了。

老师希望你能继续努力,大胆提问,那你会有更大进步的。

努力吧!

6、连颇你会皱起眉头,是想不出问题吗?

你会默不作声,是不知道怎么回答吗?

你会在老师不注意时,做小动作,是想引起老师的关注吗?

告诉老师,好吗?

其实,老师时刻都在关注着你,你一点儿也不比别人差,你同样是老师最聪明的学生!

对自己要有信心!

敞开你的心,让老师和同学一起进入,付出努力,一定会有收获。

让我们一起努力,好吗?

7、贾肖你是位聪明又懂礼貌的好女孩,每次无论老师在哪儿碰到你,你总是亲切地向老师问好,老师心里好高兴,可是当老师看到你作业的不认真和上课经常讲悄悄话和做小动作时,不禁皱眉了,聪明的女孩,下学期你一定不会让老师失望的,对吗?

8、连臣臣在校尊敬老师,团结同学,关心集体是你的特点、优点。

看到你用心听课时发言是那么积极,老师是多么高兴。

可你有时也很让老师生气,作业不及时完成,字迹潦草,上课不专心,让老师伤心。

你知道吗?

如果你改掉这些小毛病,你肯定会成为一名好学生,老师期待着这一天。

差生学生的期末评语你平时观察仔细,思维快,记忆力好,每天很早就来开门,老师、同学都很佩服你,每次考数学准确率高,这与你的认真和细心是分不开的,不过你的调皮也让人讨厌,平常上课时喜欢随便讲话,这是不应该的,老师希望你改正握笔姿势,能写出一手漂亮的字来。

平时的你总和同学和睦相处,每次劳动总是抢着干,你忠厚,老实,对老师和同学都有爱心,处处为别人着想,你能做到这一点,真是了不起,你学习认真,字写得越来越漂亮了,教师希望你课后多看课外书,提高自己的语言表达能力。

你思维敏捷,说话较快,活动能力较强,是老师的得力助手老师很喜欢你,你关心集体,对同学老师有爱心,只要班级里有一点困难,你总是尽力帮助,你的思想很好,你能礼貌待人,每天早读你象小老师一样出现在同学们面前,你真了不起,你的优点很多,不过,老师发现作业时不细心,希你改正。

你在老师的面前总是那样可爱,显得一本正经,可你背着老师的面又变得那样调皮,学习情绪不稳定,你平常认真写字的话,写出来的字多漂亮,真让人喜欢,假如你在作业中天天能做到这样,那多好啊!

平常你爱做纸工,也喜欢玩耍,有时上课时略地还要偷偷地做做小动作,这是不应该的,望你以后改正。

现在的你变得越来越可爱了,你的脑子灵活,再加上自己爱好,老师更喜欢你了,作业能做到按时完成,这对于你来说,确实不容易,上课时能做到专心听讲,不开小差,要能控制自己,能做到这一点你真了不起,老师想不着你会变得这样好,老师相信你今后将会成为我班出色的学生。

差生学生的期末评语杨梦如果生命是树,那么,理想是根,勤奋是叶,毅力是干,成功是果,你有良好的学习基础,又写得一手好字,如果能在奋斗目标的指引下,勤奋、执著地去追索成功,你的生命之树才会开花结果。

这学期你各方面的表现都很不错,学习成绩稳步提高,在班上始终并列前茅,我一直对你有信心,相信你能靠实力做一个出类拔萃的人!

马栓喜你在老师的心目中,是个很乖很乖的小男孩。

总是严格要求自己。

上课时,两只小手总是放得平平的。

专心听讲,认真完成作业且热爱公物。

在老师的鼓励下,你的发言也积极了。

但最近,你染上了个坏习惯,那就是粗心。

老师希望你把它扔掉,你能做到吗?

做一个让老师更喜欢的学生,努力吧!

赵胜老师惊喜地发现,以前的“小花猫”不见了,现在的你也开始讲卫生了。

你瞧,即使很多同学对你有意见,但老师还是能在你身上发现优点,说明你也是个可爱的孩子。

老师给你一个方法来改掉你身上的缺点好吗?

那就是:

认真。

认真完成作业、认真听讲、认真思考,按照老师的方法去做吧!

你一定会成功,老师相信、支持你。

王猛你是一位天真活泼可爱的孩子,可是不知道为什么,每次你都会玩得忘了时间,上下课、放学后都一样。

每当老师看到你那双充满了表现欲的眼睛,总不免替你感到惋惜,只要你上课认真听讲,回家认真完成作业,老师相信,你一定能够在老师面前表现出一个完美的你!

加油吧!

李光才你是个聪明又可爱的小男孩,认真学习,作业及时完成,热爱劳动,热爱集体。

如果你今后上课时不做小动作,做作业不粗心大意,老师相信,在不久的将来,老师一定能看到一个更出色的你。

王朝得你是一个聪明机灵的小男孩,只是课堂上自由散漫,从不完成作业,字迹潦草,成绩不理想,老师知道你并不愚笨,只是对学习缺少信心。

贪玩占用了你很多时间,爱玩虽不是缺点,可是贪玩却会影响你的进步。

希望你在学习上多下点功夫。

我相信你定能取得好成绩,你说对吗?

差生学生的期末评语你遇事反应快,说话能力强,聪明好学,同学和睦,为人大方,同学们喜欢和你做朋友,老师也以你为骄傲。

可是你上课注意力不集中,爱做小动作,不想超越人家。

今后老师希望你鼓足劲,拼一拼,做一个品学兼优的孩子。

在你身边有两个形影不离的小伙伴:

“聪明”和“调皮”。

“聪明”因“调皮”的捣乱而少了很多。

是啊,上课坐不住,听不见课,还怎么聪明呢?

希望下学期你能主动赶走这个“小调皮”,变得更聪明!

你聪明活泼,上课专心听讲,认真完成作业;尊敬老师,团结同学,关心班集体,是同学的好伙伴,老师的好学生!

但是,要成为一名全面发展的好学生,要在德、智、体、美、劳各方面做到同步发展特别是劳动方面,要争取进步。

(4)班所有同学中,最聪明的是你,最调皮的也是你,最懒惰的还是你;老师最欣赏的是你,最反感的还是你最让老师得意的是你,最让老师伤心的又是你------下学期,老师希望你能;力争上游,成为人人喜欢的好孩子。

你很懂事,可能有时做错事,但你都及时改正了,知错就改还是个好孩子。

你很重视学习,还写了一手漂亮的字,真了不起,但你在上课时很少举手发言,其实你回答得肯定比别人好,相信自己。

新的学期里,老师希望你能变得勇敢一些,做一个大胆的男孩子。

首先,老师要向你表示祝贺,因为你是我们班进步最大的同学。

从这可以看出,你是一个很聪明的孩子。

要想取得好成绩,除了聪明外,最重要的还是勤奋,相信你已经明白,并且能够持之以恒。

老师祝你在新的一年里能取得更好的成绩。

差生学生的期末评语

1、你性格内向,平时沉默寡言,不爱说话,但勤奋好学,诚实可爱。

你有较强的应变力和适应力,善于调整自己的知识结构,学习踏实,成绩优秀。

你能积极参加各项活动,为班级建设出力,与同学能和睦相处。

你的作文构思新颖,文笔流畅,老师很欣赏你的《新学期有感》。

作业整洁,字迹漂亮。

你应该开朗一些,活泼一些,十多岁的少年对生活本应充满热情;你应该主动一些,在学习上多问、多练、多探索。

你定成为更优秀的学生。

2、你思想纯朴,诚恳,同学关系好,热爱集体,乐意助人是你的美德。

你头脑是聪明的,富有想象力,否则怎么能画出如此漂亮的美术作品呢?

只是在学习文化课上的潜能还没有充分发挥出来。

其实,你只要上课认真听,课后认真复习,有什么不懂的及时向别人请教,成绩是会跟上来的,你并不是笨,只是还没有掌握学习的方法。

你一直很努力学习,在逆境中你没有放弃自己,这是最可贵,我希望你能更轻松些,要知道,每个人的生活中都有阴影,但也有阳光。

3、你文静、乖巧而又带点害羞。

学习刻苦认真,善于思考,勇于进取。

经历艰苦的磨砺时,你不失奋斗的勇气;享受荣誉的美时,你不沾沾自喜。

你在班里从不张扬,总是默默无闻的,但这并不影响你在同学们心中的威信,因为你用自己优秀的学习成绩证明着你的实力。

课堂上你总是全神贯注地听老师讲课,课下你认真完成作业,一丝不苟地对待学习。

今后在学习上要大胆表现自己,多问,多思考,多练习,我相信,成功的花朵在汗水的浇灌中会更加鲜艳。

4、你是个有上进心、听话懂事、善解人意、诚实质朴、为人热情大方,能和同学友好相处,令人信任的女孩。

娟秀的小字,干净的卷面都说明你是一个认真仔细的好女孩。

成绩比上学期有较大的进步。

美中不足的是老师发现你在上英语课有时精神不够集中,基础知识还掌握得不够牢固。

希望你今后能正视自己的不足,在平时更注重基础知识的学习与训练,加强能力的培养,做一个全面发展的好学生!

继续努力吧!

我深深地为你祝福!

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