转导 PPT课件.pptx

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*导,转导的概念,转导(transduction):

由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。

它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。

其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。

类别,普遍性转导:

能传递供体细菌染色体上的任何基因的传导。

局限性转导:

只能传递染色体上原噬菌体特定位点附近少数基因的传导。

实现转导的基础,与转化一样,不需要细胞间的直接接触。

溶源性(lysogeny):

噬菌体在大肠杆菌体内可以呈环形分子存在于细胞质中,也可通过整合酶的作用而整合到寄主染色体上成为原噬菌体状态,并与寄主染色体一起复制并能维持许多代,这种现象称为噬菌体的溶源性。

溶源性是一种相当稳定的遗传性状。

凡能使细菌溶源化的噬菌体都称为温和噬菌体,以不活动的状态存在于细菌细胞中的温和噬菌体称为原噬菌体。

原噬菌体在一定条件下可以进入营养生长状态而复制繁殖,并最终导致细胞裂解而释放出噬菌体。

普遍性转导,转导颗粒的形成转导子的形成,噬菌体侵染供体细菌的,感染阶段,噬菌体的形成是借助于细菌细胞的代谢机构,由噬菌体本身的核酸物质操纵的。

增殖阶段成熟阶段,转导颗粒:

把细菌染色体片段包装在噬菌体蛋白质外壳内而产生的假噬菌体,其中并不包含噬菌体的遗传物质。

流产转导,转导的DNA不整合到受体细胞的染色体上,虽然不能继续复制,但仍然表达基因功能的转导称为流产转导。

-酶分子转导DNA,O,细菌染色体,虽无转导基因,但因为从母细胞中获得了一定量的基因产物可维持细胞分裂几次,只有一个子细胞具有转导基因,完全转导,转导的DNA整合到受体细胞染色体上,并能产生稳定的转导子的转导称为完全转导。

在同一次转导中,流产转导的细胞往往多于完全转导的细胞。

转导颗粒有时可以将染色体上距离十分接近的几个基因同时转导到受体细胞。

这种现象称为共传导。

如果进入受体的外源DNA被受体细胞降解,则导致转导失败,在选择平板上无菌落形成。

局限性转导,局限性传导:

把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者基因组整合,重组,形成局限转导子的现象。

根据转导子出现频率的高低可分为低频转导(LFT)和高频转导(HFT),平板涂布(需设对照组),加入12滴氯仿杀死活菌体,离心取上清液,转导噬菌体液,将受体菌培养到对数期,加入转导噬菌体液,噬菌体液与,菌液比为(,0.20.4:

1),取布满噬菌斑而变得透明的平板,刮下软琼脂离心(4000r10000r/min)。

于37静置20min使受体菌感染。

400010000r/min离心15min收集菌体,悬浮于适量缓冲液中,涂布选择培养基平板,根据选择标记挑选转导子,的制备,转,导,应用,应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究手段。

它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因的精细结构分析。

在遗传工程中可以把所要克隆的基因通过重组DNA技术插入到噬菌体的DNA中,然后通过离体包装方法把它用噬菌体外壳蛋白包装起来,再去感染寄主细胞以制备基因文库。

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