1、*导,转导的概念,转导(transduction):由噬菌体将一个细胞 的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌 之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通 过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。,类别,普遍性转导:能传递供体细菌染色体上的任何 基因的传导。局限性转导:只能传递染色体上原噬菌体特定 位点附近少数基因的传导。,实现转导的基础,与转化一样,不需要细胞间的直接接触。溶源性(lysogeny):噬菌体在大肠杆菌体内可以呈 环形分子存在于细胞质中,也可通过整合酶的作用 而整合到寄主染色体上成为原噬菌体状态,并与寄 主染色体一起复制并能维持许多代,这种现象称为 噬菌体的
2、溶源性。溶源性是一种相当稳定的遗传性状。凡能使细菌溶源化的噬菌体都称为温和噬菌体,以 不活动的状态存在于细菌细胞中的温和噬菌体称为 原噬菌体。原噬菌体在一定条件下可以进入营养生长状态而复 制繁殖,并最终导致细胞裂解而释放出噬菌体。,普遍性转导,转导颗粒的形 成转导子的形成,噬菌体侵染 供体细菌的,感染阶段,噬菌体的形成是 借助于细菌细胞 的代谢机构,由 噬菌体本身的核 酸物质操纵的。,增殖阶段成熟阶段,转导颗粒:把细菌染色体片段包装在噬菌体蛋白质外壳内而产生的假噬菌 体,其中并不包含噬菌体的遗传物质。,流产转导,转导的DNA不整合到受体细胞的染色体上,虽然不能继续复制,但仍然表达基因功能的转导
3、称为流产转导。,-酶分子 转导DNA,O,细菌染 色体,虽无转导基因,但因为从母细胞 中获得了一定量 的基因产物可维 持细胞分裂几次,只有一个子细胞具 有转导基因,完全转导,转导的DNA整合到受体细胞染色体上,并能产生 稳定的转导子的转导称为完全转导。,在同一次转导中,流产转导的细胞往往多 于完全转导的细胞。转导颗粒有时可以将染色体上距离十分接 近的几个基因同时转导到受体细胞。这种 现象称为共传导。如果进入受体的外源DNA被受体细胞降解,则导致转导失败,在选择平板上无菌落形 成。,局限性转导,局限性传导:把供体菌的少数特定基因携带到受 体菌中,并与后者基因组整合,重组,形成局限 转导子的现象。
4、根据转导子出现频率的高低可分为低频转导(LFT)和高频转导(HFT),平板涂布(需设 对照组),加入12滴氯仿 杀死活菌体,离 心取上清液,转导噬菌体液,将受体菌培养到 对数期,加入转导噬菌体 液,噬菌体液与,菌液比为(,0.20.4:1),取布满噬菌斑而变得 透明的平板,刮下软 琼脂离心(4000r10000r/mi n)。于37静置20min使受体菌 感染。,400010000r/min离心15min收集菌体,悬浮于适量缓冲 液中,涂布选择 培养基平板,根据选择标记挑 选转导子,的 制 备,转,导,应用,应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究 手段。它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因 的精细结构分析。在遗传工程中可以把所要克隆的基因通过重组DNA技术插入到噬菌体的DNA中,然后通过离体包装方法把它用噬菌体外壳蛋白包装起来,再 去感染寄主细胞以制备基因文库。,