微生物各论教案.docx
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微生物各论教案
第十章化脓性细菌（purulentbacterium）
一、概念：
化脓性细菌是一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。
二、分类：
1． 化脓性球菌：
G+，葡萄球菌属，链球菌属
G-，脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌
2． 化脓性杆菌：
G-，大肠埃希菌属，假单胞菌属
第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus）
在自然界分布广泛，是最常见的化脓性球菌。
模式代表菌株：
金黄色葡萄球菌（S.aureus）
一、 生物学性状
1． 形态与染色：
G+球菌，典型排列方式为葡萄串状，无特殊结构（体外）
2． 培养特性
温度：
28-38℃（37℃）；pH：
4.5-9.8（7.4）
培养基：
普通培养基生长良好.血琼脂平板上生长繁茂并形成全透明溶血环（β溶血）
菌落：
中等大小（1-2mm），圆形，光滑，不透明，各种脂溶性色素
3． 生化反应
4． 分类
根据色素，生化反应等不同类型，分为三种：
主要性状
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
腐生葡萄球菌
菌落色素
金黄色
白色
白色或柠檬色
血浆凝固酶
＋
－
－
α溶血素
＋
－
－
SPA
＋
－
－
甘露醇发酵
＋
－
－
致病性
强
弱
无
5． 抗原结构
（1） 葡萄球菌A蛋白（staphylococcalproteinA,SPA）
性质：
①细菌细胞壁的表面蛋白
②可与人类、豚鼠、小鼠等多种哺乳动物IgG的Fc段非特异性结合，结合后的抗原抗体复合物有以下作用：
a. 抗吞噬
b. 损伤血小板，引起超敏反应
c. 可用于协同凝集试验
（2） 荚膜：
黏附作用
（3） 多糖抗原：
存在于细胞壁，为磷壁酸中的组分，分为两群
A群――金黄色葡萄球菌
B群――表皮葡萄球菌（S.epidermidis）
6． 抵抗力
（1） 抵抗干燥，热（80℃，30min），盐（10-15％）
（2） 碱性染料敏感（结晶紫，龙胆紫）
（3） 耐药菌株迅速增多
二、 致病性
（一） 致病物质
1． 侵袭力
（1）表面结构：
SPA，荚膜等
（2）酶类：
① 凝固酶（coagulase）：
能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。
☆分类：
a.游离凝固酶（freecoagulase）：
分泌至菌体外的蛋白质，作用类似于凝血酶原物质，使血浆发生凝固（用试管法测定）
b.结合凝固酶（clumpingfactor）：
结合于菌体表面，是菌株的表面纤维蛋白原受体（用玻片法测定）使菌体凝集。
☆ 作用：
a.抗吞噬，保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏
b.刺激机体产生抗体，具有一定的保护作用
（3） 毒素（外毒素）
① 葡萄球菌溶素（staphylolysin）：
损伤细胞膜的细胞毒素，分为α、β、γ、δ等。
α溶素性质:
a.不耐热的蛋白质
b.对多种哺乳动物红细胞有溶血作用
c.对有吞噬作用的细胞及多种组织细胞有损伤作用
d. 经甲醛脱毒后可制成类毒素
②杀白细胞素（leukocindin）：
攻击中性粒细胞和巨噬细胞
作用部位：
细胞膜
③肠毒素（enterotoxin）：
引起急性肠胃炎（食物中毒）
性质：
a.热稳定的可溶性蛋白，耐热100C,30min
b.抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用
④表皮剥脱毒素（exfoliativetoxin,exfoliatin）
所致疾病：
烫伤样皮肤综合征（剥脱性皮炎）
⑤毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）
所致疾病：
多个器官系统功能紊乱
毒性休克综合征（TSS）
（二） 超抗原（superantigen）
概念：
超抗原是指那些不经过抗原递呈细胞的处理，便能与MHCⅡ类分子结合，直接激活T细胞增值，使其能释放细胞因子（IL-1，IL-2，TNFα和INF-γ等）的抗原。
如金黄色葡萄球菌产生的肠毒素。
（三） 所致疾病
1． 侵袭性疾病：
侵入机体导致化脓性感染
（1） 局部感染：
疖，毛囊炎，伤口化脓，肺炎，中耳炎
（2） 全身感染：
败血症，脓毒血症
2． 毒素性疾病：
外毒素引起
（1） 食物中毒（肠毒素）
（2） 假膜性肠炎（菌群失调引起）
（3） 烫伤样皮肤综合症（SSSS，表皮剥脱毒素）
（4） 毒性休克综合症（TSS，由TSST-1引起）
三、 免疫性
天然免疫力，患病后也可获得一定的免疫力
四、 微生物学检查法
样品采集：
痰（上呼吸道感染）
血（骨髓炎，心内膜炎）
食物，排泄物，呕吐物（食物中毒）
中段尿（膀胱炎）
脑脊液（脑膜炎）
1． 涂片、染色、镜检（初步诊断）
2． 分离培养和鉴定
3． 药敏试验
4． 肠毒素检查和动物试验
五、 防治原则
附：
凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）
1．致病性：
细胞壁外黏质物
血溶素（βγ）
2． 所致疾病：
①泌尿系感染----急性膀胱炎
②细菌性心内膜炎
③败血症
④术后感染
3． 检查与防治
第二节 链球菌属（streptococcus）
分布广泛，少数致病，主要致病菌为A组链球菌，肺炎链球菌
链球菌分类：
1． 根据溶血现象分类：
① 甲型溶血性链球菌（α-hemolyticstreptococcus）----产生甲型溶血（α溶血），草绿色溶血环，条件致病菌
② 乙型溶血性链球菌（β-hemolyticstreptococcus）----产生乙型溶血（β溶血），透明无色溶血环，致病菌
③ 丙型溶血性链球菌（γ-streptococcus）----无溶血环，一般不致病
2． 根据链球菌细胞壁中的多糖抗原不同分群，20群
对人致病者90%属A群，多数产生β溶血
3． 根据对氧的需要分为：
需氧，兼性厌氧，厌氧性链球菌
一、 A群链球菌
（一）生物学性状
1． 形态与染色
G+球菌，链状排列，无芽孢，鞭毛，早期有荚膜
2． 培养特性：
兼性或专性厌氧，温度、pH无特殊要求
培养基：
营养要求较高，普通培养基生长不良，需补充血液，血清，葡萄糖等。
菌落：
微小菌落（直径0.5-0.7mm），灰白色，表面光滑，β溶血
3． 抗原结构
① 多糖抗原（C抗原）：
细胞壁多糖组分，群特异性，分群基础
② 蛋白质抗原（表面抗原）：
型特异性，A群链球菌M蛋白与致病性有关
③ 核蛋白抗原（P抗原）：
无特异性
4． 抵抗力
不耐热，耐干燥，少有耐药菌株
（二）致病性
Ⅰ.致病物质：
侵袭力：
细胞壁成分，胞外侵袭酶类
毒力
毒素：
外毒素
1． 细菌胞壁成分
（1） 脂磷壁酸（LTA）：
围绕在M蛋白外层，增强细菌对敏感细胞的黏附性
（2） M蛋白（Mprotein）：
抗吞噬，抵抗吞噬细胞内的杀菌作用，引起某些超敏反应性疾病
（3） 肽聚糖：
致热，溶血小板
（4） 细菌胞壁受体：
有利于黏附
（5） F蛋白（proteinF）：
有利于黏附
2． 侵袭性酶类：
（1） 透明质酸酶（hyaluronidase）：
分解透明质酸，有利于病菌扩散
（2） 链激酶（SK）：
耐热，溶解血块或阻止血浆凝固，有利于病菌扩散
（3） 链道酶（SD）：
降解脓液中的DNA，有利于病菌扩散
3． 外毒素类
（1） 致热外毒素（pyrogenicexotoxin）
性质：
a.由带有溶原性噬菌体的A群链球菌产生
b.人类猩红热的主要毒性物质
c.热稳定蛋白质
d.具超抗原作用
（2） 链球菌溶素（streptolysin）
作用：
溶解红细胞，破坏白细胞，血小板
分类：
链球菌溶素O（streptolysinO），链球菌溶素S（streptolysinS）
链球菌溶素O（SLO）
链球菌溶素（SLS）
有-SH基团，对O2敏感
O2
-SH S-S 失去溶血活性
对O2稳定
对中性粒细胞有破坏作用，对血小板、巨噬细胞、神经细胞等有毒性作用
溶解红细胞慢于SLO
抗原性强
无免疫原性
Ⅱ.所致疾病：
主要由A群链球菌引起
1． 化脓性感染：
病菌侵入并引起化脓性感染，脓液稀薄，感染易扩散（与葡萄球菌化脓性感染的不同点）
2． 中毒性疾病：
与外毒素有关
3． 超敏反应性疾病：
与M蛋白有关
（三）免疫性
感染后可获得抗M蛋白抗体，抗SPE抗体----特异性体液免疫
M蛋白诱生γ-IFN----细胞免疫
（四）微生物检查法
采集标本，直接涂片染色（初步诊断），分离培养与鉴定
血清学实验：
抗O试验（ASOtest）----风湿热的辅助诊断
（五）防治原则
传染源：
病人，带菌者
首选药物：
青霉素G
二、 肺炎链球菌（S.pneumoniae）
（一） 生物学性状
3． 形态与染色
G+球菌，菌体矛头状，成对排列，无鞭毛，芽孢，有荚膜
4． 培养特性
营养要求较高（血平板）
菌落：
α-溶血，光滑（有毒株），后期呈脐状（稳定期产生自溶酶）
5． 抵抗力：
对消毒剂敏感，抗干燥（荚膜）
（二） 致病性
1． 致病物质
① 荚膜：
抗吞噬
② 肺炎链球菌溶素O（pneumolysinO）：
类似于链球菌溶素O（SLO）
③ 脂磷壁酸：
黏附
④ 神经氨酸酶：
有利于肺炎链球菌在粘膜上定植、扩散
2． 所致疾病
① 成人及儿童大叶性肺炎
② 中耳炎
（三） 免疫性
荚膜多糖型特异抗体
（四） 微生物学检查法
1． 标本采集
2． 涂片染色（初步诊断）
3． 分离培养
4． 鉴定：
胆汁溶菌，菊糖发酵，奥普托辛（Optochin）试验
（五） 防治原则
荚膜多糖疫苗
第三节奈瑟菌属（Neisseria）
脑膜炎奈瑟菌（N.meningitides）
致病菌
淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）
一、 脑膜炎奈瑟菌（N.meningitides）
（一） 生物学性状
1． 形态与染色
肾形，G-双球菌，有荚膜，菌毛
2． 培养特性
专性需氧，培养基：
巧克力培养基，5%CO2
菌落：
光滑，透明，不溶血
3． 抵抗力
对干燥，热力，消毒剂均敏感
（二） 致病性
1．致病物质
① 荚膜：
② 菌毛：
③ 内毒素：
主要致病物质
2． 所致疾病
流脑，人是其唯一易感宿主
三种临床类型：
普通型，爆发型，慢性败血病型
（三） 免疫性：
以体液免疫为主
（四） 微生物学检查法
1． 标本采集
2． 涂片染色镜检
3． 分离培养与鉴定
4． 快速诊断法
（五） 防治原则
流脑荚膜多糖疫苗，治疗首选青霉素G
二、 淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）
性传播疾病－淋病的病原体
（一） 生物学性状：
类似于脑膜炎奈瑟菌
（二） 致病性
1． 致病物质
① 菌毛：
黏附，抗吞噬
② 外膜蛋白：
破坏中性粒细胞膜
③ 脂多糖
④ IgA1蛋白酶：
破坏黏膜表面特异性IgA1抗体
2． 所致疾病：
淋病（性病），淋球菌性结膜炎（婴儿）
（三） 微生物学检查法
（四） 防治原则
第十一章 肠道感染细菌
传播途径：
粪-口
第一节 埃希菌（Escherichia）
5个种，代表菌种：
大肠埃希菌（E.coli）
一、 生物学性状
1． 形态与染色
G-杆菌，有菌毛，鞭毛
2． 培养
普通琼脂培养基上生长良好
3． 生化反应（活跃而复杂）
（1）糖发酵试验
葡萄糖
乳糖
麦芽糖
甘露糖
蔗糖
+
+
+
+
+
麦康克培养基：
红色菌落
EMB（伊红-亚甲兰）培养基：
紫黑色，金属光泽
（3） 枸橼酸盐（IMViC）试验：
++--
4． 抗原结构：
血清学分型基础
（1） O抗原----特异多糖（脂多糖组分），大于170种
（2） H抗原----鞭毛抗原，大于56种
（3） K抗原----O抗原外层，多糖，大于100种
大肠埃希菌分型命名举例:
：
O111:
K58（B4）:
H2
二、 致病性
（一） 致病物质
Ⅰ.侵袭力：
1． 荚膜
2． 黏附素：
使细菌黏着在泌尿道和肠道细胞上，有高特异性
（1） 定植因子抗原Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ（CFA/Ⅰ,CFA/Ⅱ,CFA/Ⅲ）
（2） 菌毛：
Ⅱ.毒素：
2． 内毒素
3． 外毒素：
（1） 志贺毒素Ⅰ和Ⅱ（Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ）
（2） 耐热肠毒素a,b（STa,STb）
（3） 不耐热肠毒素Ⅰ和Ⅱ（LT-Ⅰ，LT-Ⅱ）
（4） 溶血素A（HlyA）
（二）所致疾病
1． 肠道外感染
多数大肠埃希菌在肠道内不致病，但如移位至肠道外引起肠外感染。
（机会感染，内源性感染）
（1） 泌尿道感染：
常见。
上行感染，90%由本菌引起
（2） 化脓性感染
（3） 败血症
（4） 新生儿脑膜炎
2．肠胃炎（外源性感染，某些特殊血清型的大肠埃希菌引起）
（1） 肠产毒素性大肠埃希菌（enterotoxingenicE.coli,ETEC）
① 致病物质
a. 定植因子：
使细菌黏附到小肠上皮细胞上
b. 肠毒素
分类
性质
LT（不耐热肠毒素）
ST（耐热肠毒素）
稳定性
65℃，30min破坏
100℃，20min不失活
MW
73000
1500-4000
抗原性
可刺激机体产生相应中和抗体
免疫原性差
结构
1个A亚单位和5个B亚单位
低分子量多肽
编码LT-Ⅰ和Sta的基因存在于一个转移性质质粒上。
LT-Ⅰ作用机制：
（与霍乱肠毒素作用相似）
B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面GM1神经节苷脂结合 A亚单位穿过细胞膜 作用于腺苷环化酶 cAMP增高 肠粘膜细胞内水、氯、碳酸氢钾过度分泌至腹腔，钠吸收减少 腹泻
② 所致疾病：
5岁以下婴幼儿和旅游者腹泻
（2）肠侵袭性大肠埃希菌（enteroinvasiveE.coli,EIEC）
① 不产肠毒素，侵袭结肠粘膜上皮细胞，与志贺菌相似。
细菌侵入结肠上皮细胞细胞生长复制空泡结肠上皮细胞 杀死感染细胞 导致组织破坏和炎症发生
② 所致疾病：
侵犯较大儿童，成人，症状类似菌痢
（3）肠致病性大肠埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）
① 致病原因：
无肠毒素及其他外毒素，无侵袭力
病菌在十二指肠，空肠和回肠上段黏膜表面大量繁殖，造成一系列损伤
② 所致疾病：
婴幼儿腹泻，严重可致死
（4） 肠出血性大肠埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）
① 致病原因：
产志贺毒素Stx-Ⅰ，Stx-Ⅱ，破坏肠绒毛结构（干扰蛋白质合成）
② 所致疾病：
出血性结肠炎，溶血性尿毒综合症（5岁以下儿童易感）
三、微生物学检查法：
（一） 临床标本的检查
1． 标本采集：
中段尿，血，脓，脑脊液，粪便等
2． 分离培养与鉴定
肠道外感染：
涂片染色，分离培养，鉴定：
IMVic（++--），生化反应
肠道内感染：
粪便接种鉴别培养基 ELISA，核酸杂交，PCR
（二）卫生细菌学检查
大肠菌群数：
饮水小于3个/升，果汁小于5个100ml
四、防治原则
1． 耐药性普遍，需做药敏试验
2． 减少院内交叉感染，严格无菌操作
3． 水，食品严格消毒
第二节 志贺菌（shigella）
细菌性痢疾的病原菌，通称痢疾杆菌（dysenterybacterium）
一、 生物学性状
1． 形态染色
G-杆菌，无鞭毛，有菌毛
培养特性：
普通琼脂平板即可生长
2． 生化反应
（1） 乳糖发酵：
-
EMB平板：
无色菌落
（2） 糖发酵试验
葡萄糖
乳糖
麦芽糖
甘露糖
蔗糖
+
-
-
-
-
（3） IMViC：
----
3． 抗原结构：
（1） O抗原：
分类，分群，分型
（2） K抗原：
在分类上无意义
二、 致病性与免疫性
感染只限于肠道，不入血，人是唯一自然状态宿主
（一）致病物质
1． 侵袭力
（1） 菌毛
（2） Ⅲ型分泌系统
2． 内毒素
（1） 作用：
①使肠粘膜通透性增高，破坏肠粘膜
②作用于肠壁自主神经系统，使肠功能紊乱
（2） 症状：
发热，休克，炎症，腹痛，里急后重
3． 外毒素：
由A群志贺菌Ⅰ型和Ⅱ型产生（StxⅠ和StxⅡ）
作用：
上皮细胞损伤
（二） 所致疾病
1． 传染源：
病人，带菌者
2． 所致疾病：
细菌性痢疾
① 急性细菌性痢疾
潜伏（1-3d） 腹痛，水样腹泻 发热，不适 脓血粘液便，腹痛，里急后重 2-5d自发消退
② 慢性细菌性痢疾
病程两个月以上
（三） 免疫性
消化道黏膜表面分泌型IgA（SIgA），免疫期短
三、 微生物学检查法
1． 标本：
粪便脓血，黏液，肛拭
2． 分离培养与鉴定
37℃
鉴别/选择培养基 可疑菌落 生化、血清学实验
18-24hr
3． 毒力实验
（1） 侵袭力：
Sereny实验
（2） ST实验：
Hera/Vero细胞，PCR技术
4． 快速诊断法
（1） 免疫染色法
（2） 免疫荧光球菌法
（3） 协同凝集实验
（4） 乳胶凝集实验
（5） 分子生物学方法：
PCR技术，基因探针
四、 防治原则
1． 及时治疗、隔离病人
2． 水、食物、牛奶卫生监测
3． 减毒活疫苗
第三节 沙门菌（salmonella）
大多数能感染人类的沙门菌属于肠道沙门菌肠道亚种
一、 生物学性状
1． 形态染色：
G-杆菌，有菌毛，周生鞭毛，无荚膜、芽孢
2． 培养特性：
普通琼脂平板即可生长
3． 生化反应：
P168表
4． 抗原构造
① O抗原：
LPS中特异性多糖，耐热，用于沙门菌分组
② H抗原：
鞭毛蛋白，不耐热，分为ⅠⅡ两相，可用于沙门菌分型
③ Vi抗原：
存在于菌表面，与细菌毒力有关。
5． 抵抗力：
较弱，65℃，15-30min杀死；
对胆盐，煌绿等化学物质抵抗力强于其他肠道菌
二、 致病性与免疫性
（一） 致病物质
1． 侵袭力
（1） 菌毛：
与M细胞结合
（2） Ⅲ型分泌系统（沙门菌致病岛Ⅰ、Ⅱ）
（3） 耐酸应答基因
（4） Vi抗原：
有微荚膜功能，抗吞噬，阻挡抗体补体作用
2． 内毒素：
发热，中毒症状
3． 肠毒素：
个别沙门菌产生，类似ETEC产的肠毒素
（二） 所致疾病
1． 肠热症
（1） 疾病：
伤寒，副伤寒
（2） 病程特点：
二次菌血症，超敏反应
侵入M细胞 巨噬细胞吞噬 肠系膜淋巴结大量繁殖 进入血流（第一次菌血症） 随血进入肝、脾、肾、胆等器官
再次入血（第二次菌血症） 再次进入肠壁淋巴组织（超敏反应）
局部组织坏死溃疡
2． 胃肠炎（细菌性食物中毒）：
最常见的沙门菌感染
（1） 致病机制：
细菌侵袭肠粘膜，释放内毒素
（2） 症状：
发热，呕吐，腹泻
3． 败血症
4． 无症状带菌者
指在症状消失后一年或更长的时间内仍可在其粪便中有相应沙门菌。
病菌滞留于胆囊或尿道中。
（三） 免疫性
主要防御机制：
特异性细胞免疫
三、 微生物学检查法
1． 标本：
病程不同，采取不同标本
2． 分离培养与鉴定
（1） 传统方法：
血液、骨髓液 增菌 生化反应
接种与肠道鉴别培养基 可疑菌落
粪便、尿 离心 玻片凝集试验
（2） 近期发展：
新的免疫学方法，分子生物学方法，Vi噬菌体分型
3． 血清学诊断：
（1） 概念：
肥达试验：
是用已知伤寒沙门菌菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖式沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清做试管或微孔板凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。
（2） 结果
① 正常值：
伤寒沙门菌O凝集效价小于1:
80，H效价小于1:
160,引起副伤寒沙门菌H效价小于1:
80
②
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