届二轮 植物组织培养技术 专题卷全国通用 7.docx

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届二轮植物组织培养技术专题卷全国通用7

植物组织培养技术

一、单选题

1．在月季花药培养中材料消毒主要有以下几步，顺序正确的是（）

①将花蕾在酒精中浸泡约30s

②放入氯化汞液中2～4min

③无菌水清洗，然后用吸水纸吸干花蕾表面的水分

④用无菌水冲洗3～5次

A．①②③④B．①③②④C．③①④②D．②③①④

【答案】B

【解析】

试题分析：

月季花药培养中材料消毒的步骤顺序是：

将花蕾在酒精中浸泡约30s→无菌水清洗，然后用吸水纸吸干花蕾表面的水分→放入氯化汞液中2～4min→用无菌水冲洗3～5次，所以B正确。

考点：

本题考查月季花药培养中材料消毒的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点。

2．有关花粉植株的形成，叙述错误的是

A．花粉可脱分化形成胚状体阶段，再发育成花粉植株

B．花粉可脱分化形成愈伤组织，再诱导分化成花粉植株

C．花期早期的花药比后期的更容易产生花粉植株

D．花期后期的花药比早期的更容易产生花粉植株

【答案】D

【解析】

试题分析：

亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响，早期的花药比后期的花药更容易产生花粉植株，D错误。

考点：

本题考查植物组织培养相关知识，意在考查考生的应用能力。

3．选择单核期以后的花药接种，花瓣已有些松动，会给材料的消毒带来困难。

主要原因是（）

A.花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料消毒带来困难

B.花瓣松动后，体积变大，给消毒带来困难

C.花瓣松动后，就会使花药消毒时接触酒精而被杀死

D.花瓣松动后，会使花药老化，不适宜作花药培养

【答案】A

【解析】月季花药培养过程中只有某一个时期对离体刺激敏感，单核期花药培养成功率最高，单核以前的花药质地幼嫩，极易破碎，单核期以后，花瓣松动，微生物就可能侵入到花粉，会给消毒带来困难，故选A。

【考点定位】植物组织培养

【名师点睛】一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高.选择单核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎；选择单核期以后的花药接种,花瓣已有些松动,又给材料的消毒带来困难。

4．接种和培养花药时的注意事项不包括（）

A．尽量不损伤花药K]

B．不需去除花丝

C．幼小植株形成后需要光照

D．花药开裂释放出的大量幼小植株需尽快分开

【答案】B

【解析】

试题分析：

若花药受损，易从受损部位产生愈伤组织，A正确；与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成，因此要彻底去除花丝，B错误；幼小植株形成后需要光照，生成叶绿素，由异养转化为自养，C正确；花药开裂释放出的胚状体要尽快分开，分别移植到新培养基上，否则这些植株将难以分开，D错误。

考点：

本题考查了接种和培养花药时应注意的事项，要求考生识记和理解接种和培养花药的过程，难度不大。

5．下列有关月季花药培养的叙述错误的是

A.月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的单倍体生殖细胞

B.小孢子四分体时期与动物精子形成过程中的四分体时期相同

C.月季花粉的一个小孢子母细胞经过分裂共形成8个精子

D.花药培养初期不需要光照，幼小植株形成后才需要光照

【答案】B

【解析】月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂形成的花粉粒进行有丝分裂形成的单倍体生殖细胞，A正确；月季花粉形成过程中的小孢子四分体是四个细胞连在一起，动物精子形成过程中的四分体是一对同源染色体含有四个染色单体，B正确；被子植物一个小孢子母细胞经过减数分裂形成4个花粉粒，再经有丝分裂最终共形成了8个精子，C正确；在花药培养初期不需要光照，而幼小植株形成后需要光照进行光合作用，D正确。

6．下列关于高中生物学实验的叙述，正确的是

A．在制备果酒和果醋的实验过程中都要持续通入氧气

B．分离土壤中不同种类的微生物可采用相同的稀释度

C．一般情况下，处于单核期的花粉培养成功率最高

D．选择过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验的理想材料

【答案】C

【解析】

试题分析：

果酒制作过程中需用酵母菌，前期需通往氧气，后期保持无氧环境进行发酵产生酒精，而果醋制作过程中的醋酸菌是好氧细菌，在整个过程中都要持续通往氧气，A错误；因为不同的微生物在土壤中的浓度不同，故分离土壤中不同种类的微生物需采用不同的稀释度，B错误；接种花药离体培养在单核期成功率最高，C正确；因为过氧化氢不稳定，在高温下会自行分解成水和氧气，从而不能正确表现酶活性，故不能选择过氧化氢酶研究温度对酶活性的影响，D错误

考点：

酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；探究影响酶活性的因素；微生物的分离和培养

7．下列关于影响植物组织培养因素，说法正确的是（）

A.不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同

B.在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素

C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的

D.pH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要

【答案】D

【解析】

试题分析：

不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料不同的部位培养的难易程度不同，A错误；在植物组织培养中，培养基中常常添加植物激素，但不是必须添加，B错误；植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是相互影响的，C错误。

考点：

本题考查影响植物组织培养因素，意在考查考生的知识应用能力。

8．下图为进行胡萝卜组织培养过程中某细胞所经历的生长发育各个阶段示意图，图中①一⑥为各个时期的细胞，a一c表示细胞所进行的生理过程。

下列叙述正确的是

A.胡萝卜植株所有的细胞都会经历a,b,c这三个过程

B.与②相比，①的表面积／体积的比值增大，与外界环境的物质交换能力也增强

C.⑤⑥含有的核酸相同，蛋白质不同

D.①具有细胞全能性而⑤⑥没有

【答案】B

【解析】

试题分析：

据图分析，a,b,c分别为细胞生长。

细胞分裂、细胞分化，植株有部分细胞始终保持分生能力，即不生长也不分化，如分生区细胞，A错。

与②相比，①的细胞体积较小，细胞体积越小，表面积／体积的比值越大，与外界环境的物质交换能力也增强，B正确。

⑤⑥都是由①分裂和分化而来，含有相同的DNA，而由于基因的选择性表达，转录生成的RNA不同，蛋白质也不同，故核酸不同，蛋白质不同，C错。

①⑤⑥都具有细胞全能性，D错。

考点：

本题考查细胞生命历程相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。

9．花粉植株能否诱导成功与材料的选择密切相关，选择的材料应符合下列哪个条件

A．完全开放的花B．单核居中期花粉

C．初花期花粉D．完全未开放的花蕾

【答案】D

【解析】

试题分析：

花粉植株能否诱导成功与材料的选择密切相关，选择的材料应符合完全未开放的花蕾．

考点：

植物组织培养

10．下列有关实验的叙述正确的是（）

A．制备植物原生质体时可在适宜的高渗溶液中用酶解法去除细胞壁

B．以苹果为原料酿制果酒和果醋时，应先提供氧气进行果醋发酵

C．在外植体脱分化时，应通入足量的CＯ2以满足光合作用的需要

D．利用稀释涂布平板法对大肠杆菌计数时需要借助于显微镜观察

【答案】D

【解析】制备植物原生质体时可用纤维素酶或果胶酶去除细胞壁，但应在和细胞液等渗溶液中以防止原生质体吸水涨破，故A错误。

以苹果为原料酿制果酒和果醋时，应先酿制果酒，所以先无氧进行果酒发酵，故B错误。

在外植体脱分化时，因为不能进行光合作用，所以不需要通入足量的二氧化碳，故C错误。

利用稀释涂布平板法对大肠杆菌计数需要借助于显微镜观察，故D正确。

【考点定位】本题考查生物技术实践相关知识，意在考察考生对知识点的理解和应用能力。

11．用于组织培养的培养液和无土栽培时所用的营养液相比，前者（　　）

A.必须含植物必需的矿质元素

B.必须含有机物

C.不一定含有植物激素

D.浓度必须小于细胞液浓度

【答案】B

【解析】植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物体器官或组织接种在适当的培养基上进行培养，最终发育成完整植物体；培养基中含有水、矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物和植物激素等。

无土栽培是将植物生长发育过程中所需各种矿质元素按一定比例配成营养液，并利用这种营养液栽培植物；培养基中含有水、必需矿质元素。

植物组织培养的培养基和无土栽培的营养液中需要添加矿质元素，A错误；因为植物组织培养过程中，组织细胞不进行光合作用，所以在组织培养的培养液中需要添加蔗糖，属于有机物；而无土栽培的绿色植物能进行光合作用，所以在营养液中不需要添加有机物，B正确；植物组织培养的培养液中需要植物激素，但绿色植物栽培的营养液中不需要植物激素，C错误；植物组织培养的培养基和无土栽培的营养液浓度都必须小于细胞液浓度，使得细胞吸水，D错误。

12．用组织培养技术繁殖一种名贵花卉的过程中，下列叙述不正确的是（）

A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又減少消毒剂对细胞的伤害

B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞

C.用花粉离体培养可获得单倍体植株，说明花粉细胞仍具有全能性

D.诱导愈伤组织生根时，培养基内通常应含生长素类调节剂

【答案】B

【解析】外植体消毒既要杀死材料表面的微生物，消毒剂还不能对细胞有伤害，A正确。

在愈伤组织培养中进入细胞融合的诱导剂，因为愈伤组织有细胞壁，细胞不能融合，所以无法得到染色体加倍的细胞，B错误。

用花粉离体培养可以得到单倍体植株，说明花粉细胞具有全能性，C正确。

诱导愈伤组织生根时，培养基中生长素类应高于细胞分裂素类含量，D正确。

点睛：

植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例都会影响细胞的发育方向。

如生长素用量比细胞分裂素用量比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。

比值适中时，促进愈伤组织的形成。

13．影响花药培养的主要因素是（）

A.材料的选择与培养基的组成B.亲本植株的生理状况

C.选择合适的花粉发育时期D.材料的低温处理与接种密度

【答案】A

【解析】试题分析：

影响花药组织培养的因素有很多，如材料和培养条件等，其中材料的选择与培养基的成分是主要影响因素；并不是任何发育时期的花粉都可以经过组织培养产生愈伤组织，一般的说，选择单核期的花药成功率最高，定花粉发育时期的常用方法是醋酸洋红法，并且要对所选的材料进行消毒处理；在组织培养过程中，应根据外植体分化的程度及时更换培养基。

考点：

本题考查花药组织培养的影响因素，意在考查考生的识记能力，属于容易题。

14．某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是（）

A.细胞分裂素和生长素配比不对

B.培养基营养过多

C.培养时间不到

D.光照不足

【答案】A

【解析】本题考查植物组织培养技术，要求考生理解植物组织培养的原理和方法，明确培养基中生长素用量和细胞分裂素用量比对植物组织培养的影响。

植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。

植物组织培养时，培养基中生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。

因此，在进行组织培养过程中，若发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因应该是培养基中细胞分裂素和生长素配比不对，A正确，BCD错误。

15．下列有关月季花药培养的叙述，错误的是（）

①月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂直接形成的单倍体生殖细胞

②被子植物花粉形成过程中的四分体与高等动物精子形成过程中的四分体概念不同

③被子植物一个小孢子母细胞经过减数分裂最终共形成了8个精子

④任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体

⑤在花药培养中，特别是通过胚状体形成的花粉植株，染色体组的数目常常会发生变化

A．①③⑤B．①④⑤C．①②③D．③④⑤

【答案】B

【解析】

试题分析：

月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂和有丝分裂形成的单倍体生殖细胞，故①错误。

被子植物花粉形成的四分体是指四个小孢子细胞，而高等动物精子形成的过程中四分体是指配对的一对同源染色体含有4条染色单体，故②正确。

被子植物的一个小孢子细胞最终形成2个精子，而一个小孢子母细胞可以形成4个小孢子细胞共8个精子，故③正确。

通常选用单核靠边期的花粉进行培养成功率高，故④错误。

在花药培养中，在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，染色体组的数目常常会发生变化，故⑤错误，因此选B。

考点：

本题考查月季花药培养箱知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

16．在用胡萝卜做菜时，菜中浮油会呈现出橘黄色，为了增加胡萝卜中营养物质的吸收，在进食胡萝卜的同时，应（）

A．多喝水B．多吃蛋白质类食品

C．多吃脂质食品D．多吃蔬菜

【答案】C

【解析】

试题分析：

由题意可知，胡萝卜素是脂溶性物质，因此,在进食含胡萝卜素较多的食品时,应多吃脂质食品，加大对脂质的摄入，以提高吸收效率，C项正确，A、B、D项错误。

考点：

本题考查胡萝卜素的相关知识，意在考查考生理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。

17．在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，下列生命活动不会同时发生的是（）

A．细胞的增殖与分化

B．光能的吸收与转化

C．ATP的合成与分解

D．有丝分裂与无丝分裂

【答案】D

【解析】

试题分析：

植物组织培养细胞进行增殖同时会进行分化，A正确。

幼苗通过叶进行光合作用，吸收转化和转化光能，B正确。

需要的能量由ATP的合成与分解提供，C正确。

发生有丝分裂，没有无丝分裂，D错。

考点：

本题考查植物组织培养相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。

18．以下关于花药接种和培养的实验操作中错误的一项是

A．花药开裂形成幼小植株后才给予光照

B．花药培养至开裂后，将长出的愈伤组织及时转移到分化培养基上

C．花药培养至开裂后，将释放出的胚状体整体移到新的培养基上继续培养

D．对培养出来的植株作进一步鉴定和筛选

【答案】C

【解析】每瓶接种花药7～10个，20～30天后，花药开裂形成幼小植株后才给予光照，A正确；花药培养至开裂后，将长出的愈伤组织及时转移到分化培养基上，B正确；花药离体培养形成愈伤组织后必须转移至分化培养基上才能得到幼小植株，C错误；如果接种的花药长出愈伤组织并分化成幼小植株，还需对植株作进一步的鉴定和筛选，D正确．

【考点定位】植物的组织培养

【名师点睛】1、花药的离体培养材料的选择：

要是选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎；选择单核期以后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，通常不选择盛开或略微开放的花．

2、选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法．某些植物的花粉不易着色需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色．

3、在无菌条件下剥离花药时要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织），同时还要彻底除去花丝．因为花丝的存在不利于愈伤组织或胚状体的形成．4、实验流程为：

材料的选取→材料的消毒→接种和培养→结果分析与评价．

19．下列有关生物工程的叙述正确的是

A.在筛选杂交瘤细胞的过程中需要使用特定的选择培养基

B.应用基因诊断技术，可检测受体细胞中目的基因是否表达

C.茎尖细胞具有很强的分裂能力，离体培养时不需要脱分化即可培养成完整植株

D.将牛的体细胞核移植到去核卵母细胞中，获得克隆牛是一种培育新物种的方式

【答案】A

【解析】筛选产生特异性抗体的杂交瘤细胞时要用特定的选择性培养基，淘汰其他不符合要求的细胞，A正确；检测受体细胞中目的基因是否表达，应该用抗原抗-体杂交技术，B错误；离体培养茎尖细胞时，需经脱分化、再分化才可形成完整的植株，C错误；将牛的体细胞核移植到去核卵细胞中，获得克的隆牛具备双亲的遗传特性，属于无性繁殖，没有出现新物种，D错误。

20．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是（）

A.利用花药离体培养得到单倍体植株

B.利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株

C.利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株

D.利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株

【答案】C

【解析】利用化药离体培养得到单倍体植株过程中需要用到植物组织培养，A错误。

利用基因工程培育抗虫棉用到脱分化、再分化的植物组织培养，B错误。

利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株，不需要用植物组织培养，C正确。

利用细胞工程培育杂种植株，也涉及脱分化、再分化的植物组织培养，D错误。

二、非选择题

21．（15分）请回答下列生物技术方面的问题。

（1）菊花的组织培养的操作程序是①制备MS固体培养基；②_____；③_____；④培养；⑤移栽；⑥栽培．移栽前应将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间进行壮苗，壮苗的目的是____。

（2）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的微生物是附着在葡萄皮上的________；在________、呈酸性的发酵液中，该菌种可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。

（3）进行植物组织培养时，对菊花的侧枝和月季的花药都需要消毒，消毒所用的药剂是_____和___。

（4）如图为提取胡萝卜素的萃取样品通过纸层析鉴定的结果示意图，A、B、C、D四点中，属于标

准样品的样点是________，图中②代表的物质是_____________。

该层析的目的是进行_________，而“叶绿体中色素的提取和分离”的实验中层析的目的是______________。

【答案】（15分，除标注外每空1分）

（1）外植体消毒接种使试管苗适应自然环境、提高抵抗力和生活力

（2）野生型酵母菌缺氧

（3）70%的酒精0.1%氯化汞溶液

（4）A和D（2分）其它色素杂质（2分）

胡萝卜素的鉴定（2分）叶绿体中色素的分离（2分）

【解析】

试题分析：

（1）菊花的组织培养的操作程序是制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培。

移栽前将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间进行壮苗，目的是使试管苗适应自然环境、提高抵抗力和生活力。

（2）葡萄酒的自然发酵过程中，主要微生物是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌；野生型酵母菌可在缺氧、呈酸性的发酵液中生长繁殖。

（3）植物组织培养时，常用70%的酒精、0.1%氯化汞溶液对菊花的侧枝和月季的花药消毒。

（4）根据纸层析鉴定的结果判断：

A、D是标准样品,B、C是萃取样品,图中②代表的物质是其它色素杂质。

在标准样品和萃取样品中都含有胡萝卜素，层析的目的是进行胡萝卜素的鉴定。

在“叶绿体中色素的提取和分离”的实验中层析的目的是叶绿体中色素的分离。

考点：

本题考查植物的组织培养及果酒制作与有机成分提取的知识。

意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。

能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的的能力。

22．选考内容课本填空

（1）葡萄酒制作过程中，在没有严格灭菌的条件下，通过和的措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种。

（2）某水样的大肠杆菌严重超标，常采用法统计样品中活菌数。

如果要对水样中的大肠杆菌进行扩大培养，常用的培养基应选取

A．MS固体培养基B．MS液体培养基

C．LB固体培养基D．LB液体培养基

（3）进行植物组织培养时，待生根后，将苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持以上的湿度，2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。

（4）“二娃”政策实施后，大量高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎：

要使精子和卵细胞在体外成功融合，首先须采集到成熟的卵细胞，此时需要用（激素）处理女方，达到的目的；同时对于男方提供的精子，须经系列处理与培养，以达到状态。

受精卵形成后，经人工培养至特定阶段，借助胚胎移植技术回输至女方体内，经过自然孕育，即得试管婴儿。

（5）对大面积烧伤病人，借助技术可获取大量自身健康皮肤用于移植。

培养的条件需要、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体（维持培养液的pH）。

【答案】

（1）控制温度通入氧气

（2）稀释涂布平板D（3）80%

（4）促性腺激素超数排卵获能（5）动物细胞培养无菌、无毒的环境

【解析】

（1）葡萄酒制作过程中，在没有严格灭菌的条件下，通过控制温度和通入氧气的措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种；

（2）对样品中的菌进行计数时常采用稀释涂布平板法，如果要对水样中的大肠杆菌进行扩大培养，常用LB液体培养基进行培养；

（3）进行植物组织培养时练苗时，要用玻璃罩或塑料布保持80%以上的湿度，2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止；

（4）采集卵母细胞时，需要用促性腺激素处理女方，使其超数排卵，同时对于男方提供的精子，须经获能处理才能进行受精；

（5）对于大面积烧伤病人，借助动物细胞培养技术可获取大量自身健康皮肤用于移植，培养的条件需要无菌、无毒的环境、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体（维持培养液的pH）。

【考点定位】发酵工程、胚胎工程

23．请回答下列与菊花茎段组织培养实验操作有关的问题。

（1）由于菊花茎段组织培养比较容易，故在配制MS固体培养基时，________（必需添加、不必添加）植物激素。

培养基配制完毕后，还需进行________灭菌。

（2）应选用生理状况好的菊花嫩枝茎段作为________，这是因为其更容易被诱导________。

（3）菊花茎段在接种前要用适当浓度的________溶液进行表面消毒。

（4）接种前，工作台要用体积分数为70%的酒精擦拭一遍。

之后，所有的接种操作都必须在________旁进行，并且每次使用器械后，都需要用________灭菌。

（5）接种后的锥形瓶最好放在________中培养。

培养期间应注意事项主要有：

定期________、控制好________，并每日给予适当时间光照。

【答案】

（1）不必添加　高压蒸汽

（2）外植体　脱分化和再分化

（3）酒精和氯化汞

（4）酒精灯火焰　火焰灼烧

（5）无菌箱　消毒　培养温度

【解析】

（1）菊花茎段自身能合成植物激素，因此培养基中不必添加植物激素，培养基配制完毕需进行高压蒸汽灭菌。

（2）外植体的选择直接关系到实验的成败，因此应选择容易被诱导脱分化和再分化的菊花嫩枝作为外植体。

（3）为防止微生物污染，菊花茎段在接种前要用适当浓度的酒精和氯化汞溶液进行表面消毒。

（4）为避免接种前、接种中污染外植体以及接种后污染环境，因此接种前，工作台要用体积分数为70%的酒精擦拭一遍，接种过程中所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁进行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。

（5）外植体在培养过程中要保持无菌环境，控制好温度，并给予适当光照。

24．（15分）五年前小明家承包了一大片荒山，购买、种植了无子柑橘苗。

今年，无子柑橘喜获丰收。

小明家将无子柑橘一部分销售；一部分橘瓤制作橘子酒，橘皮用作提取橘皮精油。

请对下列问题作出回答：

（一）以下是无子柑橘植物组织培养过程示意图：

外植体→愈伤组织→长出丛芽→生根→移栽成活

（1）判断愈伤组织是否产生，依据是看是否产生细胞。

（2）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂和分化的关键性激素，在植物组织培养过程中：

①若先使用细