研究生学位论文格式范本版.docx
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研究生学位论文格式范本版
分类号：
xxxxxxxxxxxx密级：
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UDC：
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西南林业大学xxxx届硕士研究生学位论文
云南高黎贡山羚牛分布与食性的初步研究
PreliminaryStudiesontheDistributionandDietofGaoligongTakininYunnanProvince
xxx
指导教师：
填写导师姓名职称
申请学位级别：
硕士
学科专业名称：
填写专业名称
论文提交日期：
xxxx年x月
论文答辩日期：
xxxx年x月x日
学位授予单位：
西南林业大学
学位授予日期：
xxxx年x月
西南林业大学xxxx届硕士研究生学位论文
云南高黎贡山羚牛分布与食性的初步研究
PreliminaryStudiesontheDistributionandDietofGaoligongTakininYunnanProvince
xxx
指导教师：
此处填写导师姓名职称
学位授予单位：
西南林业大学
云南昆明
声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下（或我个人……）进行的研究工作及取得的研究成果。
尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西南林业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
作者签名：
日期：
关于论文使用授权的说明
本人同意：
西南林业大学有权保留送交论文的复印件，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；提交论文一年后，允许论文被查阅和借阅，学校可以公布论文的全部或部分内容。
（保密的论文在解密后应遵守此规定）
作者签名：
导师签名：
日期：
摘要：
本论文采用茎尖培养三步法，首次对引入我国表现优良的8个白杨无性系，进行了微体快繁，为今后系统的苗期测定及田间试验提供了材料。
同时，选用了5个无性系，以水培苗或组培无菌苗为材料，进行愈伤组织诱导或对其发育状态调控及体细胞胚胎发生研究，为建立稳定的杨树体细胞胚胎发生体系奠定了基础。
试验结果表明，以水培苗带芽茎段为茎尖培养材料，银白杨与大齿杨杂种AG和美洲山杨与欧洲山杨杂种3#芽分化率显著低于其余6个无性系；垂直接种可显著提高水培苗腋芽分化率；玉米素浓度对芽分化率影响不明显，但影响材料的离体器官发生表现；8个无性系皆易诱导生根，其中银白杨与大齿杨杂种AG和灰杨Ca较其它无性系更易，选用根数作为评定生根效果指标更合适。
2,4-D高浓度悬浮培养下，成功的将美洲山杨与欧洲山杨杂种3#叶柄愈伤组织调节为胚性状态，通过细胞悬浮培养，获得了大量的球形胚，并首次观察到灰杨Ca茎尖白色愈伤组织内起源的子叶胚形成，得到了完整植株。
基因型和2,4-D浓度对愈伤组织状态调节，至为关键。
温度变化可影响茎尖形态发生。
愈伤组织达到胚性状态时，表面特征不一致，但有产生胚性细胞能力强弱之分。
关键词：
白杨茎尖培养体细胞胚胎发生
Abstract:
Inthispaper,athree-stepmicropropagationwassuccessfullyemployedfor8selectedgenotypesofaspen.Atthesametime,throughtheinductionofembryogeniccallus,Somaticembryogenesiswasstudied.Itwouldbebeneficialtoestablishastablesystemofembryogenesisinpoplar.
TheresultsofstudyonaspenshootcultureusingnodeasexplantshowthatpercentbudregenerationofAG（Populusalba×P.grandidentata）and3#（P.tremuloides×P.tre-mula）waslowerthanthatoftheotherclones.Percentageofbudregenerationcouldbeimprovedatverticalcutting.Withtheincreasingofzeatinconcentration,invitroorganogenesiswasdifferent.Allcloneswereeasytoinducerooting,especiallyAGandCa,andnumberofrootswasfittoestimatetheeffectonrootingofplantlet.
Supplementedwith10mg/L2,4-D,suspensionculturesinitiatedfromcallusderivedfrompetioleofaspenhybrid3#producedembryogeniccallusandahighestnumberofglobular-shapedembryos,andcotyledonary-stageembryosoriginatedfromwhitecallusofgreyaspenCa（P.×canescens）shootwerefirstobservedandemblingwereobtained.Genotypesandconcentrationof2,4-Dwascriticaltoinduceembryogenicandsomaticembryogenesis.Morphogenesisofshootwasaffectedbyculturetemperature.Characteristicofcallusproducedembryogeniccellwasheterogeneous,butpotentialabilitytoproduceembryogeniccellwasdifferent.
Keywords:
Populus（aspenclones）shootculturesomaticembryogenesis
目录
摘要Ⅰ
ABSTRACTⅡ
引言1
1文献综述5
1.1杨树茎尖培养研究进展5
1.1.1杨树茎尖培养概述7
1.1.2杨树茎尖培养技术研究9
1.2杨树体细胞胚胎发生研究进展17
1.2.1杨树体细胞胚胎发生概述20
图版23
参考文献26
个人简介31
导师简介33
致谢34
1白杨无性系体细胞胚胎发生技术研究
体细胞胚胎发生，在植物生长发育学理论研究和实际应用中，是合子胚和器官发生无法比拟的，是人们梦寐以求的离体形态发生方式。
杨树作为林木生物学研究的模式树种之一，体细胞胚胎发生技术相对要落后的多。
在离体培养形态发生中，杨树体细胞胚胎发生成功率和重复率比较低，有必要进一步研究。
1.1材料与方法
1.1.1愈伤组织诱导
1.1.1.1基因型与激素对愈伤组织诱导的影响
选取灰杨Ca、银白杨与大齿杨杂种AG、欧洲山杨Ta、美洲山杨与欧洲山杨杂种3#及欧洲山杨与美洲山杨杂种TaT，5个无性系水培苗叶柄，用0.1%氯化汞浸约3min，无菌水冲洗3次，接种于含有ZT（0，0.05，0.5mg/L）三个浓度水平和2,4-D（0.5，5mg/L）二个浓度水平的MS30培养基中，进行愈伤组织诱导，具体见表2。
30d统计接种外植体数、死亡数及产生愈伤组织数，并计算愈伤组织诱导率（产生愈伤组织数/外植体数）和死亡率（死亡数/外植体数）。
培养条件同2.1.2，下同。
1.1.1.2材料类型对愈伤组织诱导的影响
取欧洲山杨Ta、欧洲山杨与美洲山杨杂种TaT、美洲山杨与欧洲山杨杂种3#及灰杨Ca，4个无性系水培苗叶柄、茎段、叶片，三种材料接种于MS30+ZT0.05mg/L+2,4-D（0.5,5mg/L）培养基中，进行愈伤组织诱导。
同时取银白杨与大齿杨杂种AG考虑四种材料，接种于相同培养基中，见表1，调查方法同3.1.1.1。
表1愈伤组织诱导试验接种水培苗材料类型
Table1.Typeofexplantoncallusinductionof5aspenclones
无性系
叶柄
叶片
茎段*
茎尖
AG
+
+
+
+
Ca
+
+
+
NT
TaT
+
+
+
NT
Ta
+
+
+
NT
3#
+
+
+
NT
注a：
*-茎段长1-2cm不区分是否带芽;
注b：
+-进行试验的材料。
1.1.1.3光照对愈伤组织诱导的影响
取银白杨与大齿杨杂种AG和欧洲山杨Ta水培苗叶片及叶柄接种于MS30+ZT0.05mg/L+2,4-D0.5mg/L培养基中，进行愈伤组织诱导，光照强度分为三个水平：
1000-2000lux、20lux（弱光）、完全黑暗，其它培养条件同2.1.2。
（cm）
图1白杨无性系1/2MS20+IBA0.5mg/L20d生根情况
Fig.1Effectofgenotypeonrootingafter20daysculturedon1/2MS20+IBA0.5mg/L
1.1.1.4温度对愈伤组织诱导的影响
选取欧洲山杨Ta和灰杨Ca组培无菌继代苗茎尖（高0.5-1cm），接种于MS15+BA0.6mg/L+IBA0.2mg/L培养基中，进行温度控制试验，分三个水平：
23-27℃、0-4℃、15-20℃。
0-4℃、15-20℃下培养20d后，各处理10株（5瓶各2株）转入23-27℃条件下培养，20d调查存活及诱导情况。
光照为20lux。
泡沫的膨胀比的计算公式为：
E＝Vρ/（M-M1-M2）…………………………………………（式1）
参考文献
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